重组为一个明亮的萤光素酶。这些亚基的亲和力可以和SmBiT肽一样低,从而可以进行蛋白质相互作用的测定;也可以和HiBiT一样高,从而允许自我组装。[1]2017HiBiT?技术基于NanoBiT?系统的研究,我们将与LgBiT具有极强亲和作用的。HiBiT作为一种易于检测且具有高灵敏度的蛋白质标签,具有多种功能,例如当与基于CRIPSR的标签一起使用时,可以创建内源性报告基因模型。[1]2020Lumit?技术随着NanoBiT?技术的发展,人们认识到可以利用该系统通过结合免疫测定的组分检测多种分析物。由此产生的平台(现称为“Lumit”)提供了具有高灵敏度的简化免疫检测法。荧光素酶(英文名称:Luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称,其中更有代表性的是一种学名为Photinuspyrali'的萤火虫体内的荧光素酶。在相应化学反应中,荧光的产生是来自于萤光素的氧化,有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。没有荧光素酶的情况下,萤光素与氧气反应的速率非常慢,而钙离子的存在常??梢越徊郊铀俜从Γㄓ爰∪馐账醯那榭鱿嗨疲?。荧光生成反应通常分为以下两步:萤光素+ATP→萤光素化腺苷酸。D-荧光素钾盐使用浓度怎么样?荧光素吸收波长
从而实时监测疾病发展状态或药物的***功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。,PotassiumSalt/D-荧光素钾盐分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O分子量:g/mol纯度:高级纯()应用:1)活细胞、组织或生物体内luc标记基因和荧光素酶-融合基因体内/体外表达的成像分析;2)***用于报告基因分析,免疫分析和ATP荧光卫生监测分析;Protocol1:InVitroBioluminescentAssays/体外生物发光检测1)配制成100mM的储存液(200×,浓度30mg/ml)。混匀后立即使用或分装后-20℃冻存。2)用预热好的组织培养基1∶200稀释储存液,配制工作液(终浓度150μg/mL)。3)去除培养细胞的培养基直至无残留。4)图像分析前立即向细胞内添加1×荧光素工作液,然后进行图像分析(或者细胞放在37℃短时间孵育后检测可增强信号)。D-荧光素钾盐注:萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶、萤光素钾盐、萤光素钾盐盐也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶、荧光素钾盐、荧光素钠盐。Protocol2:Invivoanalysisinmice/小鼠***成像分析1)用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制D-荧光素钾盐溶液(15mg/mL),。一旦使用,保持冰冷且避光。扬州游离酸D-荧光素钾盐生物公司D-荧光素钾盐使用的是什么技术?
D-荧光素钾盐是一种化学品。中文别名:(S)-4,5-二氢-2-(6-羟基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸钾盐英文别名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxybenzothiazol-2-yl)thiazole-4-carboxylicacidpotassiumsalt产品描述D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍应用于整个生物技术领域,特别是体内活题成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素底物能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的慢病毒转染入细胞后构建稳定表达细胞株,构建原位肿大的瘤模型,之后注入荧光素底物,通过IVIS系统来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或进行药物药效评价等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。注:在抗肿大的瘤药物药效评价试验中,由于生物自发光检测需要根据荧光素表达标定肿大的瘤大小,受肿大的瘤生长所发生的肿大的瘤内部坏死影响,生物自发光并不能很覆盖面广的评价肿大的瘤生长,在抗肿大的瘤药效评价有较高要求的实验中,建议使用小动物核磁成像系统检测肿大的瘤生长。D-荧光素也常用于体外研究。
LAR)Promega公司推出的第一种萤光素酶检测试剂LuciferaseAssaySystem(LAR),为灵敏、非放射性的报告基因检测拉开了序幕。LAR与萤火虫萤光素酶(luc)报告基因一起,为研究人员开始了解基因表达调控因子提供了首要的工具。[1]1995Dual-Luciferase?报告基因检测系统(DLR)DLR是第一种允许在单个样本中依次检测两个报告基因的试剂。通过允许萤光素酶活性的内部归一化,在提高报告基因检测的可靠性方面取得了关键进展。此外,pGL3报告基因载体系列具有改良后的萤火虫萤光素酶基因,luc+。这个改造一种报告基因以实现性能改进的例子后来被进一步应用到pGL4和luc2报告基因上,通过生物信息学和合成方法,实现了更大的改进。[1]1999ENLITEN?/UltraGlo?重组萤光素酶Promega公司在早期推出的一种重组萤火虫萤光素酶(Enliten)基础上,改造出了一种称为UltraGlo?的热稳定性萤光素酶。UltraGlo?的开发是在各种检测和储藏条件下进行一步法“加样-读数”检测的关键。此后,通过开发新的方法来改变萤火虫萤光素酶检测的信号动力学,例如Bright-Glo?、Steady-Glo?和Dual-Glo?允许使用微孔板进行检测。而“加样-读数”的形式简化了样品处理。D-荧光素钾盐的激发波长是多长?
8.取剩余裂解液测定LacZ的活性,其读数作为内标用以矫正荧光素酶的读数。9.用矫正后的读数作图,分析数据。注:荧光素见光易氧化,已稀释未用的荧光素应丢弃。注意事项:1.荧光素酶检测试剂需在15-25℃条件下预平衡后再进行反应,而后依据具体条件进行自动或手动检测。当用液闪计数仪时,加入荧光素酶检测试剂后立即轻轻混匀。2.如果细胞裂解后不能立即对提取物进行检测,样品可以在冰上保存大约5h,在-70℃可保存数月。不要反复冻融以避免酶活性的降低。3.利用上述方法检测冷的样品时,其信号强度将下降5-15%。4.在荧光素酶活性较高的情况下,导致信号超出线性范围(信号溢出)可用裂解液将样品进行稀释。5.不要储存稀释过的样品。如果必须保存,要在稀释的样品中加入BSA至终浓度为,这样可以保持样品的稳定性。6.一些荧光仪在进行检测前需要1-2s的稳定,因此建议在开机后过一段时间再进行检测操作。荧光素酶报告基因检测主要有哪些用途?a.启动子结构分析,将启动子区域序列(通常2k左右)进行分段截短,或对特定位点进行突变,再分别构建入luciferase报告载体,检测其启动子活性。b.启动子SNP分析,一些基因的启动子区域存在单核苷酸多态性。D-荧光素钾盐如何选择合作公司?扬州游离酸D-荧光素钾盐生物公司
D-荧光素钾盐检测是个人合作吗?荧光素吸收波长
GT-NHSCy3-NHS酯Cy7-NHS酯5-羧基荧光素-NHS酯6-羧基荧光素-NHS酯5(6)-羧基荧光素-NHS酯6-羧基荧光素D荧光素钠盐D-Luciferin,SodiumSaltD-荧光素钾盐D-Luciferin,PotassiumSaltD-荧光素萤火虫,游离酸D-LuciferinFirefly,freeacid萤火虫荧光素酶fireflyluciferase海肾荧光素酶Renillaluciferase天然腔肠荧光素Coelenterazineh腔肠素hCoelenterazinef腔肠素fCoelenterazineh/腔肠素h腔肠荧光素活题成像用D-luciferin,potassiumsalt荧光素钾盐介绍一、活题成像技术简介活题生物发光成像技术能够让研究人员直接快速的测量各种哎症模型中肿大的瘤的生长、转移以及对药物的反应。在药效学评价方面,荧光素酶哎症模型可用于哎症体内用药在整体动物水平上进行长期疗效跟踪观察。利用无创伤活题成像对哎细胞生长的检测,可对哎症治的好之前和过程中的哎细胞的变化进行实时观测和评估。荧光素酶的发光是生物发光,不需要激发光,但需要底物荧光素(D-Luciferin)。荧光素酶的底物荧光素,约280道尔顿。荧光素的水溶性和脂溶性都非常好,很容易穿透细胞膜和血脑屏障。荧光素是腹腔注射或尾部静脉注射进入小鼠体内的,约一分钟就可以扩散到小鼠全身。荧光素。荧光素吸收波长