细胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛细胞固定液，室温培养30分钟，弃固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，摇床孵育5分钟，以中和过量的多聚甲醛；(c)弃甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室温清洗5分钟；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100细胞通透液，室温通透10分钟，弃细胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室温清洗5分钟；该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测，适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理，固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好？提供EdU细胞增殖检测试剂盒供应商

使用本试剂盒所做结果可以用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪进行检测，也可以用于高内涵筛选(High-Content Screening, HCS)。对6孔板培养的细胞（每孔500μl的Click反应液）、96孔板培养的细胞（每孔50μl的Click反应液）、每管细胞数量为10-100万的流式细胞仪检测（每管500μl的Click反应液）以及冰冻或石蜡切片的检测（每个样品100-200μl的Click反应液），不同规格的本产品可以提供的反应的量详见说明书中的表。光谱特性：488-Azide：绿色荧光，Ex/Em=491/518nm；Hoechst 33342：蓝色荧光，Ex/Em=346/460nm, bound to DNA。天津EdU细胞增殖检测试剂盒厂家你知道EdU细胞增殖检测试剂盒的特点吗？

EdU细胞增殖检测和BrdU细胞增殖检测的对比。小分子化合物AndyFluor?azide与EdU之间的点击化学(ClickChemistry)反应不需要DNA变性，就可以进行高效快速的细胞增殖检测分析，该反应不受双链DNA中碱基对的影响，因此客户了BrdU掺入法的弊端。图2.使用EdU细胞增殖检测试剂盒对细胞和组织的染色效果。使用10μMEdU处理A549细胞2小时，然后分别使用AndyFluor?488azide(绿色,上图)、AndyFluor?594azide(红色,中间图)检测细胞增殖活性，使用DAPI进行复染（蓝色）。腹腔注射EdU到小鼠体内（每公斤小鼠注射5mgEdU），分别于0、12、24小时之后取小鼠肠组织，制成切片用AndyFluor?488azide(绿色,下图)检测细胞的增殖情况，使用DAPI进行复染（蓝色）。

EdU上的乙炔基能与生物素标记的叠氮化物(Biotinlabeledazide)通过一价铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，该反应非常迅速，被称作点击反应(Clickreaction)，其反应原理参见图1。通过点击反应，新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记，从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。EdU检测法中的点击反应(Clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(LabeledAzide)与掺入到细胞DNA中的EdU，在铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，终使细胞DNA标记上生物素等探针。EdU细胞增殖检测试剂盒怎样使用？上海东寰告诉您。

但该方法由于有放射性污染并且很难实现单细胞检测而受到很大的限制，随后逐渐被基于抗体检测的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法步骤繁多，且需要使用BrdU抗体，影响因素较多，稳定性比较差。并且由于BrdU法需要使用抗体，有时会和其它目的蛋白基于抗体的检测相互产生干扰。EdU法基于EdU掺入和后续的点击反应，无需使用抗体、操作便捷、检测灵敏度高，是一种在BrdU法基础上升级换代的新方法，将会逐步取代BrdU法。MTT法(C0009)、WST-1法(C0035、C0036)、CCK-8法(C0037、C0038、C0039、C0040、C0041、C0042、C0043、C0046)和CellTiter-Lumi?化学发光法(C0065、C0068)都是基于细胞活性的细胞增殖检测方法，能检测到细胞的总体增殖效果，但无法检测到单个的增殖细胞。EdU细胞增殖检测试剂盒去哪买？河北如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒供应商

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EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散，无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。本试剂盒可以检测到细胞或组织样品中单个的增殖细胞，同时也可以对细胞或组织样品总体的细胞增殖情况进行定量检测。本试剂盒可以检测培养的细胞或组织样品，也可以检测组织切片，但均需提前进行EdU的掺入。细胞增殖能力的检测是评估细胞活性、基因毒性和抗药物效果等的基本方法。提供EdU细胞增殖检测试剂盒供应商