特点与优点： 高产：没有样品转移，损失更少 温和：特别的渗滤设计使换液过程更温和 快速：从细胞裂解到纯化、优化一共需要5次低速离心 灵活：一种离心方法，***支持各种样品制备所需 蛋白缓冲液置换、脱盐和透析 每一种蛋白的制备都是***的，常常需要摸索和优化。应该考虑为特定蛋白选择相应的工具进行换液和透析。您可以从操作较快 Amicon? Pro 的渗滤法或更温和的 D-Tube?透析法中选择更适合样品的操作方法。 选择更直接而有效的方法！ Amicon? Pro能做到一步离心完成脱盐换液益启生物公司主要超滤浓缩管代理销售。静安区默克15ml超滤浓缩管联系电话

蛋白亲和纯化（无需换液和浓缩） * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超滤管～1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法，但溶液体积和离心时间等需要略加优化。 3次低速离心，总耗时~75分钟（含60分钟孵育时间） 1. 在Amicon? Pro上样池中加入至多1000μL亲和纯化树脂（沉降的柱床体积）和至多9 mL漂洗缓冲液。1,000×g离心1 min平衡树脂。（柱床）树脂量≥ 500μL时采用2,000×g离心4 min。 2. 加入至多9 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h*，其间可温和搅动促进结合。杨浦区浓缩管报价超滤浓缩管哪家比较靠谱？

外泌体用于细胞学或动物实验前的无菌处理 已经经过上述方法制备的外泌体在进行细胞或动物实验之前还需进行一步除菌过滤，这个时候考虑到得率，应该采用离心法处理，以减少过滤时的外泌体样品损失。 超滤方法纯化具体操作步骤举例 Amicon? Ultra-15 超滤管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽滤对样品进行澄清[目录号SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超滤管(目录号UFC901024,10 kDa MWCO) ，4000g离心 X 10 min。 从超滤管内管及收集管吸走PBS。向超滤管加入15 mL 样品。4000g 离心30 min 浓缩。倒空收集管。加入14 mL PBS 进行缓冲液置换，温柔吸打样品数次。4000g离心 30 min。从浓缩管吸回处理好的样品。(30X 浓缩) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超滤管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 与此操作流程兼容 *

膜的吸附损失 对于浓度很低及珍贵的样品，除了考虑截留效率和操作方便外，额外 要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损 失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同，默克密理博的 Ultracel? 再 生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附**小，是 Amicon? Ultra 超滤管 等超滤产品成为优先的**技术关键之一。滤膜和装置表面对溶质的 吸附对样品收率会产生直接影响，所以如果希望尽可能提高得率，就 应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选 用膜面积小的装置，同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列 离心式或搅拌式装置，配合不同的膜面积、不同的截留分子量的切向 流系统，支持您获得理想的处理效果。超滤浓缩管的好处您了解多少呢？

将装有样品的Amicon? Ultra 0.5 mL超滤管接在Amicon?Pro上样池的下端。 3. Amicon?Pro上样池内加入预先准备好的1.5 mL含有染料的反应混合液。 4. 4,000×g离心15 min。 5. 优化选做：将样品在室温下多孵育30 min。 6. 上样池中加入1.5 mL PBS± NaN3。 7. 4,000×g离心15 min换液同时浓缩。 8. 倒转Amicon? Ultra 0.5 mL超滤管1,000×g离心回收标记好的抗体。 特点与优点： 特别的反转离心回收设计，滞留体积很小，样品损失少， 样品回收率通常>90% 浓缩倍数达到50-200倍 Ultracel?再生纤维素膜和聚丙烯外壳将吸附降至比较低 特别设计的死体积防止离干，保证样品回收率和活性 上海超滤浓缩管哪家比较好？徐汇区默克离心浓缩管哪家好

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加入漂洗缓冲液（体积是树脂柱床体积的7.5倍）并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。 4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。 5. 加入洗脱缓冲液（体积是树脂柱床体积的5倍）与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。 6. 如果是纯化抗体，在纯化产物中加入中和缓冲液。 * 进行较大体积操作时，可以延长结合反应时间，并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon? Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon? Pro时请使用目录号ACS500024。静安区默克15ml超滤浓缩管联系电话