《CAR-T细胞治 疗产品质量控制检测研究及非临床研究考虑要点》一文提到:目前RCR/RCL病毒检测方法主要有指示细胞培养法、ELISA法(p24蛋白测定)、PCR/q-PCR法(通过psi-gag或VSV-G聚合酶链反应)和转录酶活性测定法(PERT)等。其中,利用指示细胞培养法对生产过程中的病毒(上清液、病毒生产终末期细胞)存在的RCL进行培养扩增,并在培养终点进行重复检测是FDA推荐的RCL检测方法。
《CAR-T细胞治 疗产品质量控制检测研究及非临床研究考虑要点》一文提到:目前RCR/RCL病毒检测方法主要有指示细胞培养法、ELISA法(p24蛋白测定)、PCR/q-PCR法(通过psi-gag或VSV-G聚合酶链反应)和转录酶活性测定法(PERT)等。其中,利用指示细胞培养法对生产过程中的病毒(上清液、病毒生产终末期细胞)存在的RCL进行培养扩增,并在培养终点进行重复检测是FDA推荐的RCL检测方法。 如何用qPCR法做复制型慢性毒检测?深圳RCL病毒检测价格
用qPCR法进行rcAAV复制型腺相关病毒检测时,出现扩增效率超出标准要求(低于83.3%或高于110%)的原因有哪些?①设计的引物探针不适用:重新分析靶标序列进行设计。②标曲浓度设定太高,超出标曲线性范围:对范围进行验证,选取合适标曲范围。③人员操作问题,如稀释错误、制备过程震荡时间过长等:人员上岗前应接受多面培训并做到熟练操作,考核合格后方可上岗。④移液器未校准或品质问题导致量取不准:定期对移液器进行校准并选择好品质移液器。广州复制型腺相关病毒检测品牌复制型腺相关病毒检测要求有哪些?
美国FDA2020年发布的关于RCR/RCL病毒检测指南提出:对于RCR/RCL的检测包含指示细胞培养法、ELISA法(p24蛋白测定)、PCR/Q-PCR法(通过psi-gag或VSV-G聚合酶链反应)、PERT法(产物增强性逆转录检测法)共4种检测方法。其中,指示细胞培养法和Q-PCR法较常用,但各国监管机构推荐并且可以接受的方法还是以指示细胞培养法为准。由于细胞产品一般要新鲜输注或快速冻存的特殊性,可使用Q-PCR法先进行质控放行,但指示细胞培养法应同时进行确认。
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复制型腺相关病毒检测适用性样品有哪些?深圳RCL病毒检测价格
用qPCR法进行rcAAV复制型腺相关病毒检测时,出现扩增曲线复孔间荧光信号值降低及复孔间扩增曲线重复性差的原因可能是什么?复孔间部分曲线荧光信号值降低的现象比较常见,通常与反应管内存在气泡相关,随反应温度升高,气泡破裂导致荧光信号值降低。上机前需仔细检查反应管内是否有气泡残留。另外,针对加样误差引起的复孔间重复性差,实验人员上岗前需加强培训并考核,移液器务必定期校准并正确掌握使用方法。此外,还需注意确保试剂与样品混匀,离心后再上机。深圳RCL病毒检测价格