di yi节检测抗原抗体的体外方法
抗原抗体反应的特点
抗原抗体结合的比例性与结合物的可见性抗原与抗体的结合能否出现肉眼可见的反应,取决于两者的比例。若比例合适,则可形成大的抗原抗体结合物,出现肉眼可见反应现象;反之,虽能形成结合物,但体积小,肉眼不可见。由于这种分子比例的差异,分别形成了三种区带现象。等价带表示抗原与抗体比例蕞合适,形成大而多的结合物,此时在反应体系中测不出或有极少游离的抗原或抗体;抗体过剩带(前带)和抗原过剩带(后带)皆表示抗原与抗体的比例不合适,所形成的结合物少且小,其反应体系中存在着游离的抗原或抗体。小分子可溶性抗原,因其表面积大,容易导致后带现象;而细胞等颗粒性抗原,在与抗体反应时则易出现前带现象。因此在抗原抗体检测中,为能得到肉眼可见的反应,在了解抗原的物理性状之后,对抗原或抗体进行稀释,以调整二者的比例。
抗原抗体反应的阶段性抗原抗体反应可分为两个阶段。第一阶段是抗原抗体的特异结合阶段,此阶段jin需几秒到几分钟、尚无可见反应;第二阶段为可见反应阶段,需数分钟、数小时乃至数日,受各种因素影响。 我们不断推动技术创新,为客户提供先进的微流控产品,帮助他们保持竞争优势。江苏介绍微流控产品水平
抗原抗体反应的主要影响因素
(一)抗原和抗体浓度、比例抗原和抗体浓度、比例对抗原抗体反应影响比较大,是决定性因素,如前所述。
(二)电解质抗原与抗体特异性结合后,其亲水性减弱,分子表面所带的电荷易受电解质影响而失去,复合物间的排斥力下降,导致第一阶段已形成的可溶性结合物能进一步联结,出现明显的凝集或沉淀现象。试验中常用0.85%的NaCl溶液作为稀释液,以提供适当浓度的电解质。
(三)温度适当的温度可增加抗原与抗体分子碰撞的机会,加速结合物体积的增大,一般而言温度越高,形成可见反应的速度越快,但过高则会使抗原或抗体变性失活,影响试验结果。一般在37℃下进行试验,但也有些抗原抗体在4℃下进行反应较好。
(四)酸碱度pH过高或过低都将直接影响抗原或抗体的理化性质。例如,当pH降至3.0左右时,因接近细菌抗原的等电点,细菌表面蛋白或其他基团所带的电荷消失,其相互间的排斥力丧失而导致非特异性酸凝集,影响试验的可靠性。 广东分析仪器微流控产品苏州含光微纳科技有限公司的微流控产品经过精密加工,能够满足各种高要求的实验需求。
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抗原与抗体的制备
抗原与抗体是血清学反应的物质基础。抗原的制备与纯化是获得特异性抗体的先决条件,所得到的抗体又可反过来纯化和检测抗原。
抗原的制备抗原种类繁多,按其物理性状可分颗粒性和可溶性两类。前者指细胞性抗原(包括细菌抗原),其制备较为简便,一般用新鲜细胞以无菌生理盐水或磷酸缓冲液洗涤后配成一定浓度。若系细菌抗原,则取新鲜培养物,经集菌作如下处理,H抗原因不耐热用0.3%~0.5%甲醛处理,O抗原耐热可加热100℃2h去除H抗原后应用??扇苄钥乖梢允窍赴?、细胞浆、细胞核及核膜等细胞组成部分,也可能是经细胞分泌至体液中的一些可溶性因子。细胞组成部分常需经过机械或酶解法等破碎、离心获得粗制抗原,并通过选择性沉淀或层析等方法进一步纯化。而体液中(如血清等)的可溶性抗原则可直接用生化手段获得所需成分。有些可溶性抗原jin具有免疫反应性,而无免疫原性,此类抗原尚需与载体偶联方可成为完全抗原。 含光微纳的微流控产品具有良好的兼容性,能够与其他设备和实验平台无缝集成。上海微流控产品
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