tetrametrylrhodarnineisothiocyante，TRITC）是一种紫红色粉末，较稳定，是罗达明（rhodamine）的衍生物。更大吸收光谱550urn，更大发射光谱620urn呈橙红色荧光，与FITC发射的黄绿色荧光对比鲜明，常用于双标记染色。按照抗原抗体反应的结合步聚，免疫荧光法可分为以下三种。1．直接法用荧光素标记的特异性抗体直接与相应的抗原结合，以检查出相应的抗原成分。2．间接法先用特异性抗体与相应的抗原结合，洗去未结合的抗体，再用荧光素标记的抗特异性抗体（间接荧光抗体）与特异性抗体相结合，形成抗原一特异性抗体一间接荧光抗体的复合物。在此复合物上带有比直接法更多的荧光抗体，所以，此法较直接法灵敏。3．补体法用特异性的抗体和补体的混合液与标本上的抗原反应，补体就结合在抗原抗体复合物上，再用抗补体的荧光抗体与之相结合，就形成了抗原一抗体一补体一抗补体荧光抗体的复合物。荧光显微镜下所见到的发出荧光的部分即是抗原所在的部位。补体法具有敏感性强的优势，同时适用于各种不同种属来源的特异性抗体的标记显示，在各种不同种属动物抗体的检测上为更常用的技术方法荧光素酶（英文名称：Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称。南京翌科生物科技有限公司的D-荧光素钾盐测试怎么样？上海ATPD-荧光素钾盐发射波长
Q：荧光素酶作为报告基因相比于荧光蛋白有哪些优势？Luciferase的灵敏度相比于GFP提高10-100倍以上，同时具有更宽的动态范围，便于数值分析比较，不需要荧光显微镜，而且在***实验中其荧光穿透性高于EGFP等荧光蛋白，同时由于没有内源活性、其本底信号很低。而GFP等荧光蛋白相比于荧光素酶的优势在于可以进行失踪定位，并且其观测不需裂解细胞，方便进行适时观察。Q：海肾荧光素酶和萤火虫荧光素酶相比，相对活性如何？在氧、镁和ATP的存在下，萤火虫荧光素酶作用于甲虫荧光素，而来源于海洋腔肠（Renillareniformis)的荧光素酶在氧的存在下作用于海肾荧光素。双报告基因技术（Dual-reporterassays）,结合了萤火虫荧光素酶测试和海肾荧光素酶测试。Q：双荧光素酶报告基因实验转染效率很低而且复孔重复不出来是什么原因？转染效率低的话可以从三个方面改善，首先要确保细胞状态是好的，通常我们选出处于分裂期的细胞，另外阳性对照您可以选择过表达的荧光蛋白质粒，还有就是DNA的质量尤为重要，更好是先酶切验证。这个实验检测结果很灵敏，有一定差异是正常的，通常只要确保它在一个数量级之内即可。如果差异超出这个范围可以从两方面改善，一是记住保持样本的均一性。连云港荧光素酶编码基因D-荧光素钾盐应用D-荧光素钾盐如何选择合作公司？
短期保存：4℃干燥避光长期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期长期保存：有效期一年工作液：先用现配使用方法1.体外生物发光检测1）用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成30mg/mL的储存液(100-200×)，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3）去除细胞培养基。作者：思存链接：zhuanlan./p/来源：知乎著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权，非商业转载请注明出处。高斯荧光素酶近年来，其他荧光素酶（例如高斯荧光素酶）的使用有所增加，因为这些报告基因较小，并且不需要ATP的存在。高斯荧光素酶是一种20kD的蛋白质，可通过氧气催化腔肠素氧化，产生光。来自于海洋足类高斯氏菌的生物发光酶在表达后可有效地从哺乳动物细胞中分泌出来。Amplite?高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒（#AAT-12530）使用专有的发光配方来定量细胞培养基中的荧光素酶活性。当该试剂与高斯荧光素酶相互作用时，产sheng发光产物，该发光产物提供强发光。Amplite高斯荧光素酶报告基因测定试剂盒特点：提供了与HTS液体处理仪器兼容的所有基本组件它们具有高灵敏度。
常见的荧光素酶有两种，分别是萤火虫荧光素酶（fireflyluciferase，编码基因是luc）和海肾荧光素酶（Renillaluciferase，编码基因是Rluc），前者的底物是D-Luciferin，后者的底物是Coelenterazine。它们共同的作用原理是在ATP和荧光素酶的催化作用下，底物被氧化发光（不同底物光的颜色和波长不同），当底物过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。***成像技术（opticalinvivoimaging）目前主要采用生物发光（bioluminescence）与荧光（fluorescence）两种技术，生物发光法是基于荧光素酶能催化底物（D-Luciferin或Coelenterazine）化学发光的原理，将体外能稳定表达荧光素酶的细胞株植入动物体内，与后期注射入体内的底物发生反应，利用光学系统检测光强度，间接反映出细胞数量的变化或细胞的定位。这项技术已被广泛应用于多个领域常用的有**或疾病动物模型的建立，并可用于病毒学研究、siRNA研究、干细胞研究、蛋白质相互作用研究等。以下主要介绍D-Luciferin（D荧光素）的分类：D-Luciferin：有三种，分别是D-Luciferin,SodiumSalt/D荧光素钠盐、D-Luciferin,PotassiumSalt/D-荧光素钾盐和D-LuciferinFirefly,freeacid/D-萤火虫荧光素。D-荧光素钾盐找南京翌科生物科技有限公司怎么样？
随后30年里，Promega不断在萤光素酶实验工具领域推陈出新，保持技术带跑的人的地位。这里提到的萤光素酶即荧光素酶。1991萤光素酶检测系统（LAR）Promega公司推出的7b0a8f9c-3a4b-41a1-a7f8-3萤光素酶检测试剂LuciferaseAssaySystem（LAR），为灵敏、非放射性的报告基因检测拉开了序幕。LAR与萤火虫萤光素酶（luc）报告基因一起，为研究人员开始了解基因表达调控因子提供了首要的工具。1995Dual-Luciferase?报告基因检测系统（DLR）DLR是7b0a8f9c-3a4b-41a1-a7f8-3允许在单个样本中依次检测两个报告基因的试剂。通过允许萤光素酶活性的内部归一化，在提高报告基因检测的可靠性方面取得了关键进展。此外，pGL3报告基因载体系列具有改良后的萤火虫萤光素酶基因，luc+。这个改造一种报告基因以实现性能改进的例子后来被进一步应用到pGL4和luc2报告基因上，通过生物信息学和合成方法，实现了更大的改进。[1]1999ENLITEN?/UltraGlo?重组萤光素酶Promega公司在早期推出的一种重组萤火虫萤光素酶（Enliten）基础上，改造出了一种称为UltraGlo?的热稳定性萤光素酶。UltraGlo?的开发是在各种检测和储藏条件下进行一步法“加样-读数”检测的关键。此后。做D-荧光素钾盐的哪家便宜。扬州荧光素酶编码基因D-荧光素钾盐发射波长
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就可以用高敏感度的CCD相机对动物体内进行***观察而不会伤害到动物本身。在萤光素酶中加入正确的萤光素底物就可以放出荧光，而发出的光子可以被光敏感元件，如萤光探测器或改进后的光学显微镜探测到。这就使得对包括***在内的多种生命活动进程进行观察成为可能。例如，萤光素酶已经被用于商业化的次世代焦磷酸定序技术，借由dNTP接上DNA链时水解放出的焦磷酸，透过另外一个硫酸盐腺甘酸转移酶反应，萤光素酶能将产物ATP与萤光素转化为冷光，机器借此探测光线并定序。萤光素酶也可以被用于检测血库中所存血液中的红血球是否开始破裂。法医可以用含有萤光素酶的溶液来检测犯罪现场中残留的血迹。医院用萤光素酶的发光来发现特定的疾病。萤光素酶还可以作为“报告蛋白”被用于分子生物学研究中，例如，用于在转染过萤光素酶的细胞中检测特定启动子的转录情况或用于探测细胞内的ATP的水平；这一技术被称为报告基因检测法或萤光素酶检测法（LuciferaseAssay）。萤光素酶是一个热敏感蛋白，因此经常被用于研究蛋白热变性过程中热休克蛋白的保护能力。此外，萤光素酶水母素的发光强度与环境中钙离子浓度相关，因此可用于检测生物体内的钙。上海ATPD-荧光素钾盐发射波长
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