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奉贤区Transwell小室细胞培养参数

来源: 发布时间:2025-01-13

***做实验需要用正常的细胞摸索合适的细胞密度和培养时间,确定之后再加实验组,同时如果条件允许,设置一组已知高迁移性的细胞作阳性对照。注意细胞小室内外培养基的比例,不要使小室外培养基超过小室内培养基液面。观察细胞时一定要擦去小室内部贴在膜上的细胞。 默克提供的相关产品: Millicell?细胞培养小室:PET膜悬挂式或PCF膜站立式,膜孔径为5 μM或8 μM 药物跨内皮细胞渗透性实验 实验目的: 研究某种药物分子穿透内皮细胞的渗透率上海益启生物公司干细胞培养的优势。奉贤区Transwell小室细胞培养参数

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每隔2天用电阻仪测量细胞跨膜电阻值,直到达到平台,提示细胞已经形成致密单层;或者通过检测荧光染料荧光黄的通过率,以判断细胞刚好完全汇合。电阻仪测量因不伤害细胞,可以继续培养而比荧光黄法更为普遍地被采用。细胞单层汇合后,用DPBS清洗一次细胞,加入含有不同浓度药物(一般10-200μM)的缓冲液。如果要测药物从上至下的运输效果,则上层小室中加药物,下层培养板孔里只加缓冲液;反之则相反。将培养板在37℃条件下培养(60rpm震荡或者不震荡)1-2h,到达时间之后,分别从细胞小室和培养孔里取出一定 体积缓冲液(一般50μL )转移至新的转运分析板进行LC/MC分析。对于放射性标记药物,分别取出20μL缓冲液加入100μL闪烁液,通过多孔闪烁读板仪读值。奉贤区Transwell小室细胞培养参数

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