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泰州萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐保质期

来源: 发布时间:2022-06-01

    可用于需要低检测限的测定具有用于研究基因调控和功能的快速,简单且均一的生物发光测定法与标准细胞生长培养基的使用兼容高斯荧光素酶近年来,其他荧光素酶(例如高斯荧光素酶)的使用有所增加,因为这些报告基因较小,并且不需要ATP的存在。高斯荧光素酶是一种20kD的蛋白质,可通过氧气催化腔肠素氧化,产生光。来自于海洋足类高斯氏菌的生物发光酶在表达后可有效地从哺乳动物细胞中分泌出来。Amplite?高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒使用专有的发光配方来定量细胞培养基中的荧光素酶活性。当该试剂与高斯荧光素酶相互作用时,产***光产物,该发光产物提供强发光。Amplite高斯荧光素酶报告基因测定试剂盒特点:提供了与HTS液体处理仪器兼容的所有基本组件它们具有高灵敏度,可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式进行半衰期为一小时的“辉光型”信号在大量检测板之间提供一致的信号与标准细胞生长培养基兼容海肾荧光素酶海肾萤光素酶是一种从海桑(Renillareniformis)分离的36kDa蛋白。与萤火虫荧光素酶相比,海肾荧光素酶的底物和辅因子要求不同。海肾荧光素酶在氧气存在下使用腔肠素,产生480nm的蓝光。与萤火虫萤光素酶类似。D-荧光素钾盐使用的注意事项。泰州萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐保质期

    luciferin)的分子结构如右图所示:,在氧气、ATP存在的条件下和荧光素酶发生反应,生成氧化荧光素(oxyluciferin),分子结构如右图所示,并产生长发生光现象。但是该底物荧光素以前大多依赖进口,产品价格昂贵。而且由于该产品容易降解、受潮影响使用效果。所以,需要国产化的方式生产,一方面可以降低成本,一方面可以增强使用效果。作者:科远迪链接:zhuanlan./p/来源:知乎著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权,非商业转载请注明出处。D-luciferin,potassiumsalt荧光素产品说明书发光原理哺乳动物生物发光,一般是将Fireflyluciferase基因(由554个氨基酸构成,约50KD)即荧光素酶基因整合到预期观察的细胞染色体DNA上以表达荧光素酶,培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株,当细胞分裂、转移、分化时,荧光素酶也会得到持续稳定的表达。基因、细胞和活题动物都可被荧光素酶基因标记。将标记好的细胞接种到实验动物体内后,当外源(腹腔或静脉注射)给予其底物荧光素(D-luciferin,potassiumsalt,以下均简称荧光素),即可在几分钟内产生长发生光现象。所发的光波长在540-600nm。这种酶在ATP,氧存在的条件下,催化荧光素的氧化反应才可以发光。徐州萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐哪家好做D-荧光素钾盐测试价格是多少。

    经HE染色后观察细胞的病理形态学。活题动物成像技术是近期发展起来的一种新型稳定可靠,是检测动物体内分子及细胞事件的影像检测技术,强有力手段。利用生物发光成像(BLI)可以对活题病灶的大小进行无损伤直观准确检测。我们有自己的独自有机合成实验室,可以生产合成各种化学发光试剂,我们可以提供化学发光试剂、化学发光底物、发光标记物、发光增强剂、染料探针类、微生物和酶的显色底物以及体外诊断试剂。相关列表鲁米诺/3-氨基苯二甲酰肼/发光氨异鲁米诺/4-氨基邻苯二甲酰肼吖啶酯DMAE-NHS吖啶酰肼NSP-SA-ADH吖啶酯ME-DMAE-NHS哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸)PIPES磷酸烯醇丙的酮酸三(环已胺)盐PEP0c835bf4-aae2-43c1-be81-e57液肝素锂乙二胺四乙酸二钾/EDTA二钾血清分离胶/血液分离胶肝素抗凝剂乙二胺四乙酸三钾/EDTA三钾血液促凝剂高效促凝粉高效硅化剂水溶性硅化剂草酸钾钙离子螫合抗凝剂弱效抗凝剂吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH吖啶酯-T4结合物吖啶酯-T3结合物吖啶磺酰胺盐-N-乙胺基马来酰亚胺吖啶磺酰胺盐-T4结合物吖啶磺酰胺盐-T3结合物生物素-T4结合物化学发光分析试剂及标记物生物素-T3结合物生物素-NHS活性酯吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH吖啶酯NSP-DMOAE-NHS吖啶酯NSP-DMOAE-PE。

    可用荧光素酶检测系统灵敏方便地测定荧光素酶基因的表达。荧光素酶报告基因有许多优点:①非放射性;②比CAT及其他报告基因速度快;③比CAT灵敏100倍;④荧光素酶在哺乳细胞中的半衰期为3小时,在植物中的半衰期为3.5小时。由于半衰期短,故启动子的改变会即时导致荧光素酶活性的改变,而荧光素酶不会积累。相反,CAT在哺乳细胞中的半衰期为50小时。荧光素酶浓度在10—16mol/L(10pS/L)到10-8mol/L(1mg/L)范围内,荧光信号强度与酶浓度成正比。在理想条件下,可检测到l0-20mol/L的荧光素酶。检测步骤:1.用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。2.设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段,将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒(pGL3-basic)中。3.筛选阳性克隆,测序。扩增克隆并提纯质粒备用。4.扩增转录因子质粒,提纯备用。同时准备相应的空载质粒对照,提纯备用。5.培养293(或其它目的细胞),并接种于24孔板中,生长10-24小时(80%汇合度)。6.将报告基因质粒与转录因子表达质粒共转染细胞。7.提取蛋白并用于荧光素酶检测。8.加入底物,测定荧光素酶的活性。9.计算相对荧光强度,并与空载对照比较。D-荧光素钾盐的合作平台有哪些?

    我们将与LgBiT具有极强亲和作用的。HiBiT作为一种易于检测且具有高灵敏度的蛋白质标签,具有多种功能,例如当与基于CRIPSR的标签一起使用时,可以创建内源性报告基因模型。[1]2020Lumit?技术随着NanoBiT?技术的发展,人们认识到可以利用该系统通过结合免疫测定的组分检测多种分析物。由此产生的平台(现称为“Lumit”)提供了具有高灵敏度的简化免疫检测法。萤光素酶(英语:Luciferase)是自然界中能够产生生物发光的酶的统称,其中**有代表性的是一种学名为Photinuspyralis的萤火虫体内的萤光素酶。在相应化学反应中,荧光的产生是来自于萤光素的氧化,有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。没有萤光素酶的情况下,萤光素与氧气反应的速率非常慢,而钙离子的存在常??梢越徊郊铀俜从Γㄓ爰∪馐账醯那榭鱿嗨疲?。萤光生成反应通常分为以下两步:萤光素+ATP→萤光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi萤光素化腺苷酸+O2→氧萤光素+AMP+光这一反应非常节省能量,几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯,只有约10%的能量被转化为光,剩余的能量都变为热能而被浪费。萤光素或萤光素酶不是特定的分子。光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。盐城荧光素D-荧光素钾盐使用说明

D-荧光素盐也算是钠盐和钾盐。泰州萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐保质期

    8.取剩余裂解液测定LacZ的活性,其读数作为内标用以矫正荧光素酶的读数。9.用矫正后的读数作图,分析数据。注:荧光素见光易氧化,已稀释未用的荧光素应丢弃。注意事项:1.荧光素酶检测试剂需在15-25℃条件下预平衡后再进行反应,而后依据具体条件进行自动或手动检测。当用液闪计数仪时,加入荧光素酶检测试剂后立即轻轻混匀。2.如果细胞裂解后不能立即对提取物进行检测,样品可以在冰上保存大约5h,在-70℃可保存数月。不要反复冻融以避免酶活性的降低。3.利用上述方法检测冷的样品时,其信号强度将下降5-15%。4.在荧光素酶活性较高的情况下,导致信号超出线性范围(信号溢出)可用裂解液将样品进行稀释。5.不要储存稀释过的样品。如果必须保存,要在稀释的样品中加入BSA至终浓度为,这样可以保持样品的稳定性。6.一些荧光仪在进行检测前需要1-2s的稳定,因此建议在开机后过一段时间再进行检测操作。荧光素酶报告基因检测主要有哪些用途?a.启动子结构分析,将启动子区域序列(通常2k左右)进行分段截短,或对特定位点进行突变,再分别构建入luciferase报告载体,检测其启动子活性。b.启动子SNP分析,一些基因的启动子区域存在单核苷酸多态性。泰州萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐保质期

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