胎牛血清参与细胞培养实验为细胞生长提供必要的营养成分,对于研究细胞的科学人士来说,血清都不会陌生,其中胎牛血清是实验操作的常客。一般而言,胎牛血清是指怀孕5-8个月的母牛被屠宰后,发育未完全的胎牛心脏穿刺后,通过一系列工艺处理获得。此时胎牛血中含有特殊的生长发育因子,一旦胚胎发育完全这些因子自动消失。胎牛血清的灭活,一般是用水浴加热的方式来加热已经完全解冻的血清,那么需要注意的是,加热的过程中一定要规则地将血清摇晃均匀。而之所以这么做,是为了能够让血清中的补体成分去活化。不过胎牛血清的灭活并不是强制的要求,客户可以自行选择是否进行灭火处理。胎牛血清提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。韶关不含外泌体血清供应商
血清的保存应该注意:血清中的沉淀物、絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量,可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理,显微镜下"小黑点"。经过热处理过的血清,沉淀物的形成会明显增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染,一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量。南通特级血清供应商解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
避免产生沉淀物:请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。若血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。
血清的主要作用:提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。提供和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质(氢化可的松、)、类固醇(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。胎牛血清的细菌内有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹泻病毒:阴性;大肠杆菌噬菌体:阴性。
非正规胎牛血清的产品会存在很多的问题:疫区来源,无合格质检使胎牛血清存在生物学污染:支原体、噬菌体、病毒、原虫等,会直接影响实验的结果和稳定。工艺不规范,导致采集的原血放置时间过长或操作不当导致溶血,血液中血细胞裂解,血清颜色呈红色或暗红色,这样的血清含有许多胞内产物,里面很多物质都会对细胞有刺激作用,影响实验的稳定性和数据的真实性。血清批次不稳定,添加来补?很多不法商贩拿到低廉的疫区原料血清进行加工生产,为了保障血清的培养效果会对血清进行处理,较为常见的是添加、转铁蛋白、BSA、生长因子等,还有的会和新生牛血清、培养基等勾兑,更有甚者用的根本就不是牛血清,此类操作对所有生物学实验都有巨大的影响。血清提供和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质、类固醇(雌二醇、睾酮、孕酮)等。十堰无外泌体血清价格
胎牛血清起酸碱度缓冲液作用。韶关不含外泌体血清供应商
国内科研人员购买胎牛血清的现状:难辨真假。 原因很多,一方面是国内血清市场这几年是愈发的混乱了,很多商家都盯上了这块“蛋糕”,现在国内市场能见到的各种来源的血清品牌大于50种,使用者在不了解国家政策和相关知识的前提下很难去辨别和选择安全、稳定、合规的胎牛血清。另一方面是客户很难找到血清相关的真实信息,即便想去分辨也无从下手,只能听商家的了。现在允许进口的血清产地很少,只有南美(乌拉圭)、澳大利亚、新西兰。对血清行业有些了解的人看到这些,就会知道能够进口到国内的胎牛血清注定是很少的。韶关不含外泌体血清供应商
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