无血清样品选择 3kDa 孔径是为了尽可能提高外泌体的回收率。 有血清样品选择100kDa/500kDa孔径是为了尽可能去除细胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌体的白蛋白造成的影响。 研究者可根据样品的粘稠程度，以及需要制备的目标外泌体 / 囊泡 / 颗粒的大小分布来选择和优化超滤孔径(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便达到更好的得率和操作体验。 样品体积大于 30mL 时可以考虑用超滤杯或 Centricon-70 超滤管，请注意搅拌式超滤杯在200mL 以内时吸附损耗可能较离心式超滤管略偏高。如需进一步提高特定外泌体的纯度，可选用包被相应抗体的磁珠进行亲和纯化精制。买超滤浓缩管找益启生物公司。虹口区离心浓缩管代理价

如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话，那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性（构象差异）而影响浓缩效果，建议选用上一分子量级别的超滤管（如原本选用30k，此时可以选择10k）。 2）如果目的样本也不在滤过液中，那么： a）蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL？ b）用来确定样本浓度的方法是什么？是否可信？ c）目的蛋白是不是沉淀了？如果是的，具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。虹口区默克离心浓缩管报价益启生物公司就带您了解一下超滤浓缩管的特点。

用超滤对分子进行分级 通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切实际。事实上，膜的规格描述是基于截留而非通过 的性质。一项实验中，采用 100k NMWL 滤膜，大于 100kDa 的分子截 留率 >90%，但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜， 75kDa 的分子截留率为 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实 践中，如果要分离两种大分子，它们之间的分子量差异应该达到 10 倍 以上，或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间，则可达到比较理想的 分离。如果蛋白溶液较为稀释，低压下操作也有助于达到更好的效果。

浓度：当需要截留的样品浓度很低时，通量通常不受浓度影响。操作过 程中，随着溶质浓度的升高，增加的粘滞性和极化将导致通量降低。 温度：粗体，作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可 以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%，同时溶液粘度降低。 实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。 pH：改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构，蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白会沉淀，产生堵塞和得率损失。 污垢：溶液中除了目的分子造成的浓差极化，还有其它小颗粒和分子会 在膜上富集和沉淀，逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中，形成结晶和沉淀。对于不同的需求我们选择不同的超滤浓缩管系列。

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