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青浦区如何使用疾病动物模型建模

来源: 发布时间:2021-10-21

1、动物模型名称:酒精诱导的肝硬化大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:5周5、实验动物体重:150g-160g6、实验动物环境:SPF级。1、实验方法:用酒精诱导法。大鼠每天按10mL/kg体重灌服酒精混合物(酒精:吡唑:玉米油=10mL:25mg:2mL)造模,每周2次按0.3mL/kg剂量腹腔注射给予CCl4:橄榄油=1:3,连续灌服60天。解剖取肝脏进行组织病理学检查。2、检测标准:肝组织可见肝硬化病理改变(S1级~S4级)。小鼠是人类疾病理想的动物模型不仅因为小鼠在生理上与人类极为相似而且小鼠的遗传资源非常丰富。青浦区如何使用疾病动物模型建模

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    r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步骤4、鉴定为pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周龄、雌性小鼠6周龄分别与野生型异性小鼠交配获得f1代杂合子小鼠,图2为本发明f1代杂合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程图,小鼠出生后20天进行pcr鉴定,若有阳性小鼠出生,则表示转基因已经整合到生殖细胞。(1)通过pcr方法对获得的f1代小鼠进行基因型的鉴定:(a)dna的提取:方法1:采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()来获得高纯度的基因组dna。步骤a.每只小鼠剪下一段尾巴(2~5mm),放入离心管中,加入180μlbuffergl,20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步骤b.将步骤a离心管内于56℃孵育过夜。步骤c.过夜后12000rpm离心2min去除杂质。步骤d.加入200μlbuffergb和200μl无水乙醇,充分混匀。步骤e.将吸附柱放在收集管上,将步骤d得到的样品加到吸附柱里,12000rpm离心2min,弃掉收集管中液体。步骤f.弃去液体后在吸附柱中加入500μlbufferwa,12000rpm离心1min,弃掉收集管中液体。步骤g.在收集管中加入700μlbufferwb,12000rpm离心1min。弃掉收集管中液体。注意:bufferwb需要与100%乙醇预混,沿管壁加入bufferwb冲走残余的盐。步骤h.重复步骤g一次。哪家公司提供疾病动物模型建模说明书大鼠疾病建模请找上海东寰。

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1、动物模型名称:泪腺摘除联合新洁尔灭致干眼兔模型2、实验动物种属:新西兰兔3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:2~3月龄5、实验动物体重:1.8~2.5kg6、实验动物环境:SPF级,1、实验方法:摘除泪腺联合新洁尔灭诱导。兔耳缘静脉注射戊巴比妥钠联合肌肉注射进速眠新Ⅱ进行麻醉。麻醉后,进行泪腺摘除手术,眼睑局部以75%酒精消毒,铺洞巾,于眼下眶周部做一切口,小心分离皮肤、肌肉、筋膜,寻找到泪腺后完整摘除之,然后缝合创口。术毕,滴妥布霉素**眼液2滴、涂四环素可的松眼药膏,共7d。术后兔创口愈合后进行给药造模。眼滴0.1%新洁尔灭溶液,2次/天,2滴/次,连续用药14d。2、检测标准:SchirmerI试验泪液分泌减少,1%虎红角膜染色试验虎红着色评分值高,角膜出现病理改变。

    可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的,但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料等,可通过正规商业途径获得。下述实施例中所涉及的实验方法,检测方法等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规实验方法,检测方法等。实施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液50ml加入规格为10mg的医用顺铂(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成2mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。实施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成3mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。实施例3建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液25ml加入规格为10mg的医用顺铂(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成4mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg分别在***天及第八天腹腔注射。实施例4:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中。动物模型的优越性主要表现在以下几下方面!

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    技术领域:本发明属于遗传学和生物技术领域,具体涉及pirb基因敲入的小鼠动物模型,还涉及上述小鼠动物模型的构建方法。背景技术:鼠源成对免疫球蛋白样受体b(pairedimmunoglobulin-likereceptorb,pirb),是人类免疫球蛋白样受体b2(humanleukocyteimmunoglobulin(ig)-likereceptorb2,lilrb2)的同源基因,pirb基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的7号染色体近端,总大小为,编码841个氨基酸,目前鉴定出15个外显子,外显子1起始密码为atg,外显子15的终止密码子是tga(转录本:)。pirb蛋白属于i型跨膜糖蛋白,包含由六个免疫球蛋白样结构域(domain,d)组成(d1-d6)的胞外段,一个疏水的跨膜段,三个免疫受体酪氨酸依赖的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs,itims)和一个itims样序列组成的胞内段。理论上讲,pirb的分子量约为92kd,但是western-blot分析中,pirb经常位于105kd处,因为pirb是糖蛋白。以往研究发现,pirb在免疫系统和中枢调节中均发挥重要作用。在免疫系统中,pirb在许多造血细胞都有表达,包括b细胞、肥大细胞、巨噬细胞、粒细胞和树突细胞,但是在胸腺细胞、成熟的t细胞和自然杀伤细胞不表达。什么是疾病动物模型建模?品牌疾病动物模型建模原理

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    其中可以看出手术侧后爪的缩足阈值较手术前及对侧后爪有***降低,且标准误区间非常小。图4是表1的数据通过曲线图的方式展现。结果显示:大鼠在术后***天即出现手术侧后爪敏感,施加轻微的重量(4g左右)都会引起缩足表现,这说明其痛阈明显降低,对轻微的刺激均呈现抬脚,舔舐后足等痛觉过敏表现。这种表现维持至术后至少28天。而对侧后爪在术前和术后缩足阈值变化不大,基本保持在20-25g。实施例3、模型的应用采用实施例1中描述的方法对两组大鼠均进行了造模,l型棒的材料选择的是h62黄铜或聚乳酸等不受磁场干扰、置入体内不会对神经造成化学刺激以及具有一定可塑性的材料。在造模后第七天应用重复经颅磁刺激(rtms)***大鼠,其中一组接受了真的磁刺激,为磁刺激组;另一组接受了假的磁刺激,为假刺激组。结果显示,磁刺激组的大鼠缩足阈值较假刺激组明显提高,如图5所示。这表明磁刺激缓解了神经压迫造成的疼痛,该模型可以用于磁刺激***的研究。以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解,本领域的普通技术无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此。青浦区如何使用疾病动物模型建模

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