酶法提取是指可溶性胶原和酸溶性胶原被提取后,需用一些蛋白酶,如胶原酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等水解,得到不同的酶促溶性胶原蛋白。所使用的蛋白酶主要分3种:动物蛋白酶(如胰蛋白酶,胃蛋白酶),植物蛋白酶(如木瓜蛋白酶,菠萝蛋白酶),微生物蛋白酶(如碱性蛋白酶,中性蛋白酶)。在对酶法水解胶原蛋白的研究中,以碱性蛋白酶应用较多。将胶原进行限制性降解,即将末端肽切割下来,由于胶原肽链间的共价键都是通过分子末端肽里的赖氨酸或羟赖氨酸的相互作用形成的,末端肽被切下后,含三螺旋结构的主体部分可溶于稀有机酸而被提取出来。用酶处理,可以水解掉胶原纤维蛋白的末端肽,提高胶原蛋白的产率;而且还不会破坏胶原蛋白的三股螺旋结构,保持其特性。影响酶提取的因素有很多,如酶浓度、酶与底物的比例、酶解时间、酶解温度、pH值以及料液比等。在实际操作中,大多数采用酶复合法提取胶原蛋白,较多的是使用胃蛋白酶提取,有机酸多为乙酸。胶原三肽的分子量极小。河南海参胶原蛋白原料厂家
酸法处理时,反应强烈,水解彻底,多生成氨基酸混合物,而且使用酸提取时,根据酸浓度、水解温度、水解时间等条件的不同,可以得到分子量不均的胶原水解物。但是在即使中等浓度酸彻底水解过程中色氨酸也会全部被破坏,丝氨酸和酪氨酸也会部分被破坏,且设备腐蚀严重。因此,酸法溶出生物医用胶原要准确控制酸度、温度、时间等影响因素。由于各种不足,酸法很少单独使用,一般和酶法配合。比如以猪皮为原料,在柠檬酸()和胃蛋白酶协同下提取胶原蛋白。在处理后的猪皮中加()处理一段时间,然后再用NaCL盐析,现在提取率为,提取物保持了完整三股螺旋结构的I型胶原蛋白。还有人以雏鸡胸软骨为原材料,在,在4℃,20000r条件下离心20min,现在应用DEAE-SephadexA-50进行离子交换层析,之后透析,再用NaCL盐析,现在得到纯化的胶原蛋白Ⅱ型。河南复合胶原蛋白肽活性胶原蛋白能直接渗入肌肤底层,且与周围组织的亲和性好。
在实际提取过程中,不同提取方法之间往往相互结合,可以得到较好的提取效果。采用超高压处理系统对原料给予高压处理一段时间,使其组织结构和胶原蛋白的三股螺旋结构发生松弛、变性,便于分离提取。热水提取法是将原料经过除杂蛋白等前处理之后,在一定条件下直接用热水浸提已经变性了的胶原蛋白或胶原蛋白水解物,使用的温度有100℃沸水浴、60-70℃、40-45℃。胶原蛋白的提取一般有三种方法:一是高压辅助的物理方法;二是用溶剂预处理结合低温或热水抽提的化学方法,根据溶剂的不同,可分为热水浸提法、酸法、碱法、盐法;三是用酶的生物化学法。一般来说,高压辅助和热水抽提针对明胶的提取,而低温抽提和酶法针对胶原的提取,但其基本原理都是根据胶原蛋白的特性改变蛋白质所在的外界环境,把胶原蛋白从其他蛋白质中分离出来。
碱法提取即利用一定浓度的碱在一定的外界条件下提取胶原蛋白,碱处理法中常用的处理剂为石灰、氢氧化钠、碳酸钠等,用氢氧化钠浸提时效果较好。一般的是把样品匀浆后,用碱溶液多次溶胀后,再离心提取。但由于易引起蛋白质变性,如胶原肽键水解,含羟基、疏基的氨基酸全部被破坏;所得产物等电点pH值较低,天冬酞胺和谷氨酞胺分别转变为天冬氨酸和谷氨酸,得到的水解产物分子量较在酸性溶液中比低等问题,若比较严重的话,还会产生D、L-型氨基酸消旋混合物,若D型氨基酸含量高过L型氨基酸,则会抑制L-型氨基酸的吸收,有些D型氨基酸有毒,甚至有致ai、致畸和致突变的作用。而且碱法提取的含量较低,用氢氧化钠从鱿鱼皮中提取碱溶性胶原蛋白,其得率只有3%(以湿基计)。所以,若想提取结构完整、使用安全的胶原蛋白,很少采用此方法。有关单独采用碱法提取胶原蛋白的报道不多,一般是碱法提取和酸法提法结合使用。比如在4℃条件下,鱼骨用,再用,用10%的异丙醇溶液去除脂肪,,现在得到无色无味的胶原蛋白,提取率为。胶原三肽是其水分含量增加,起到了保湿作用。
胶原蛋白亦可用于食品,早在十二世纪Bingen的,在相当长的一段时间里,含胶原的一些产品被人们认为对关节是很有益处的。因为它具有适用于食品的一些属性:食用级通常外观为白色,口感柔和,味道清淡,易消化。可以降低血甘油三酯和胆固醇,并可以增高体内某些缺乏的必需微量元素使之维持在一个相对的正常范围之内,它是一种理想的降血脂食品。此外,有研究表明,胶原蛋白可以协助排除体内的铝,减少铝在体内的聚集,降低铝质对人体的危害,并一定程度上促进指甲和头发的生长。Ⅱ型胶原是关节软骨中的主要蛋白,因而是潜在的自身抗原。口服后能诱导T细胞产生免疫耐受,从而抑制T细胞介导的自身免疫性疾病。胶原多肽是胶原或明胶经蛋白酶等降解处理后制得的具有较高消化吸收性、分子量约为2000~30000的产物,不具有明胶的凝胶性能,市场上销售的胶原多为胶原多肽。胶原蛋白肽不是普通的胶原蛋白粉。安徽大豆胶原蛋白原料厂家
胶原蛋白是一类蛋白质家族,已至少发现了30余种胶原蛋白链的编码基因。河南海参胶原蛋白原料厂家
胶原蛋白肽的功效与作用一、抚平细纹胶原蛋白肽可以重建肌肤的弹力纤维网,撑起干瘪的肌肤细胞,舒展、减淡细纹,提升肌肤的张力和弹性,使肌肤回复饱满、水润、富有弹性,令肌肤重现青春健康光彩。二、淡斑美白胶原蛋白肽可以通过改善肌肤细胞的生理环境,由内到位的清理身体内的残存垃圾和污垢,令肌肤更加通透、白皙、光亮,从而有效击退肌肤暗沉,匀净肤色,长期使用还可以有效淡斑。三、补水锁水通过补充肌肤真皮层的胶原蛋白肽,可以有效保持日常肌肤所需要的水分,在皮肤形成弹力网,***新生细胞,使肌肤水嫩光泽,减少因肌肤缺水造成的毛孔粗大、皮肤粗糙等等现象。河南海参胶原蛋白原料厂家
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