细胞培养中出现黑点是污染吗？如何处理？一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：细胞生长过老，破碎的细胞残??；血清质量不好，反复冻融的结果；配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长；配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点；培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除。胎牛血清起酸碱度缓冲液作用?；窗参尥饷谔逖?/p>

非正规胎牛血清的产品会存在很多的问题：疫区来源，无合格质检使胎牛血清存在生物学污染：支原体、噬菌体、病毒、原虫等，会直接影响实验的结果和稳定。工艺不规范，导致采集的原血放置时间过长或操作不当导致溶血，血液中血细胞裂解，血清颜色呈红色或暗红色，这样的血清含有许多胞内产物，里面很多物质都会对细胞有刺激作用，影响实验的稳定性和数据的真实性。血清批次不稳定，添加来补？很多不法商贩拿到低廉的疫区原料血清进行加工生产，为了保障血清的培养效果会对血清进行处理，较为常见的是添加、转铁蛋白、BSA、生长因子等，还有的会和新生牛血清、培养基等勾兑，更有甚者用的根本就不是牛血清，此类操作对所有生物学实验都有巨大的影响。金华无外泌体血清多少钱胎牛血清的其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚。

国际上流行的【血清融化三步法】可较为大限度地保存血清中因子的活性，不会产生沉淀，同时能缩短血清融化时间。关于胎牛血清的灭活：真正的胎牛血清因为胎牛没有形成有效补体，如果针对补体灭活的话，就不需要。其他情况根据实验设计来决定。胎牛血清的浓度：胎牛血清通常是以2%～20%的比例加到基础培养基中，混合后配成完全培养基。曾有文献报道，不同胎牛血清浓度对细胞存在一定的影响，尤其是干细胞和原代细胞。具体很好浓度需要用户根据自己的实验来确定，以既保证培养的效果，又避免血清的浪费。

血清的安全风险因素主要有以下方面：地理因素，地理因素包括血清产地的流行病学趋势、基础设施情况以及血源供应量。措施得当可以预防能避免的动物疾病，同时产地国稳定可靠的基础设施，对保证供应链的安全也十分必要。血源是否充足则决定了血清是否可源源不断地持续供应。生产，生产遵循cGMP指南，则可保证血清质量，降低有关无菌过滤、掺加和标签错误的风险。cGMP为现场审核的开展提供了框架。生产过程中对血清进行有效的无菌过滤也是十分重要的。产品质控，有效的无菌过滤使得细菌污染的风险很低。对于支原体和病毒筛查，一些相关规范内部存在一定的方法灵活性，这使得采取不同方法进行支原体和病毒筛查成为可能，并且有时使得要筛查的病毒种类无需太多。有效辐照，要进一步降低外源因子风险，可对血清进行辐照(25–40 kGy)。但辐照并不能保证病毒污染的完全去除。辐照过量会导致FBS效能下降。血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物。

血清的保存应该注意：需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月，由于血清结冰时体积会增加约10%，因此，血清在冻入低温冰箱前，必须预留一定体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。瓶装血清解冻需采用逐步解冻法：-20℃至-70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温，待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀（小心勿造成气泡），使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。血清提供和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质、类固醇（雌二醇、睾酮、孕酮）等。莆田赛业血清哪里有卖

胎牛血清的蛋白质含量：3.5%～5.0%（ w/v）；血红蛋白含量 ≤ 0.02%（ w/v）?；窗参尥饷谔逖?/p>

添加胎牛血清的时候要注意避免把沉淀加入培养液，因为如果培养液有沉淀的存在，会使得其中培养的细胞产生大量的黑点，除此之外，细胞的表面还很可能会覆盖一层油状物质，总之出现这样的情况会极其不利于细胞的正常生长。那么为了较为大程度减少血清的损失，可以把所有有沉淀的血清进行收集并做离心处理，之后便可将上清液加入培养液中使用。注意解冻的方法：再高质量的胎牛血清也要在使用的时候坚持谨慎的原则，因此在解冻血清的时候，要细心地考虑到其解冻时体积一般会增大的特点，事先为血清预留出能够容纳膨胀体积的空间。如此一来，便不会发生污染或者容器冻裂的情况。另外较为好采用国际通用的解方式解冻血清?；窗参尥饷谔逖?/p>