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普陀区疾病动物模型建模

来源: 发布时间:2022-11-04

1、动物模型名称:腹主动脉缩窄致心衰大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雌性4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:180~220g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:采用主动脉缩窄法建立模型大鼠麻醉后,仰卧位固定、去腹毛、消毒,沿腹正中线切开皮肤及肌层,分离出腹主动脉,在肾动脉上方将腹主动脉与钝头8号探针一起结扎后,小心抽出针头。手术造模后大鼠正常饲养3个月。大鼠终末体重(BW),心室重(VW),计算心体比(VW/BW),并进行心功能检测,包括心率(HR)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)及左室最大压力上升及下降速度(±dp/dtmax),并对心肌组织进行病理学检测.2、检测标准:模型组大鼠VW/BW明显增加,LVSP明显降低,LVEDP明显升高,±dp/dtmax则***减小,与正常对照组相比具有统计学差异。病理学检测结果表明心肌出现典型心衰样病理改变。实验动物向小型化的发展趋势更有利于实验者的日常管理和实验操作。普陀区疾病动物模型建模

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该模型能够帮助我们研究pirb基因在免疫系统和神经系统的功能以及下游的调节机制。本发明的另一目的在于提供上述小鼠动物模型的构建方法。本发明所采用的第一种技术方案是:pirb基因敲入的小鼠动物模型,包括确定pirb基因的待敲入的特异性靶位点grna1和grna2,将pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的内含子1内,所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本发明所采用的第二种技术方案为:pirb基因敲入的小鼠动物模型的构建方法,具体按照以下步骤实施:步骤1、基于crispr/cas9技术构建针对c57bl/6j小鼠rosa26基因的特异性grna1和grna2,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如;步骤2、构建“cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya”基因盒打靶载体,将打靶载体进行线性化处理;步骤3、步骤2中将含有loxp位点打靶载体、步骤1中有活性的grna1和grna2与cas9蛋白共同注射进入**小鼠受精卵中,获得f0代小鼠;步骤4、将步骤3中性成熟的阳性f0小鼠分别与野生型鼠交配繁一代,获得f1代杂合子小鼠,通过pcr、测序和southern杂交确定动物基因型;步骤5、将步骤4获得的f1代杂合子小鼠近交获得f2代纯合子小鼠。镇江非酒肝疾病动物模型建模疾病动物模型建模厂家。

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1、动物模型名称:皮肤浅II°及深II°烫伤大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:160-200g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:热力致皮肤损伤法。麻醉大鼠,根据体重腹部备皮,然后固定于实验台上。将大鼠移近加热纯净水的烧杯,将纱布条浸入热水中,待水温恒定于99℃时,取出纱布,立即平铺于待烫部位,于纱布接触大鼠皮肤后开始计时。致伤3s为浅II°烫伤,致伤10s为深II°烫伤。2、检测标准:a.皮肤大体观察:致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好,有少量红褐**素沉着,皮肤轻微挛缩,表皮光滑;致伤10s大鼠局部皮肤发白、水肿。愈合后毛发生长良好,皮肤瘢痕形成,表面粗糙不平。b.皮肤组织病理学观察:致伤3s大鼠表皮层次尚清楚,细胞明显肿胀、变性,层次结构尚清楚,细胞核结构不清;致伤10s大鼠表皮细胞部分脱落,结构不清,明显变性、坏死,部分细胞已溶解

球囊拉伤致高脂血症动脉硬化兔模型,实验动物种属:新西兰兔,实验动物环境:SPF级1、实验方法:用球囊拉伤诱导法。采用3%戊巴比妥钠耳缘静脉注射麻醉,经右股浅动脉,将3.5F球囊扩张导管插至腹主动脉20cm,球囊充液膨胀至2个大气压缓慢拉出,反复3次。球囊拉伤手术后,动物喂以高脂饲料,连续9周,每天给料两次,自由饮水。实验结束后取腹主动脉斑块进行组织病理学检查。2、检测标准:腹主动脉斑块病理镜下可见腹主***程度的改变。利用动物疾病模型来研究人类疾病可以克服平时一些不易见到不便于在病人身上进行实验的人类疾病的研究。

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1、动物模型名称:橄榄油联合酒精致肝硬化门脉高压大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:5周5、实验动物体重:150g-180g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:橄榄油联合酒精诱导。按0.3mL/100g体重,背颈部皮下注射50%CCl4的橄榄油溶液,***注射量加倍(6mL/kg体重),2次/周,皮下注射共13周;造模前4周为10%酒精溶液喂养代替饮水,4周后改为30%酒精溶液灌胃(30%酒精溶液灌胃1mL/100g体重,3次/周)。继续正常饲养1个月。实验结束测量门静脉血流量(PBF)和肠系膜上动脉血流量(SMABF)。处死,取肝脏进行组织病理学检查。2、检测标准:门静脉及肠系膜上动脉血流量情况与正常对照组比较均增加,差异有统计学意义肝组织病理可见肝硬化病理改变。广泛应用于药效评价、转化医学等医学前沿领域。宿迁疾病动物模型建模哪家好

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即为本发明构建的一种pirb基因敲入的小鼠动物模型。本发明所采用第二种技术方案的特点还在于,步骤1中得到grna1和grna2后分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构。步骤3中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl。步骤4中southern杂交采用bamhi和avrii核酸内切酶切割f1代杂合子小鼠的dna。本发明的有益效果是:本发明提供了pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法,本发明的小鼠动物模型对于pirb基因功能的研究和在体验证提供了良好的基础。分离自pirb基因敲入小鼠的细胞还可以用于研究pirb发挥调节作用的下游机制。通过pirb敲入动物模型与不同类型cre小鼠的杂交,可以用于研究ad不同***或不同细胞类型pirb的调节作用。普陀区疾病动物模型建模

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