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金山区视觉疾病动物模型建模

来源: 发布时间:2021-10-16

1、动物模型名称:低铁饲料联合放血致缺铁性贫血大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雌性4、实验动物年龄:初断乳5、实验动物体重:50~70g6、实验动物环境:SPF级 1、实验方法:低铁饲料联合放血法诱导。SD大鼠每天给予低铁饲料和超纯水饲养,并每周通过眼底静脉丛放血1mL,连续3周。2、检测标准:血红蛋白含量明显下降,红细胞内游离原卟啉明显升高。1.提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。2.根据要求提供构建成功的模型动物或相关组织材料。上海东寰为您提供完善的小鼠动物疾病模型。金山区视觉疾病动物模型建模

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    步骤3、pmsg处理c57bl/6雌性小鼠(6周龄,平均体重20g),46h后注射hcg,与雄性小鼠合笼交配,次日取受精卵进行显微注射,将步骤1的grna1、grna2、cas9蛋白以及线性化后的打靶载体一起注射到受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠体内,产出小鼠,即f0代小鼠。上述步骤中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl,cas9蛋白购自newenglandbiolabs,货号为m0386m。步骤4、提取f0代小鼠尾部dna,pcr扩增产物测序,鉴定是否为嵌合体。本发明用于f0代小鼠pirb基因pcr鉴定的特异性引物如下:pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1对应的扩增产物大小为,primers2对应的扩增产物为。用于f0代小鼠测序的引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。扬州大鼠疾病动物模型建模大量的遗传变异可作为研究人类疾病的借鉴。

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诱发性**模型的原理是利用外源性致*因素引起细胞遗传特性异常而呈现出异常生长和高增殖活性,形成**。致*因素主要有化学性、物理性及生物性致*物,而化学性致*物(chemicalcarcinogens)**常见,已确知的多达一千余种,用于诱发实验性**的种类亦很多,如苯并萨,申基胆菌、联苯胺、亚硝胺类、黄曲霉***类。各种致痒物的致*强度、致*谱等特性相差较大,同一种致*物经不同途径给药所致**部位或类型可有很大差异。有些化学性致*物具有明显的亲***或组织特性。因此,实验工作中应根据需要选用适当致*物和致*途径,并确定其他影响因素或实验条件。基本原理:利用外源性致*物引起细胞遗传特性改变,从而出现异常生长和高增殖活性细胞形成**。外源性致*物主要有化学性、物理性(如放射性物质)及生物性(如诱发动物**的病毒),其中以化学性致*物**为常用

    得到大鼠慢性背根神经压迫模型。进一步地,l型棒的直径为,***端长3-5mm,第二端长1-3mm。具体地,根据大鼠体重选择l型棒的直径大小:当大鼠体重在200g到不足220g范围时,采用直径为;当大鼠体重在220g到不足250g范围时,采用直径为;当大鼠体重在250g到不足300g范围时,采用直径为;当大鼠体重在300g到350g范围时,采用直径为。在另一个具体实施方式中,压迫元件为u型棒;步骤三具体为:将u型棒的***端和第二端分别插入到左侧或右侧腰4椎间孔及腰5椎间孔中,得到大鼠慢性背根神经压迫模型。进一步地,压迫元件采用不受磁场干扰、置入体内不会对神经造成化学刺激以及具有一定可塑性的材料制备而成。在一个具体实施方式中,压迫元件采用黄铜和锌的混合物制备而成。具体地,混合物为h62黄铜,即含铜量为%~%,余量为锌含量的黄铜。而铜、锌皆属于非铁磁性物质。在另一个具体实施方式中,压迫元件采用聚乳酸(polylactic,pla)制备而成。pla是一种无毒无刺激的合成高分子材料,其原料是乳酸,不含任何金属。h62黄铜棒或pla棒在体内,即不会受磁疗、电疗引起的磁场、电场干扰,也不会对磁疗、电疗仪器及磁共振仪器产生不良影响。上海东寰提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。

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    实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测***水平是指:检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意图。图4:大鼠体重检测结果示意图。图5:大鼠卵巢重量统计示意图。图6:动情周期检测(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:动情前期,动情期,动情后期,动情间期。图7:he染色观察不同方法造模对卵泡形态的影响(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:空白组,2mg组,4mg组,6mg组。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明。然而,本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解,在不背离本发明的精神和范围的前提下。构建人源移植瘤模型需要合适的免疫缺陷小鼠想知道如何选择?非酒肝疾病动物模型建模供应商

可以克服人类某些疾病潜伏期长,病程长和发病率低的缺点。金山区视觉疾病动物模型建模

    f1代小鼠southern印记的5’探针引物如下:primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtcacctcagtctccct-3’primersfor3’probe:3’probeforwardprimer:5’-ttctgggcaggcttaaaggctaac-3’3’probereverseprimer:5’-aggagcgggagaaatggatatgaag-3’southern印记的目标片段大小如下:5’probe-bamhi:3’probe-avrii:。步骤c、采用限制性内切酶bamhi和avrii对dna进行切割;琼脂糖凝胶电泳分离dna;步骤d、将dna转到尼龙膜上;步骤e、探针变性后,与dna分子进行杂交,nbt/bcip化学显色法显色,拍照观察。southern杂交结果如图6所示,可以看到:6、8、9号pirb基因敲除小鼠如果被bamhi切割,在,wt小鼠只在,如果被avrii切割,pirb基因敲除小鼠在,wt小鼠只在。步骤6、将f1代杂合子小鼠近交获得f2代纯合子pirb基因敲入小鼠,即为本发明所述小鼠pirb基因敲入的动物模型。将本发明获得的动物模型f2代纯合子小鼠与同品系小鼠组织/细胞特异性cre表达的小鼠杂交,获得f3代小鼠,可以实现在不同组织或者细胞类型中敲入pirb基因。对f3代小鼠进行基因型的鉴定:含有无(pirb-cwt)、一个(pirb-chet)或者两个。金山区视觉疾病动物模型建模

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