很好的胎牛血清对细胞成长的作用:提供细胞生长所需的天然或天然的生长因子。提供天然的结合蛋白,能识别氨基酸、脂质、金属离子和等,能结合并调节它们的活性。已知清蛋白即具有上述功能,并对细胞代谢、生物合成、增殖和存活具有潜在的影响。又如胎牛血清中富含胎球蛋白,具有多个钙离子结合位点,因而能调节和维持血清中的钙离子浓度。天然含有粘附蛋白等细胞外基质成分,促进细胞的附着、铺展。提供医治功能。这主要通过血清中的某些蛋白与有毒的金属离子结合来完成的。如金属硫蛋白,对多种重金属有高度亲和性,并可消除细胞生长环境中的氧自由基,具有很强的抗氧化活性,可防止细胞衰老。提供酸碱度缓冲的作用,以及维持渗透压。提供蛋白酶抑制剂,使细胞免受蛋白酶的损伤。因此在细胞消化时,常用含血清的培养液终止胰酶对细胞的作用。牛血清是细胞培养中用量较为大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份。常州细胞培养用胎牛血清哪里有
血清的主要质量标准:低内有毒的,无细菌、支原体、噬菌体、病毒等污染。无外源添加因子,不含、等。经过上百种细胞株和近百种原代细胞的验证,细胞状态良好。很好的、负责的血清品牌,都会做多细胞培养鉴定,观察细胞生长状态,做多项、多批次横向对比,才能较为终验证。使用便捷性:对于包装规格来说,常见的血清有500ml、100ml和50ml装的。各有优势。500ml适合一次性大量使用的,订购和储存更方便。100ml适合每次中等规模细胞培养使用的。50ml分装的就更适合每次小量细胞培养,也是现在比较流行的包装方式。南通标准血清哪家好一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌,如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤。
细胞培养中出现黑点是污染吗?如何处理?一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:细胞生长过老,破碎的细胞残?。谎逯柿坎缓?,反复冻融的结果;配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;配制培养基的水质、容器不合格??捎τ美胄?、过滤的方法去除这些黑点;培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。
添加胎牛血清的时候要注意避免把沉淀加入培养液,因为如果培养液有沉淀的存在,会使得其中培养的细胞产生大量的黑点,除此之外,细胞的表面还很可能会覆盖一层油状物质,总之出现这样的情况会极其不利于细胞的正常生长。那么为了较为大程度减少血清的损失,可以把所有有沉淀的血清进行收集并做离心处理,之后便可将上清液加入培养液中使用。注意解冻的方法:再高质量的胎牛血清也要在使用的时候坚持谨慎的原则,因此在解冻血清的时候,要细心地考虑到其解冻时体积一般会增大的特点,事先为血清预留出能够容纳膨胀体积的空间。如此一来,便不会发生污染或者容器冻裂的情况。另外较为好采用国际通用的解方式解冻血清。胎牛血清常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。
如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。小牛血清取自出生10-30天的小牛。常州细胞培养用胎牛血清哪里有
血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。常州细胞培养用胎牛血清哪里有
血清的保存应该注意:需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月,由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。常州细胞培养用胎牛血清哪里有