为何血清会存在批间差?如何避免此影响?因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,每个批号的组分和组分含量都是不固定的,因此批间差异是可能存在的。为了避免批间差异对细胞的影响,XP建议先进行批号测试,筛选合适的批号,备好库存(血清未开封时,在-20℃下可保存5年)。如需更换血清批次或产地,建议先试用后再大量订购。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何预防和处理沉淀?血清中沉淀主要有:纤维蛋白(絮状沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘连蛋白,磷酸钙[1](显微镜下小黑点沉淀),胆固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是温度的改变。热灭活,反复冻融,长期储存于2-8℃或者室温。预防措施与建议:因此不立即使用的血清应保存在-20℃或以下。血清指在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。徐州无外泌体血清供应商
多数细胞培养中血清的热灭活并不是必要的。很多场合下,热灭活并不会改善细胞的生长,却降低了支持细胞生长的能力。即使在少数有促进的情况下,其促进的比率也是微不足道的。另外,血清的热灭活导致的沉淀常常被认为是微生物的污染,从而给用户和供应商都带来不必要的麻烦。所以胎牛血清不推荐热灭活。热灭活一般是指在做免疫相关的试验中,通过加热灭活掉血清中的补体,以避免对免疫试验的影响。在胎牛血清中,由于胎龄原因,尚未形成完整的补体系统,因此,胎牛血清不会真正干预免疫试验。故不需灭活。并且,热灭活反而可能导致胎牛血清中部分重要的生长因子的活性衰减,进而影响细胞培养效果。芜湖优等胎牛血清报价胎牛血清的细菌内有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹泻病毒:阴性;大肠杆菌噬菌体:阴性。
购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程在温度较低的状态下慢慢进行,待溶解完成,我们观察到的胎牛血清会表现出黄色或红色。并不是越红越好,也不是越黄越好,淡黄色到淡红色才是比较正常的颜色范围。很多培养细胞的宝宝会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题。那么,血清中可能出现的沉淀物是什么?纤维蛋白,它是经常出现的较大的沉淀物,可以达到1-2mm,可以用肉眼观察到。磷酸钙,它也是常见的一种沉淀物,通常会使血清出现浑浊,并且在37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质,它们也是血清中出现沉淀物的常见原因。关于细胞生长,其实很多试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养,当然血清生产商也是这样说的。
胎牛血清用于细胞培养不过百年历史,但发展得相当快,每年的需求量也不断上升。在胎牛血清和细胞培养技术的方面,国外起步较早,认识也较深入。应该说,胎牛血清在细胞培养基方面,具有的优势。因为其营养,所以几乎适合所有类型的细胞生长,每种细胞都可以从中摄取自己所需的养分。而且,胎牛血清还含有适合细胞贴壁铺展以及抗氧化和医治的成分,这使得它成为天然通用的很好培养基。据研究,胎牛血清中含有至少四百多种成分,而且这些成分的含量在不同批次的血清中存在波动,有时甚至波动较大。因此,在持续使用胎牛血清时,要注意尽量同一批次的。通常,同一批次的血清数量有限,一次大约不超过2000升。因此,在更换批次时,要注意观察细胞的生长和状态。血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物。
那么如何保障胎牛血清的品质呢:内有毒的,内有毒的含量越低的血清,胎牛血清级别就越高:内有毒的≤10EU/ml时,此血清为特级胎牛血清;10EU/ml<内有毒的≤ 25EU/ml时,此血清为优级胎牛血清;内有毒的≥ 25EU/ml时,此血清为标准级胎牛血清;应选取内有毒的含量低的胎牛血清,使培养的细胞更健康。如果选取内有毒的较高的血清,细胞一直泡在“毒液”里,短期内细胞看不出太明显的变化,但长期的话细胞会衰老得较快,从而对实验结果造成严重影响。微生物:微生物包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原毒等。严格的生产工艺可以对细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制。同时3次0.1um过滤可以完全祛除支原体(支原体直径0.2~0.3um)。通过病毒的检测,可以严格控制牛腹泻、牛细小、蓝舌病等病毒。通过非疯牛病疫区生产还可避免朊病毒。血清提供和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质、类固醇(雌二醇、睾酮、孕酮)等。深圳标准血清价格
胎牛血清有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到医治作用。徐州无外泌体血清供应商
不同产地的胎牛血清,品质也是相差甚远。值得注意的是,胎牛血清是动物源生物制品,我国对于动物源制品的进口一直有很严格的规定,目前我国批准进口的胎牛血清来源是澳大利亚、新西兰和乌拉圭,合法正规途径进口的胎牛血清必须在产品包装上标注血源地。这意味着,其他血源地的胎牛血清在我国是不允许进口的,在选购进口产品时,要规避选取来源为禁止输入国家的相关产品。合法进口的胎牛血清需符合我国海关和检验检疫部门的监管要求,具备真实完整的进口货物报关单和出入境检验检疫入境货物检验检疫证明。选购胎牛血清时,需要核对厂家是否能提供购买批次的进口报关单和检验检疫证书,乌拉圭来源的血清还必须具有出口许可证,确保产品来源安全可追溯。徐州无外泌体血清供应商
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