细胞培养中出现黑点是污染吗?如何处理?一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:细胞生长过老,破碎的细胞残?。谎逯柿坎缓?,反复冻融的结果;配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;配制培养基的水质、容器不合格??捎τ美胄?、过滤的方法去除这些黑点;培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天?;剖偶短ヅQ宄Ъ?/p>
胎牛顾名思义就是指还在母牛身体里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先从怀孕中的母牛身体里取出胎牛(通常5-8个月胎龄),之后对未发育完全的胎牛的心脏穿刺取血,完成的工作以后便再通过一系列的工艺处理获得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集已出生10天内的小牛,而且它们的发育相对于胎牛而言更加完全。国产血清因为原料供应等原因,通?;嵫?个月以上,或足月刚出生的小牛取血,把它定义为类胎牛血清。但我们知道这时血清里的生长因子已经完全不同于胚胎发育时的生长因子。甚至于现在很多国产厂家已经把这类血清完全归类于胎牛血清,贴上胎牛血清的标签,卖着胎牛价格,却只起着新生牛的作用。市场上进口胎牛血清较多,真正好的胎牛血清并不多。温州赛业血清血清提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。
因为制作工艺成熟和产量大的原因,实验室常备血清一般都为牛血清。而牛血清种类也因适合培养不同种类的细胞分很多种了,同属于牛血清为什么它们价格却有天壤之别。我们就拿市面上应用较为广的胎牛血清和新生牛血清为例。除了生产成本和供应来源不一样外,两种血清的成分也很不相同。胎牛血清是母牛在怀孕五至八月龄胎时,将胎牛取出并进行心脏穿刺取血。穿刺取血可较为大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是从刚出生到2周内的新生牛静脉。和新生牛血清相比,胎牛血清显然产量低,成本高。二者的成分也很不一样。和新生牛血清相比,胎牛血消除了免疫球蛋白含量很低之外,还含有丰富的胚胎生长促进因子以及各种还未完全鉴定的成分,可满足所培养细胞的特殊的代谢需求。
industryTemplate胎牛血清起酸碱度缓冲液作用。
如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。热灭活:一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化。温州赛业血清
胎牛血清的蛋白质含量:3.5%~5.0%( w/v);血红蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)。黄石优级胎牛血清厂家
如何避免血清中产生沉淀?按如下操作可避免沉淀的产生:解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多?;剖偶短ヅQ宄Ъ?/p>