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嘉定区泌尿疾病动物模型建模

来源: 发布时间:2021-10-18

    r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步骤4、鉴定为pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周龄、雌性小鼠6周龄分别与野生型异性小鼠交配获得f1代杂合子小鼠,图2为本发明f1代杂合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程图,小鼠出生后20天进行pcr鉴定,若有阳性小鼠出生,则表示转基因已经整合到生殖细胞。(1)通过pcr方法对获得的f1代小鼠进行基因型的鉴定:(a)dna的提取:方法1:采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()来获得高纯度的基因组dna。步骤a.每只小鼠剪下一段尾巴(2~5mm),放入离心管中,加入180μlbuffergl,20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步骤b.将步骤a离心管内于56℃孵育过夜。步骤c.过夜后12000rpm离心2min去除杂质。步骤d.加入200μlbuffergb和200μl无水乙醇,充分混匀。步骤e.将吸附柱放在收集管上,将步骤d得到的样品加到吸附柱里,12000rpm离心2min,弃掉收集管中液体。步骤f.弃去液体后在吸附柱中加入500μlbufferwa,12000rpm离心1min,弃掉收集管中液体。步骤g.在收集管中加入700μlbufferwb,12000rpm离心1min。弃掉收集管中液体。注意:bufferwb需要与100%乙醇预混,沿管壁加入bufferwb冲走残余的盐。步骤h.重复步骤g一次。大量的遗传变异可作为研究人类疾病的借鉴。嘉定区泌尿疾病动物模型建模

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1、动物模型名称:泪腺摘除联合新洁尔灭致干眼兔模型2、实验动物种属:新西兰兔3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:2~3月龄5、实验动物体重:1.8~2.5kg6、实验动物环境:SPF级,1、实验方法:摘除泪腺联合新洁尔灭诱导。兔耳缘静脉注射戊巴比妥钠联合肌肉注射进速眠新Ⅱ进行麻醉。麻醉后,进行泪腺摘除手术,眼睑局部以75%酒精消毒,铺洞巾,于眼下眶周部做一切口,小心分离皮肤、肌肉、筋膜,寻找到泪腺后完整摘除之,然后缝合创口。术毕,滴妥布霉素**眼液2滴、涂四环素可的松眼药膏,共7d。术后兔创口愈合后进行给药造模。眼滴0.1%新洁尔灭溶液,2次/天,2滴/次,连续用药14d。2、检测标准:SchirmerI试验泪液分泌减少,1%虎红角膜染色试验虎红着色评分值高,角膜出现病理改变。宝山区生殖疾病动物模型建模上海东寰告诉您如何选择好的动物模型。

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1、动物模型名称:放血致失血性贫血小鼠模型2、实验动物种属:KM小鼠3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:约4周龄5、实验动物体重:18~22g6、实验动物环境:SPF级 1、实验方法:眼眶静脉丛放血法。小鼠通过眼眶静脉丛放血,0.5mL/只,并测外周血红细胞总数(RBC)及血红蛋白含量(Hb)。24h后所有小鼠眼眶静脉丛采血检测外周血RBC总数及Hb含量。2、检测标准:模型组小鼠放血后24小时的外周血RBC总数及Hb含量较放血前明显下降,低于正常值参考值,且与正常对照组比较具***性差异(P<0.05),表明成功构建了失血性贫血动物模型造模。

    实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测***水平是指:检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意图。图4:大鼠体重检测结果示意图。图5:大鼠卵巢重量统计示意图。图6:动情周期检测(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:动情前期,动情期,动情后期,动情间期。图7:he染色观察不同方法造模对卵泡形态的影响(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:空白组,2mg组,4mg组,6mg组。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明。然而,本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解,在不背离本发明的精神和范围的前提下。哪里可以做动物模型?

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    建立一种理想的腰椎间盘突出的动物模型对本病的机制研究和临床防治具有重要意义。现有模型对腰椎间盘突出症的模拟均存在明显不足,或与临床实际病变部位有一定差距,如慢性坐骨神经结扎模型;或操作难度大,对动物损伤重,如自体髓核移植模型,选择性神经根结扎模型。因此,急需一种新的操作简单,重复率高,稳定且能准确模拟腰椎间盘突出后症状的动物模型。技术实现要素:为了建立一种操作简单,稳定好且能准确模拟腰椎间盘突出后症状的动物模型,本发明提供了一种大鼠慢性背根神经压迫模型的制备方法。其包括以下步骤:步骤一、麻醉大鼠;步骤二、于大鼠腰4到骶1水平左侧或右侧作纵行切口,切开皮肤,钝性分离椎旁肌,暴露腰4椎间孔和腰5椎间孔;步骤三、将压迫元件插入到左侧或右侧腰4椎间孔及腰5椎间孔中,得到大鼠慢性背根神经压迫模型。其中,步骤一具体为:腹腔注射1%戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉大鼠后,将大鼠背部剃毛,碘伏消毒背部皮肤,俯卧位固定于动物手术台上,铺无菌巾。在一个具体实施方式中,压迫元件为l型棒;步骤三具体为:将2根l型棒的***端分别插入到左侧或右侧腰4椎间孔及腰5椎间孔中,l型棒的第二端置于腰4椎间孔及腰5椎间孔外。动物疾病模型广泛应用于新药靶点发现及筛选。上海咨询疾病动物模型建模

可以严格控制实验条件,增强实验材料的可比性。嘉定区泌尿疾病动物模型建模

球囊拉伤致高脂血症动脉硬化兔模型,实验动物种属:新西兰兔,实验动物环境:SPF级 1、实验方法:用球囊拉伤诱导法。采用3%戊巴比妥钠耳缘静脉注射麻醉,经右股浅动脉,将3.5F球囊扩张导管插至腹主动脉20cm,球囊充液膨胀至2个大气压缓慢拉出,反复3次。球囊拉伤手术后,动物喂以高脂饲料,连续9周,每天给料两次,自由饮水。实验结束后取腹主动脉斑块进行组织病理学检查。2、检测标准:腹主动脉斑块病理镜下可见腹主***程度的改变。嘉定区泌尿疾病动物模型建模

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