2）在30-50%细胞汇合度时进行转染，通常基因沉默分析至少24-72h进行。低密度转染细胞可使细胞转染和分析间隔更长，从而使由于细胞过度生长造成的细胞活性过度损坏降到更低。根据靶基因的特性，高密度转染的细胞可能更加适合条件的优惠。3）不要在转染时的培养基中加入***，因为这将会将降低细胞转染的效率和导致细胞死亡。4）为了获得更好的结果，可以使用invitrogen的Opti-MEM低血清培养基在形成复合物前稀释lipofectamineTM2000和siRNA。可以使用荧光标记的siRNA帮助优化细胞系的转染条件。一旦确定了用来转染的更佳条件，可以在每一次实验都包括荧光标记siRNA,作为转染效率的指示剂。本产品只供科研使用。请勿用于医药、临床***、食品及化妆品等用途2.转染步骤以lipofectamineTM2000转染siRNA于24孔板，转染浓度为50nM为例，其他规格容器转染见表2。1）接种细胞：贴壁细胞:转染前24h,在400ul无***培养基中接种个细胞，转染时细胞融合度为30-50%。（注：铺板时要将细胞消化完全混匀，避免细胞堆积生长。）悬浮细胞：转染前24h,在400ul无***培养基中接种个细胞，转染时细胞数量4-8X105/孔。2）转染步骤：A.用50ulOpti-MEM稀释siRNA(转染细胞的终浓度为50nM)。RNA检测公司招代理吗？常州piRNA服务

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    [2]③反密码子臂和反密码子环，特征是反密码子环含反密码子。反密码子5′端与尿苷酸连接，3′端与嘌呤核苷酸连接。TΨC臂（T臂）和TΨC环（Ψ环），特征是TΨC环含胸腺嘧啶核糖核苷酸T54假尿苷酸Ψ55胞苷酸C56。[2]④额外环3~21nt。[2]，氨基酸结合位点位于其一端，反密码子环位于其另一端，DHU环和TΨC环虽然在二级结构中位于两侧，但在三级结构中却相邻。尽管各种tRNA的长度和序列不尽相同，但其三级结构相似，提示三级结构与其功能密切相关。[2]核糖体RNA核糖体RNA（rRNA）与核糖体蛋白构成一种称为核糖体的关键白颗粒。一个大肠杆菌中约有15000个核糖体。[2]1.核糖体组成和结构原核生物和真核生物的核糖体都由一个大亚基和一个小亚基构成，两个亚基都由rRNA和核糖体蛋白构成。核糖体、核糖体亚基及rRNA的大小一般用沉降系数表示。[2]2.核糖体RNA特点（1）含量高，rRNA是细胞内含量比较高的RNA，占细胞总RNA的80%~85%。[2]（2）寿命长，rRNA更新慢，寿命长。[2]（3）种类少，原核生物有5S、16S、23s三种rRNA，约占核糖体质量的66%（其中5S，23SrRNA占核糖体大亚基的70%，16SrRNA占核糖体小亚基的60%）。

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