多数细胞培养中血清的热灭活并不是必要的。很多场合下,热灭活并不会改善细胞的生长,却降低了支持细胞生长的能力。即使在少数有促进的情况下,其促进的比率也是微不足道的。另外,血清的热灭活导致的沉淀常常被认为是微生物的污染,从而给用户和供应商都带来不必要的麻烦。所以胎牛血清不推荐热灭活。热灭活一般是指在做免疫相关的试验中,通过加热灭活掉血清中的补体,以避免对免疫试验的影响。在胎牛血清中,由于胎龄原因,尚未形成完整的补体系统,因此,胎牛血清不会真正干预免疫试验。故不需灭活。并且,热灭活反而可能导致胎牛血清中部分重要的生长因子的活性衰减,进而影响细胞培养效果。胎牛血清提供对维持细胞指数生长的,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。宁波赛业血清哪里有
如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。宁波赛业血清哪里有胎牛血清提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
很好的胎牛血清:免疫球蛋白,国产血清的只是定性检测,结果也很不准确,进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能完全体现出的时的牛龄情况,国产血清,基本都是新生牛的,血清中容易产生IgM,IgG的含量也偏高,进口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。含量,此外,的使用也是要考虑在内的。国内外的血清,都不对进行测试(无四环素胎牛血消除外)。其中,由于国外使用较为严格,用量有限,同时每头奶牛的产品包括血清都可以追溯源头,所以国外胎牛血清不含或者含量极低。但是国内由于使用普遍,血清中残留量很高,导致国产血清质量很差,不利于细胞培养。
那么如何保障胎牛血清的品质呢:内有毒的,内有毒的含量越低的血清,胎牛血清级别就越高:内有毒的≤10EU/ml时,此血清为特级胎牛血清;10EU/ml<内有毒的≤ 25EU/ml时,此血清为优级胎牛血清;内有毒的≥ 25EU/ml时,此血清为标准级胎牛血清;应选取内有毒的含量低的胎牛血清,使培养的细胞更健康。如果选取内有毒的较高的血清,细胞一直泡在“毒液”里,短期内细胞看不出太明显的变化,但长期的话细胞会衰老得较快,从而对实验结果造成严重影响。微生物:微生物包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原毒等。严格的生产工艺可以对细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制。同时3次0.1um过滤可以完全祛除支原体(支原体直径0.2~0.3um)。通过病毒的检测,可以严格控制牛腹泻、牛细小、蓝舌病等病毒。通过非疯牛病疫区生产还可避免朊病毒。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛。
如何解冻血清?血清解冻需采用逐步解冻法:将血清从-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解,然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),减少沉淀生成。切勿直接将血清从-20℃转入37℃解冻,这样因温差较大易造成蛋白质凝结并出现沉淀。需要对新买的血清进行过滤吗?血清在ISO13485认证的厂房中生产,经过3次0.1μm过滤,出厂经过检测并且会使用三种以上的细胞株进行培养测试及无菌检测,污染几率非常低。通常细胞污染有非常多的可能性,根据协助使用者进行分析检测,结果表明绝大部分都是因人为操作失误导致污染。因此买来的血清不需要再次进行过滤。血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。宁波赛业血清哪里有
小牛血清取自出生10-30天的小牛。宁波赛业血清哪里有
血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和生长因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。血清指血浆除去纤维蛋白原后的胶状液体。每100ml人血清含有蛋白质6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。血清不会凝固。有免疫,维持酸碱平衡和渗透压的作用,血清蛋白质亦可储备供给机体蛋白质不足时的应用。人和动物的血清常用以进行各种血清学试验,帮助诊断疾病。含抗体的血清可作为预防或医治疾病之用。宁波赛业血清哪里有