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南京病毒核酸提取常见问题

来源: 发布时间:2024-02-07

磁珠法核酸提取一般可以分为四步:裂解——结合——洗涤——洗脱裂解:核酸必须从细胞或其他生物物质中释放出来,细胞裂解可通过机械作用、化学作用、酶作用等方法实现。其中,酶作用主要是通过加入溶菌酶或蛋白酶(蛋白酶K、植物蛋白酶或链霉蛋白酶)以使细胞破裂,核酸释放。蛋白酶还能降解与核酸结合的蛋白质,促进核酸的分离。结合:磁珠表面带负电荷,磁珠buffer是高盐环境有带正电荷的盐离子,样本被buffer影响,磷酸基团带负电荷。宿主细胞残留核酸提取过程中有哪些因素会导致提取效果不佳?南京病毒核酸提取常见问题

CHO宿主细胞残留DNA检测中,磁珠法核酸提取回收率偏低的原因有哪些?样品问题:样品存在抑制;操作原因:①洗涤液配制操作,外加有机溶剂的体积或纯度不正确;②漏加或少加试剂组分;③磁珠保存不当,冷冻过;④在提取过程中将样品管高速离心或长时间离心;⑤磁力架不匹配,磁性较弱;自动化核酸提取设备原因:①自动化核酸提取设备的磁分离方式设计有问题、设备的磁场弱;②使用自动化设备进行核酸提取时所用的参数设置不合适;其他原因:①耗材非低吸附耗材;②耗材中有抑制物;③实验室存在抑制物;南京RCL核酸提取产品宿主细胞残留核酸提取相关操作步骤。

南京正扬生物自主研发生产的宿主细胞残留核酸提取试剂盒利用磁珠法的原理,提取纯化生物制品中残留的微量宿主细胞DNA/RNA,产品使用事项包括以下几点:1.磁珠悬浮液严禁冷冻和离心,以免损伤磁珠,磁珠使用前务必充分混匀。2.裂解液结合液、洗涤液A、洗涤液B在低于10℃时可能出现白色结晶,若出现沉淀,请37℃水浴重新溶解后使用。3.请尽量在完成样本纯化处理当天进行后续的DNA检测,以保证检测结果的准确性。4.请务必仔细阅读本试剂盒说明书,并严格按照操作步骤完成操作。

磁珠法核酸提取是纳米科技与生物技术的完美结合,具有其它传统核酸提取方法不可比拟的优势:(1)样本需求量低:微量的生物样本即可提到高浓度的核酸;(2)保护操作人员:全自动核酸提取蕞限度的减少操作人员与检测的接触,有效保护实验操作人员;(3)安全无毒无害:试剂不含酚、氯仿等有毒化学试剂,完全符合现代化环保理念。(4)磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度高,可直接用于PCR,回收率高(80%-120%)。宿主细胞残留核酸提取过程中有哪些注意事项?

裂解效果不好?多加点裂解液。洗涤效果不好?多加点洗涤液。这是大家在使用核酸提取试剂盒时的惯性思维。但是对于磁珠法而言,每增加一部分液体体积,就减少了更多的磁珠碰撞几率,而降低磁珠碰撞几率,会导致吸附率的大幅度下降。所以很多时候,虽然增加裂解液和洗涤液确实能够起到增强裂解和增强洗涤的作用,但磁珠法提取的中是磁珠吸附核酸的效率,无法保证磁珠碰撞效率是不能保证核酸提取效率的,所以单纯增加试剂使用量改善提取效果并不一定完全有效。南京正扬宿主细胞残留核酸提取试剂盒操作时间是多久?南京病毒核酸提取常见问题

宿主细胞残留检测项目中,核酸提取时加标回收一般如何设置?南京病毒核酸提取常见问题

磁珠法核酸提取过程中的常见误区--洗涤次数越多,洗涤效果越好提取得到的核酸杂质过多时,使用者会考虑多进行几次洗涤,以得到更为纯净的核酸。增加洗涤次数确实有利于提纯核酸,但考虑到每次洗涤都会损失一定量的核酸,且增加了核酸断裂水解的可能性,所以一般来说洗涤次数控制在2~4次为宜。商业化核酸提取试剂盒都是经过严格验证的,在使用时严格按照说明书进行洗涤即可,随意修改洗涤顺序、洗涤磁珠、洗涤液的量,很可能会是核酸质量下降。南京病毒核酸提取常见问题

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