美国药典(USP)对宿主细胞残留DNA检测的规定:美国食品药品监督管理局(FDA)发布的指导原则中指出生物制品宿主细胞DNA残余限度不得超过100pg/剂量,对于大剂量的如单克隆抗体的生物制品,根据其残余DNA来源及给药途径,DNA残留量可放宽至10ng/剂量。《美国药典》(USP40-NF35)通则<1130>收录了3种外源性DNA残留量测定的方法,分别为DNA探针杂交法、阈值法和实时定量聚合酶链式反应(PCR)法。
欧洲药典(EP)对宿主细胞残留DNA检测的规定:欧洲药品管理局指出需要对连续传代哺乳细胞残留DNA的去除过程进行工艺验证,旨在确认去除残留DNA的主要步骤,并确保此工艺程序可以将终产品中的残留DNA控制在允许范围[4]。《欧洲药典》(EP9.3)通则规定的生物制品残留DNA限度大多为不超过10ng/剂量,但对个别疫苗的残留DNA限定标准更严格,如甲型肝炎灭活疫苗中的残留DNA不得超过100pg/剂量,乙型肝炎疫苗中的DNA残留量不得超过10pg/剂量。 CHO宿主细胞残留DNA检测的质量控制。上海HEK293细胞残留DNA检测价格
《中国药典》2020版已收载三种方法用于外源性宿主细胞残留DNA检测,其中较为常用方法的为qPCR技术,该方法不仅可准确定量,且灵敏度较高可达到fg级,很大提高检测的准确性。但因其需精密和昂贵的qPCR仪、相关检测试剂盒价格较高,较难在基层及偏远地区实施,且其有着复杂的样品前处理和相对较长的检测时间,应用于快检的难度比较大。对于企业生产实时监控而言,特别需要一种可以快速的,低廉的试剂盒,其可以检测抗体中残留DNA是否符合标准,同时不需要昂贵的设备。宁波E1A残留DNA检测国家对HEK293宿主细胞残留DNA检测的要求有哪些?
动物源性基质材料的脱细胞过程被认为是非常重要的,细胞残留DNA定量检测是评价脱细胞过程及控制产品质量的重要措施之一。据GB/T16886.1—2022/ISO10993-1:2018《医疗器械生物学评价第1部分:风险管理过程中的评价与试验》,医疗器械必须经历生物相容性的挑战,其中对于生物学的风险评定要求包含:无细胞毒性、无致敏性、无遗传毒性、无致ai性等。南京正扬生物科技有限公司已按照ISO9001质量体系研发生产多款满足法规需求的细胞残留DNA检测试剂盒,范围涵盖宿主细胞残留DNA提取试剂盒、宿主细胞残留DNA检测试剂盒、微生物快检试剂盒,所有产品均已进行了多面的性能验证,质量可靠有保证,可以满足生物源性医疗器械的质量控制需求。
宿主细胞残留DNA检测的重要性:众所周知,通过细胞培养生产生物制品时,需要在下游工艺中去除所有的源于宿主细胞残留的杂质,如胞质蛋白、基因及潜在病毒等。其中宿主细胞DNA残留问题受到了制药同行很大的关注。究其原因,在于生物制品中即便是微量地来源于宿主细胞的外源性DNA都有传递仲瘤或病毒相关基因的可能性。如果生物制品在携带残留DNA的情况下注射进入患者的体内,如果细胞DNA为致ai基因,具有致瘤性,在患者体内生成仲瘤;如果为病毒基因,不排除该基因扩增并组装的可能,威胁患者的健康。总之,宿主细胞残留DNA的潜在危害不容小觑,通过去除宿主细胞DNA预防可能出现的不利后果是极为必要的。如今,宿主细胞残留DNA已作为生物制品安全性评价的一个重要指标。HEK293宿主细胞残留DNA检测的质量控制。
宿主细胞残留DNA检测在动物源性生物材料领域的应用及要求:参考YY/T0606.25-2014《组织工程医疗产品第25部分:动物源性生物材料DNA残留量测定法:荧光染色法》中的要求,动物源性基质材料的脱细胞过程被认为是非常重要的,残留DNA定量检测是评价脱细胞过程及控制产品质量的重要措施之一。但需要留意的是在去细胞化的过程中引入的添加物如:化学试剂、核酸酶、蛋白酶等会影响产品蕞终质量,也应当引起重视。用qPCR进行宿主细胞残留DNA检测时,哪些因素会对检测结果准确性和方法灵敏度存在较大影响?前处理过程杂质干扰的去除对qPCR法宿主细胞残留DNA检测结果有着较大影响。样品的前处理操作步骤对DNA检测结果的准确度影响较大,通常采用加样回收试验来进行验证并确定可接受的偏离限度,内标回收率在50-150%的范围内都可以接受。样品提取步骤较为复杂,需要特别注意,操作不当不但可能影响回收率还可能引入环境污染。CHO宿主细胞残留DNA检测。郑州HEK293T细胞残留DNA检测操作流程
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冻干人用狂犬病疫苗以其在生产工艺、经济效益和质量等方面的综合优势,占据了我国的大部分狂犬病疫苗市场。目前,人用狂犬病疫苗的生产需要经过Vero细胞培养、病毒增殖、病毒收获和浓缩、病毒灭活以及纯化等过程。然而,在细胞培养和病毒增殖的过程中,会产生游离的宿主DNA及与病毒蛋白结合的宿主DNA。这些残留DNA会随疫苗一起被注入到人体内,使得人体由于异源物质的注入引起不良反应。鉴于上述风险,国内外监管部门分别出台了相应的指导原则并提供了宿主细胞残留DNA检测的方法。上海HEK293细胞残留DNA检测价格