胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量3.5%~5.0%(w/v)。3、血红蛋白含量≤0.02%(w/v)。4、无菌检验阴性。5、支原体检验阴性。6、细菌内的毒性≤5(EU/ml)。7、牛腹泻病毒阴性。8、大肠杆菌噬菌体阴性。9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14)生长曲线(接种浓度)较大增殖浓度≥2.5×106个/ml,细胞倍增时间≤15h克隆率≥85%。胎牛血清支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生长曲线(接种浓度)大增殖浓度≥2.5×106 个/ml。丽水细胞培养用胎牛血清哪里有卖
胎牛血清:胎牛血清是由胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等,其组成成份大部分已知,但还有一部分尚不清楚,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。其中不含细胞、纤维蛋白和凝血因子。胎牛血清在细胞培养方面通常优于其他类型的血清。由于胎牛从未接触过外界,与新生牛和小牛血清相比,抗体含量明显降低,故抗体与培养细胞发生交叉反应的风险也较低,是理想的细胞生长补充剂。所有胎牛血清均在当地兽医部门的监督下从注册的出口屠场采集,符合国际动物协会要求。十堰特级胎牛血清价格热灭活:一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化。
胎牛血清的处理方法主要有以下几种:1.活性炭处理,活性炭可以与亲脂性分子结合,因此已用于从FBS中去除Hormone,例如雄雌二醇、孕酮、皮质醇、睾酮、三碘甲状腺原氨酸(T3)和甲状腺素(T4)。这些血清脂质Hormone倾向于干扰免疫测定系统和胰岛素测定方法。2.透析,透析可以从FBS中去除所有分子量小于10,000MW的分子。这包括极性和非极性分子。去除细胞因子、葡萄糖、氨基酸和许多其他物质。透析还可以去除FBS中的Antibiotic和其他外源性分子。
用于体外细胞培养的胎牛血清及其制备方法:将已存放血浆的试管置入-20~0℃环境下保存备用;将血浆分离提取胎牛血清,具体步骤如下:取6-12g氯化钠、0.1-0.5g磷酸二氢钾和1.4-2.4g磷酸二氢钾放入容器中,向其中加入300-700mL去离子水,搅拌均匀,使用质量分数为10-20%的盐酸溶液调节pH为7.0-7.3,将上述所收集的血浆倒入容器中,搅拌均匀,温度设定为25-38℃,静置8-20min,得混合液C;22)将上述的混合液C放入离心机中离心分离8-20min,转速设定为3000-10000r/min,取上清液。血清的主要作用是提供基本营养物质、提供和各种生长因子、提供结合蛋白。
如何区别真假胎牛血清:外观,拿到血清,较先接触的是血清外观,对于缺少细胞培养经验的人来说,外观的判断尤为重要,颜色根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采的血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。国产血清的点很分散,大多是由屠户采的血后马上离心收集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡黄色,当然,国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。总的来说,国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清,质量较好的呈现出谈黄、微红色,差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然,热灭活胎牛血清或保存不当的血清,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。胎牛血清中含有大量对细胞生长必需的生长因子。南通细胞培养用血清厂家
血清的保存应该注意:热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。丽水细胞培养用胎牛血清哪里有卖
胎牛血清的生产工艺:胎牛血清适合脉冲示踪实验(同位素标记研究细胞代谢)适合转染CHO后的筛选,避免外源小分子对细胞产生干扰。透析胎牛血清是在胎牛血清的基础上进行加工的。胎牛血清在无菌条件下要经过0.1微米膜三重过滤,要进行一系列的检测,包括理化性质检查(如渗透压和pH值),成分检查(如内的毒性和血红蛋白)、外源因子检查(如细菌、病毒和支原体)以及促进细胞增殖的检查等。透析胎牛血清为保证其性能和安全性,也需具备胎牛血清的这些工艺和检查。丽水细胞培养用胎牛血清哪里有卖
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