按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射,以小鼠为例,每只小鼠体重假定20g,每只小鼠用量3mg;4)注射入体内10-15min(待光信号达到更强稳定平台期)后进行成像分析。注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定更高信号检测时间和信号平台期。注意事项1)本品(fireflyluciferin)和甲虫荧光素(beetleluciferin)、萤光素钾盐只是不同别名,以CAS号115144-35-9为准。2)注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射,因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线,确定更佳信号平台期和更佳的检测时间。3)如果要进行ATP的检测,尽量避免外源ATP的污染,如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材,在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。4)为避免反复冻融,本产品配制成溶液后建议适当分装后-20℃或-80℃保存。为防止氧化,如有条件,可以对储存液充氮气或氩气后保存。5)对于检测灵敏度要求特别高的实验,建议使用新鲜配制的本产品。6)在进行D-荧光素钾盐的溶解时,应使用无钙镁离子的DPBS,因钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性,此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响,从而影响检测。7)为了您的安全和健康。南京翌科生物科技有限公司D-荧光素钾盐测试价格。南通ATPD-荧光素钾盐保质期
因此只有在活细胞内才会产生长发生光现象,并且发光光强度与标记细胞的数目线性相关。结构与性能荧光素在氧气、ATP存在的条件下和荧光素酶发生反应,生成氧化荧光素(oxyluciferin),并产生长发生光现象。荧光素是腹腔注射或尾部静脉注射进入小鼠体内的,约一分钟就可以扩散到小鼠全身。荧光素的半衰期约三个小时,只有活细胞才能够持续表达荧光素酶。(1)荧光素不会影响动物的正常生理功能。(2)荧光素是280道尔顿的小分子,水溶性和脂溶性都非常好,很容易穿透细胞膜和血脑屏障。(3)荧光素在体内扩散速度快,可通过腹腔注射或尾部静脉注射进入动物体内。腹腔注射扩散较慢,持续发光长。荧光素腹腔注射老鼠后约1min后表达荧光素酶的细胞开始发光,10min后强度达到稳定的更高点,在更高点持续约20~30min后开始衰减,约3h后荧光素排除,发光全部消失,更佳检测时间是在注射后15~35min之间;若进行荧光素静脉注射,扩散快,但发光持续时间很短。科研人员根据大量的实验总结出荧光素的合适的用量是150mg/kg,即体重20克的小鼠需要3毫克的荧光素。(4)观察时间的间隔没有更短限制,只要观察的条件控制一致就可以。虽然底物在动物体内有一定的代谢过程。南通ATPD-荧光素钾盐保质期做D-荧光素钾盐的哪家便宜。
2-乙磺酸)PIPES磷酸烯醇**酸三(环已胺)盐PEP病毒保存液肝素锂乙二胺四乙酸二钾/EDTA二钾血清分离胶/血液分离胶肝素抗凝剂乙二胺四乙酸三钾/EDTA三钾血液促凝剂高效促凝粉高效硅化剂水溶性硅化剂草酸钾钙离子螫合抗凝剂弱效抗凝剂吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH吖啶酯-T4结合物吖啶酯-T3结合物吖啶磺酰胺盐-N-乙胺基马来酰亚胺吖啶磺酰胺盐-T4结合物吖啶磺酰胺盐-T3结合物生物素-T4结合物化学发光分析试剂及标记物生物素-T3结合物生物素-NHS活性酯吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH吖啶酯NSP-DMOAE-NHS吖啶酯NSP-DMOAE-PEG-GT-NHSCy3-NHS酯Cy7-NHS酯5-羧基荧光素-NHS酯6-羧基荧光素-NHS酯5(6)-羧基荧光素-NHS酯6-羧基荧光素D荧光素钠盐D-Luciferin,SodiumSaltD-荧光素钾盐D-Luciferin,PotassiumSaltD-荧光素萤火虫,游离酸D-LuciferinFirefly,freeacid萤火虫荧光素酶fireflyluciferase海肾荧光素酶Renillaluciferase天然腔肠荧光素Coelenterazineh腔肠素hCoelenterazinef腔肠素fCoelenterazineh/腔肠素h腔肠荧光素运输和保存冰袋运输;-20℃干燥避光保存;有效期一年。使用方法1.体外生物发光检测1)用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钠盐,配制成30mg/mL的储存液(100-200×),混匀。立即使用。
室温培育30min后加入细胞孔板中,置于培养箱常规培养。2)单克隆细胞筛选转染24h后胰酶消化细胞并按1∶6比例接种到新6孔板中,同时加入实验确定的浓度G418,随后每2d更换一次培养基并维持G418筛选直至单细胞抗性克隆的出现。分别挑选单一抗性克隆至96孔板,待其逐渐增殖后转入24孔板中继续传代培养。3)荧光素酶活性鉴定阳性克隆单一抗性克隆传代至第五代时用LuciferaseAs-sayAystem检测荧光素酶活性。检测时,各克隆按1×105个/孔接种到24孔板,24h后细胞裂解液裂解12000rpm,4℃离心10min,收集裂解物,取上清10μl加入96孔白板中,向每孔加入50μl荧光素酶96microplateluminometer连续读底物,停留2s后,取10s的荧光值(RLU),每个克隆设3个复孔,保留RLU值高的细胞克隆继续传代培养,再过5代后进行荧光素酶活性检测。保留RLU值维持较高的克隆直至第30代,荧光素酶活性更高的几个克隆MCF-7-luc即为阳性克隆.各不同数量细胞克隆的荧光值检测7-luc阳性克隆细胞按细胞数将筛出的MCF-4×104、2×104、1×104、5000、2500、1250、625、312和156分别接种到96孔黑板中,另外一组只有细胞,一组只有培养基作对照,设置2个复孔,常规培去上清并用PBS洗两次。做D-荧光素钾盐测试真的靠谱吗?
包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。目前有三种产品形式:D-荧光素(游离酸),D-荧光素盐(钠盐和钾盐)。主要差别在于溶解特性:前者的水溶性以及缓冲体系的溶解性都较弱,除非溶于弱碱如低浓度NaOH和KOH溶液。可溶于甲醇和DMSO;后者能够易溶于水或缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。产品性质运输和保存运输条件:4℃冰袋运输;短期保存:4℃干燥避光长期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期长期保存:有效期一年工作液:先用现配使用方法1.体外生物发光检测1)用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐,配制成30mg/mL的储存液(100-200×),混匀。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。2)用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3)去除细胞培养基。4)待图像分析前,向细胞内添加荧光素工作液,37℃孵育5-10min,然后进行图像分析。2.活题成像分析1)用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液,混匀。2)用μm滤膜过滤除菌。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。3)腹腔注射(.)。D-荧光素钾盐长期保存条件是-20℃干燥避光。盐城荧光素钠盐D-荧光素钾盐发射波长
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D-荧光素钾盐是一种化学品。中文别名:(S)-4,5-二氢-2-(6-羟基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸钾盐英文别名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxybenzothiazol-2-yl)thiazole-4-carboxylicacidpotassiumsalt产品描述D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍应用于整个生物技术领域,特别是体内活题成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素底物能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的慢病毒转染入细胞后构建稳定表达细胞株,构建原位肿大的瘤模型,之后注入荧光素底物,通过IVIS系统来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或进行药物药效评价等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。注:在抗肿大的瘤药物药效评价试验中,由于生物自发光检测需要根据荧光素表达标定肿大的瘤大小,受肿大的瘤生长所发生的肿大的瘤内部坏死影响,生物自发光并不能很覆盖面广的评价肿大的瘤生长,在抗肿大的瘤药效评价有较高要求的实验中,建议使用小动物核磁成像系统检测肿大的瘤生长。D-荧光素也常用于体外研究。南通ATPD-荧光素钾盐保质期