GT-NHSCy3-NHS酯Cy7-NHS酯5-羧基荧光素-NHS酯6-羧基荧光素-NHS酯5(6)-羧基荧光素-NHS酯6-羧基荧光素D荧光素钠盐D-Luciferin,SodiumSaltD-荧光素钾盐D-Luciferin,PotassiumSaltD-荧光素萤火虫，游离酸D-LuciferinFirefly,freeacid萤火虫荧光素酶fireflyluciferase海肾荧光素酶Renillaluciferase天然腔肠荧光素Coelenterazineh腔肠素hCoelenterazinef腔肠素fCoelenterazineh/腔肠素h腔肠荧光素活题成像用D-luciferin,potassiumsalt荧光素钾盐介绍一、活题成像技术简介活题生物发光成像技术能够让研究人员直接快速的测量各种哎症模型中肿大的瘤的生长、转移以及对药物的反应。在药效学评价方面，荧光素酶哎症模型可用于哎症体内用药在整体动物水平上进行长期疗效跟踪观察。利用无创伤活题成像对哎细胞生长的检测，可对哎症治的好之前和过程中的哎细胞的变化进行实时观测和评估。荧光素酶的发光是生物发光，不需要激发光，但需要底物荧光素(D-Luciferin)。荧光素酶的底物荧光素，约280道尔顿。荧光素的水溶性和脂溶性都非常好，很容易穿透细胞膜和血脑屏障。荧光素是腹腔注射或尾部静脉注射进入小鼠体内的，约一分钟就可以扩散到小鼠全身。荧光素。D-荧光素钾盐检测的安全性如何保障？徐州萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐应用

    可运用荧光素酶报告系统分析其相对活性。c.验证特定转录因子同其调控序列的作用，将该序列（通常为启动子区域）插入报告基因载体，同时在实验细胞***转过表达该转录因子，可分析转录因子过表达是否提高荧光素酶活性。d.可以分析信号通路是否***，将该信号通路的下游响应原件序列构建入报告基因载体，在不同上游信号条件下，荧光素酶活性**了通路的下游响应。例如在GPCR研究中，将cAMPresponseelement（CRE）载入报告基因载体，构建稳定表达细胞株后，可以用于分析GPRC的***与6b7a976f-99ae-4c48-8159-4bd筛选。又如，将HIF1α的响应原件hypoxia-responsiveelement(HRE)插入luciferase报告载体构建稳转细胞株，可以用于低氧相关通路的研究。e.验证microRNA的靶序列，将待测的3’UTR序列插入报告基因载体，再共转入该microRNA，如果荧光素酶活性下降，则提示为其靶序列。Q：在[信诺金达]做荧光素酶报告基因检测，需要提供什么？实验结果包括哪些？您需要提供：1.基因序列或模板，需提供详细的转录因子、目的基因或microRNA信息；2.实验细胞，[信诺金达]默认为使用293T细胞，实验结束后，[信诺金达]会为您提供实验流程及完整报告一份，包括实验原始数据、图片、分析结果等。扬州荧光素酶D-荧光素钾盐发射波长D-荧光素钾盐测试适用范围包括哪些？

    LAR）Promega公司推出的第一种萤光素酶检测试剂LuciferaseAssaySystem（LAR），为灵敏、非放射性的报告基因检测拉开了序幕。LAR与萤火虫萤光素酶（luc）报告基因一起，为研究人员开始了解基因表达调控因子提供了首要的工具。[1]1995Dual-Luciferase?报告基因检测系统（DLR）DLR是第一种允许在单个样本中依次检测两个报告基因的试剂。通过允许萤光素酶活性的内部归一化，在提高报告基因检测的可靠性方面取得了关键进展。此外，pGL3报告基因载体系列具有改良后的萤火虫萤光素酶基因，luc+。这个改造一种报告基因以实现性能改进的例子后来被进一步应用到pGL4和luc2报告基因上，通过生物信息学和合成方法，实现了更大的改进。[1]1999ENLITEN?/UltraGlo?重组萤光素酶Promega公司在早期推出的一种重组萤火虫萤光素酶（Enliten）基础上，改造出了一种称为UltraGlo?的热稳定性萤光素酶。UltraGlo?的开发是在各种检测和储藏条件下进行一步法“加样-读数”检测的关键。此后，通过开发新的方法来改变萤火虫萤光素酶检测的信号动力学，例如Bright-Glo?、Steady-Glo?和Dual-Glo?允许使用微孔板进行检测。而“加样-读数”的形式简化了样品处理。

    萤光素酶（英文名称：Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称，其中**有代表性的是一种学名为Photinuspyrali'的萤火虫体内的萤光素酶，萤火虫发光的腹部或海洋的蓝色发光波浪将大自然中生物发光奇迹呈现于世。在生物化学和分子生物学的早期，这一现象被认为是发展生物分析的有力平台。1991年，Promega发布了***代萤光素酶分析产品，并启动了基于萤光素酶的进一步创新计划，通过持续致力于研究和创新生物发光系统建立了各种不同的分析技术。Promega萤光素酶技术发光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月，Promega***提出萤火虫萤光素酶(Luc)作为一种新兴报告基因技术的应用可能性。当时的人们认为，萤火虫萤光素酶具备的生物发光特性、极高的灵敏度和快速简单的检测流程等特点，可能会对分子生物学家的研究产生重要的影响。几个月后，***代萤火虫萤光素酶报告基因载体和检测试剂在Promega诞生，使这项新技术正式并更***地为全球研究人员服务。随后30年里，Promega不断在萤光素酶实验工具领域推陈出新，保持技术***的地位。这里提到的萤光素酶即荧光素酶。[1]1991萤光素酶检测系统。D-荧光素钾盐检测是个人合作吗？

    是新型底物开发的一个早期实例。[1]2012NanoLuc?萤光素酶基于定向进化和新型底物开发方面的经验，研究人员从虾的萤光素酶改造设计出一种新型萤光素酶报告基因，即NanoLuc?萤光素酶。这是一种小分子（19kDa）单体酶，具有独特的底物，其灵敏度比已具备高灵敏度的萤火虫或海肾萤光素酶系统高约100倍。这种新型的报告基因有着范围广的应用前景，为进一步的技术开发奠定了基础。[1]2015NanoBRET?技术NanoLuc?的小体积和非常明亮的光输出是作为蛋白质标签的理想特征。这些特征还很适合作为生物发光共振能量转移（BRET）的供体。一项针对各种能量受体荧光基团的深入研究发现，红色光谱中的可选择性有助于消除与BRET测定相关的一些挑战。可将这些荧光基团添加到蛋白质配基等分子中以测量靶蛋白的结合，或与HaloTag?配基耦联以进行活细胞中蛋白质：蛋白质相互作用的检测。[1]2016NanoBiT?技术随着NanoLuc?的诞生，Promega的科学家努力将该报告基因改造为多亚基系统，即“NanoLuc?BinaryTechnology”或NanoBiT?。该系统由两部分组成：11个氨基酸的小标签和一个更大，更精细的NanoLuc?亚基，LgBiT。这两部分结构互补结合。D-荧光素钾盐的使用说明。gluc荧光素酶

D-荧光素钾盐短期保存条件是4℃干燥避光。徐州萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐应用

    或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3）去除细胞培养基。4）待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵育5-10min，然后进行图像分析。2.***成像分析1）用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液，混匀。2）用μm滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。3）腹腔注射（.），按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射。4）注射入体内10-15min（待光信号达到更强稳定平台期）后进行成像分析。注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定更高信号检测时间和信号平台期。注意事项1）本品（fireflyluciferin）和甲虫荧光素（beetleluciferin）只只是不同公司在命名上的差异,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylicacid。2）注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定更佳信号平台期和更佳的检测时间。3）如果要进行ATP的检测，尽量避免外源ATP的污染，如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材，在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。徐州萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐应用

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