多聚酶链反应:多聚酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)又称体外核酸扩增技术,即对特定DNA的片段进行非细胞依赖性扩增,其基本过程是将已提取的待测DNA在一对寡核苷酸引物、三磷酸核苷及耐热DNA多聚酶存在的情况下,分别于90℃、55℃和72℃下经变性、退火和核苷酸链的延伸,如此循环数十次以扩增DNA。扩增物经溴乙锭染色后作凝胶电泳,再于紫外灯下观察特定碱基对数的DNA的片段,以出现橙红色的电泳带为阳性。若需进一步鉴定,可将凝胶分离的DNA回收再用特异性探针进行杂交分析。PCR在免疫学中通常应用于ai基因、凋亡相关基因的表达、HLA的定型与基因分析、免疫球蛋白和T细胞受体多样性研究以及细胞因子、粘附分子的检测。PCR的方法有30余种,如多重PCR、巢式PCR、二次PCR、共享引物PCR、逆转录PCR、锚定PCR等等。现临床研究蕞常用的是逆转录PCR,现简介如下:首先提取细胞总RNA,然后在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板合成cDNA,随后加入特异性引物进行扩增,再经琼脂糖电泳检测特异性的DNA,从而反映出某种基因的转录状况。苏州含光微纳科技有限公司的微流控产品经过精密加工,能够提供精确的流体控制和稳定的实验环境。湖南诊断方式微流控产品质量
含光苏州纳米城生产基地拥有730平10万级洁净设施及拥有设备车间,太仓生产基地5000平生产车间,日产能超过百万片。客户选择材料,如PPPC/COC/COPPMMA/PS等,并考虑尺寸与设备的功能、生产和包装的巧妙、制造过程的鲁棒性和成本。提出针对时间和环境的。各种解决方案,与客户共同完成产品优化,达到经济高效的生产。含光团队提供相关设计文件、协助客户完成医疗或IVD产品注册。如果对微流控芯片有相关的需求,欢迎致电含光微纳科技。 天津国产微流控产品研发微流控产品的设计经过精心优化,能够较大程度地减少流体浪费,提高实验效率。
含光微流控产品的驱动方式:表面张力驱动通过微通道或者微结构的表面张力(毛细力),实现液体的流动和控制,由于无需任何外力,也被称为"自驱动"。多样的结构尺寸变化可以实现液体表面张力自驱输运的可控调制,通过大范围的驱动力调制,可以提升张力自驱输运的性能,实现控制流速和停留时间等。如雅培的Triage。线性驱动通过机械力(如活塞)完成液体的移动,一般为线性的单维度的位移。反应试剂存储在胶囊或储液池中,通过机械力(如按压)打破储液池物理间隔或者实现不同液体的移动与混合。如雅培的i-Stat。
微流控驱动方式之声表面波驱动:表面声波:声波诱导固液界面的液流,导致液滴的移动。
Surface acoustic waves 表面声波特点:暴露在空气环境中的液滴放置在疏水表面上,微流体操作单元主要由声波控制的运动模块组成通过声呐实现,液滴的形成、运输和混合大多是可以自由编程的
原理:作为电湿润的替代方法,使用振幅为纳米级别的声波声波由置入电极中的压电转换芯片例如石英形成芯片疏水面的液滴可以在声波的影响下运动
操作单元测量:由疏水面的测量点完成,液滴经过测量点时一部分液体被留在测量点中进行测量混合:是SAW平台的内在操作单元在声波的影响下液体内部一直在发生循环进而混合
Surfaceacousticwaves表面声波应用PCR:由SAW、加热装置组成的PCR仪用于200nL的液滴中的DNR的PCR,为防止液滴的蒸发,在液滴表面覆一层不相溶的油滴,测量DNA的敏感性达到0.1ng
优点:能够自由的操作小的液滴更灵活,控制速度可根据液滴的表面张力调节
缺点:电极位置固定,可程控性差长期的稳定性差芯片界面制作难,费用高 含光微纳的微流控产品具有优良的稳定性,能够长时间保持高精度的实验结果。
压力驱动层流装置特点:通过压力梯度在微管道中形成稳定的层流;通过外部或者内部的压力源实现,例如通过针管、泵或者微泵,气体扩张原理等。样品和试剂以脉冲或者连续的方式进入反应体系。
原理:在不同的流速和管道维度中维持稳定的严格的层流
可预测的流速
可控的混合方式
可控的分期安排
蕞早的例子是流体动力聚焦,在流式细胞仪中以连续的方式排列细胞进行分析和分类
操作单元:基本的单元是至少两种液体交汇的地方,实现可控的混合也可以用于微粒或者细胞的聚焦,聚焦功能需要一个中心流体和两边对称的管道实现,调节两边液体的流速可以调节两边液体的宽度,调节中间液体的位置也可以用于分离细胞或者微粒,可以利用磁力、声波或者电、流体动力学性质等分离微瓣膜 含光微纳的微流控产品具有优异的性能指标,能够满足客户对实验结果的精确要求。陕西国产微流控产品哪家好
微流控技术的应用可以实现高通量实验,加快科研进程,提高研究效率。湖南诊断方式微流控产品质量
抗原与抗体的制备
抗体的制备
单克隆抗体和多克隆抗体:单克隆抗体(McAb)用杂交瘤技术制备(详见第三章),其特点:特异性好,亲和力高,只识别一个表位。多克隆抗体(polyclonal antibodies)存在于免疫动物的血清中,可通过直接分离血清获得,主要应用于免疫学诊断。也可经中性盐析和层析法进一步提出单一类别的免疫球蛋白(多为IgG),使诊断及各种研究在更精确的水平上进行。优点:可识别多个表位,缺点:特异性差,易出现交叉反应,亲和力低,通过其他抗原的吸收可获得针对单个抗原决定簇的单价因子血清。嵌合抗体和噬菌体抗体等基因工程抗体制备详见第三章。 湖南诊断方式微流控产品质量