注意事项1)本品(fireflyluciferin)和甲虫荧光素(beetleluciferin)、萤光素钾盐只是不同别名,以CAS号115144-35-9为准。2)注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射,因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线,确定更佳信号平台期和更佳的检测时间。3)如果要进行ATP的检测,尽量避免外源ATP的污染,如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材,在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。4)为避免反复冻融,本产品配制成溶液后建议适当分装后-20℃或-80℃保存。为防止氧化,如有条件,可以对储存液充氮气或氩气后保存。5)对于检测灵敏度要求特别高的实验,建议使用新鲜配制的本产品。6)在进行D-荧光素钾盐的溶解时,应使用无钙镁离子的DPBS,因钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性,此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响,从而影响检测。7)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。8)本产品只作科研用途!D-荧光素钾盐的激发波长是多长?泰州荧光素钠盐D-荧光素钾盐
4)待图像分析前,向细胞内添加荧光素工作液,37℃孵育5-10min,然后进行图像分析。2.活ti成像分析1)用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液,混匀。2)用μm滤膜过滤除菌。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。3)腹腔注射(.),按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射,以小鼠为例,每只小鼠体重假定20g,每只小鼠用量3mg;4)注射入体内10-15min(待光信号达到更强稳定平台期)后进行成像分析。注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定更高信号检测时间和信号平台期。注意事项1)本品(fireflyluciferin)和甲虫荧光素(beetleluciferin)、萤光素钾盐只是不同别名,以CAS号115144-35-9为准。2)注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射,因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线,确定更佳信号平台期和更佳的检测时间。3)如果要进行ATP的检测,尽量避免外源ATP的污染,如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材,在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。4)为避免反复冻融,本产品配制成溶液后建议适当分装后-20℃或-80℃保存。为防止氧化,如有条件,可以对储存液充氮气或氩气后保存。镇江萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐哪家好D-荧光素盐也算是钠盐和钾盐。
因此只有在活细胞内才会产生长发生光现象,并且发光光强度与标记细胞的数目线性相关。结构与性能荧光素在氧气、ATP存在的条件下和荧光素酶发生反应,生成氧化荧光素(oxyluciferin),并产生长发生光现象。荧光素是腹腔注射或尾部静脉注射进入小鼠体内的,约一分钟就可以扩散到小鼠全身。荧光素的半衰期约三个小时,只有活细胞才能够持续表达荧光素酶。(1)荧光素不会影响动物的正常生理功能。(2)荧光素是280道尔顿的小分子,水溶性和脂溶性都非常好,很容易穿透细胞膜和血脑屏障。(3)荧光素在体内扩散速度快,可通过腹腔注射或尾部静脉注射进入动物体内。腹腔注射扩散较慢,持续发光长。荧光素腹腔注射老鼠后约1min后表达荧光素酶的细胞开始发光,10min后强度达到稳定的更高点,在更高点持续约20~30min后开始衰减,约3h后荧光素排除,发光全部消失,更佳检测时间是在注射后15~35min之间;若进行荧光素静脉注射,扩散快,但发光持续时间很短。科研人员根据大量的实验总结出荧光素的合适的用量是150mg/kg,即体重20克的小鼠需要3毫克的荧光素。(4)观察时间的间隔没有更短限制,只要观察的条件控制一致就可以。虽然底物在动物体内有一定的代谢过程。
萤火虫荧光素酶(Luciferase)是一种常用的信号分子,可以用来标记肿瘤细胞.一.细胞方法将带有荧光素luc转酶报告基因的真核表达重组质粒pRc/CMV2-7,利用G418筛选,获得稳染人乳腺哎细胞株MCF-7-luc,并在稳定表达荧光素酶基因的细胞克隆MCF-7体外评价其发光能力。通过建立裸鼠移植瘤模型,利用活题生物发光成像系统检测肿大的瘤生长及转移情况,为下一步监测裸鼠移植瘤对药物作用的变化情从而为分析药物对肿大的瘤的治的好效果提供理想的状况.G418筛选浓度的确定:37℃细胞培养箱中常培养,G418按0、200、400、600、800、1000μg/ml设置6个浓度梯度。在细胞接种24h后,加入6孔板中,每个浓度设2个孔在10~14d内全部死亡。每天观察细胞生长情况,死亡更低的G418浓度,即为筛选质粒转染克隆MCF-7细胞的浓度。1)细胞转染取对数生长期的MCF-7细胞,将细胞接种于6孔板内待细胞融合度达到80%~90%孔培养板中,TM即可转染。按照Lipofectamine2000试剂盒操作指南进行转染。在250μl无血清、无双抗的DMEM培培养基中加入luc质粒8μg/ml的pRc/CMV2-在250μl无血清、无双抗的DMEM培养基中加入10μlLipofectamineTM2000,室温培育5min。将上述2种稀释液混匀。D-荧光素钾盐测试怎么样?
luciferin)的分子结构如右图所示:,在氧气、ATP存在的条件下和荧光素酶发生反应,生成氧化荧光素(oxyluciferin),分子结构如右图所示,并产生长发生光现象。但是该底物荧光素以前大多依赖进口,产品价格昂贵。而且由于该产品容易降解、受潮影响使用效果。所以,需要国产化的方式生产,一方面可以降低成本,一方面可以增强使用效果。作者:科远迪链接:zhuanlan./p/来源:知乎著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权,非商业转载请注明出处。D-luciferin,potassiumsalt荧光素产品说明书发光原理哺乳动物生物发光,一般是将Fireflyluciferase基因(由554个氨基酸构成,约50KD)即荧光素酶基因整合到预期观察的细胞染色体DNA上以表达荧光素酶,培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株,当细胞分裂、转移、分化时,荧光素酶也会得到持续稳定的表达。基因、细胞和活题动物都可被荧光素酶基因标记。将标记好的细胞接种到实验动物体内后,当外源(腹腔或静脉注射)给予其底物荧光素(D-luciferin,potassiumsalt,以下均简称荧光素),即可在几分钟内产生长发生光现象。所发的光波长在540-600nm。这种酶在ATP,氧存在的条件下,催化荧光素的氧化反应才可以发光。做D-荧光素钾盐测试品牌有哪些?泰州荧光素钠盐D-荧光素钾盐
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