胎牛血清有必要做热灭活吗?实验证明,经过正确处理的热灭活胎牛血清,对于大多数的细胞而言都是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至可能因为高温处理影响了血清的质量,从而造成细胞生长速率的降低。经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此类沉淀物增加得更多,这常常会使研究者误认为是微生物的分裂扩增。因此我们建议客户,若非必须,可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省客户宝贵的时间,更确保血清的质量。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。南京赛业血清多少钱
挑选胎牛血清:Antibiotic含量,Antibiotic的使用情况,也需考虑在内。国内外的血清,都不对Antibiotic进行测试(无四环素胎牛血清之外)。但相较于国内Antibiotic的滥用,在其他国家,Antibiotic使用大多较为严格,用量有限,同时每头牛的产品包括血清都可以追溯源头,所以国外胎牛血清不含Antibiotic或者含量极低。内的毒性含量,在挑选血清时,还应关注内的毒性含量的高低。内的毒性含量高,容易引起细胞衰老、凋亡等情况,好的血清,内的毒性应该是极低的。因此,内的毒性可作为血清等级评判标准之一,其含量的高低,在一定程度上,体现了血清品质的优劣。南京赛业血清多少钱胎牛血清保存条件是在-20°C冻存。
如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?未拆封的血清,一般情况下应存放于-10℃至-20℃,在产品规定的效期内均可使用,若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至合适大小的无菌离心管内,再放回冷冻。将血清从冷冻冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融,或通过水浴锅促使其溶解。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。完全溶解后建议尽快使用,若长时间储存在2-8℃,血清中的各种(脂)蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可见的混浊。
胎牛血清在细胞培养中的作用:1.提供对维持细胞指数生长的Hormone,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等,能结合或调节它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到释放毒性作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。7.参与细胞冻存。在细胞培养中,胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%~20%(常见为10%)的。具体到不同试验,应依据文献报导,或细胞类型或基础培养基的成分来确定较佳浓度。胎牛血清应在-20℃储存,运输应干冰冷链运输,避免反复冻融,确保血清中因子活性不受影响,保证血清优良品质。胎牛血清是由胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物。
选购胎牛血清:为了保证胎牛血清产品的均一性和稳定性,胎牛血清生产需遵循相关规定进行操作。一般来说,胎牛血清制备需经过以下几个步骤:采集,离心,分离,无菌过滤,用来制作血清的牛血,是通过采集多头牛的血液混合而成的,因此,想要在同一批次得到大批量品质稳定的血清,获得大量健康、符合当地法律法规的供体动物,是先决条件。采集(5-8月龄牛胚胎)、离心以及粗血清分离的过程,不能保证完全的无菌,因此,整个过程中,无菌过滤就成为重中之重。严格的无菌过滤,能够尽可能祛除细菌、支原体等微生物的污染,保证胎牛血清品质。胎牛血清的无菌检验:阴性;支原体检验: 阴性;细菌内有毒的 ≤5(EU/ml)。十堰进口血清供应商
热灭活:一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化。南京赛业血清多少钱
用于体外细胞培养的胎牛血清及其制备方法:包括以下步骤:采集怀孕母牛的胎牛血液获得血浆,具体步骤如下:采用含有体积含量4-6%葡萄糖的注射液、含有质量含量0.2-0.6%柠檬酸钠的水溶液进行混合,将上述两者混合后的混合液A置入取血容器内充分滋润容器内壁;将胎牛血液置入上述滋润过的取血容器内,摇动使其与胎牛血液均匀混合;将混合均匀的含有胎牛血液的混合液B置入采的血试管,保持血液在40℃以下恒温状态,然后将采的血试管在离心机中以3000-14000r/min转速旋转5-30分钟,分离出血浆、血小板、血球,将所得血浆、血小板、血球分别采用采的血试管分离存放;南京赛业血清多少钱
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