超滤作为一种膜分离技术,普遍应用于生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换,其原理是溶液在力的作用下,通过超滤膜孔径的筛滤,大分子量的颗粒被截留下来,而水、溶剂和低分子量溶质则允许透过膜,从而达到浓缩、脱盐和缓冲液置换的目的,这种方法较大的特点是操作简便、快速、高效,可同时浓缩和纯化分子。如何使用超滤心离心管?1. 使用角转子加到超滤装置上,较大样本量为15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 将带盖过滤装置放入离心机转子内; 用一个类似的装置来平衡。3. 使用定角转子时,将薄膜面板朝上定位,较大旋转 5000 xg,旋转 30 分钟。4. 为了回收浓缩的溶质,在过滤装置的底部插入一个移液管,通过左右扫动的方式将样品抽离,以保证总回收率。超滤液可贮存在离心管中。说明:为达到较佳回收率,离心后应立即取出浓缩样品。超滤离心管通常由聚碳酸酯或聚丙烯制成,具有强度高和化学惰性。浓缩超滤离心管制造厂
在选择过程中,应首先执行以下步骤:1考虑样品和分子特性:比如改变pH 可能增加构象改变的风险,而降低温度可能降低浓缩效率等。2、选择正确的膜:众所周知,超滤没有太多的膜选项,但您应对再生纤维素和聚醚砜(PES)材料进行测试,以确定哪种材料可为您的特定材料提供较低的非特异性结合和较优的回收率。3、选择合适的截留分子量,通常是靶标1/3大小的截留分子量较适合。但有时则需要更小的孔径来满足回收率的要求。如果在病毒和核酸样品,可参看下面截留分子量和病毒颗粒分子大小以及核酸大小的换算表。选择合适的装置:赛多利斯拥有适用于低浓度样品、DNA、蛋白质、病毒、过滤应用等普遍的装置选项;选择合适的装置可以有效改善结果。四川蛋白分离离心管超滤离心管还可用于药代动力学和药物分析中,以确定药物代谢和药效学参数。
超滤离心管具有快速超滤功能,能够达到较高的浓缩倍数,轻松实现从稀释和复杂的混和样本中浓缩回收目的产物。垂直设计的超滤膜以及较大的有效滤膜表面积有助于快速的样本处理,获得较高样本回收率(通常> 90%) ,并达到30倍的浓缩。根据标称分子量限值(NMWL)的不同,典型处理时间为10-30分钟。超滤膜的垂直设计也较大程度降低了溶质极化造成的滤膜结垢;死体积设计能有效防止过度离心使样本干掉而造成样本损失。收集滤出液后,浓缩样本(截留部分)可通过一个简便的倒置(上下反转)离心步骤而实现高效回收。超滤管未经消毒,只供一次使用。
下面是处理和重复使用超滤管的步骤。将超滤管中的水倒出来,用Milliq水轻轻冲洗几次。[如管底有可见蛋白质沉淀,可先加水,再用设备头吹气,注意不要碰触膜,吹气至沉淀悬浮,再倒出,不要冲自来水。)然后加入0.2 mNaOH溶液,室温放置20分钟,平衡超滤。在此期间定量管。离心10分钟。倒出剩余的MaOH溶液,将管芯浸入Milliq烧杯(1L或2L)中。放器数小时,然后用新水替换,放置数小时,不断稀释Na0E浓度。50ml管道和盖子用自来水冲洗,内壁用Milliq水冲洗。取出浸入水中的芯,并将其加入几乎满毫升的水中。在50毫升试管中注入毫升水。慢慢地将芯放入50毫升离心管中,排出一些水。然后盖上盖子,4度存放,直到下次使用。一般来说,根据上述步骤和注意事项,每根渠道在三到四年内不会受损。使用超滤离心管时应注意避免振动或震动造成样品混乱并影响分离效果。
超滤离心管通常不需要预处理即可使用,不过对于蛋白质样本处理,特别是较稀的蛋白质溶液来说(<10ug/mL),用超滤膜浓缩回收率常常是不定量的。虽然PES材料使非特异吸附较小化,但是,某些蛋白,特别是稀的时候,会有问题。非特异结合的程度随着个别蛋白结构的不同而不同。含有带电的或者疏水结构域的蛋白质更易于不可逆结合到不同表面。对超滤离心管表面做钝化预处理可降低蛋白质在膜表面的吸附性损失,大多数情况下,在浓缩稀蛋白溶液之前预处理柱子可以提高回收率,因为溶液可填满膜和表面暴露的空白蛋白吸附位点。钝化的方法是预先用较高容积的钝化溶液预浸泡柱子1小时以上,蒸馏水彻底冲洗柱子,再用蒸馏水离心一次以彻底除去可能残留在膜上的钝化溶液。注意钝化处理后别让膜干了。如果要留待以后使用,需要加无菌蒸馏水保持膜湿润。超滤离心管是一种用于分离和纯化生物大分子的工具。湖州离心管在哪买
超滤离心管还可用于分析食品样品中的营养成分和添加剂,以保障公众健康和安全。浓缩超滤离心管制造厂
以下是处理超滤管,重复利用超滤管的步骤。倒出超滤管里的水,用milliQ水轻轻润洗几次,【若管底有可见的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用设备头吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀悬起,然后倒掉,不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液,室温放置20min,期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液,将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时,不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗,内壁再用MilliQ水洗干净。取出浸没的管芯,加至接近满的MilliQ水,50ml管也加满MilliQ水,将管芯慢慢放入50ml。离心管,排出部分水,然后盖上盖子,放4度保存,直到下次使用。一般来说,按照上述步骤和注意事项,每根管用三四年不会坏。浓缩超滤离心管制造厂