如今，实时荧光定量PCR(qPCR)是一种首    选的支原体检测方法，因为它准确、灵敏且省时。与常规PCR不同，qPCR允许实时观察支原体DNA的DNA扩增，因为特异性引物在荧光探针存在的情况下与其靶序列结合，从而导致DNA扩增和荧光增强。此外，qPCR比常规PCR更具特异性和敏感性。与标准PCR一样，支原体qPCR需要内部、阳性和阴性对照，并且可能受到实验室支原体DNA污染的影响。为什么我们需要敏感的支原体检测？细胞培养和细胞系的使用在生物研究和生物制药产品的生产中是必不可少的。当发生支原体感   染时，后果——感   染的疫苗、代价高昂的药物开发中断、不可靠的细胞培养试验、不可重复的结果、失去多年的工作、失去宝贵的细胞系——可能是毁灭性的。此外，支原体对细胞培养中常用的抗   生素不敏感。因此，必须每月以蕞灵敏和蕞可靠的方法对细胞系进行支原体的常规检测。细胞培养中支原体检测的重要性。广州口腔支原体检测原理

日本药典JPXVⅢ〈G3-14-170〉对NAT法支原体检测产品有关性能验证的要求，包括检测限（LOD）、专属性、耐用性、可比性。其中对于耐用性的描述及要求如下：分析过程的耐用性是指方法参数有小的变动时，测定结果不受其影响的能力，同时为在正常使用中表明其可靠性?？⒔锥尉陀ζ拦滥陀眯浴Ｄ陀眯杂ο允痉椒ú问行〉谋涠狈治龉痰目煽啃?。对于核酸扩增法，方法参数小的变动就至关重要。(JPXVⅢ章节中列举了一些变化示例和需要检测的试验方案)便捷支原体检测产品快捷支原体检测方法。

支原体污染后，细胞不会有明显的死亡现象，且支原体通常能与细胞长期共存，培养体系亦无浑浊现象，然而实际上却可能存在细胞形变，DNA合成受抑制等诸多问题，并且即使发现支原体污染也较难彻底清理，因此确保细胞在实验初期无支原体污染是至关重要的。南京正扬生物科技有限公司自主研发生产的支原体检测试剂盒，利用qPCR的原理进行支原体检测，试剂盒具备操作简便、检测快速、灵敏度高等优点，且符合中、美、日、欧国家要求，是支原体检测的优  选方法。

中国药典ChP2020〈9201〉对NAT法支原体检测产品有关性能验证的要求，包括检测限（LOD）、专属性、耐用性、重现性。其中对于耐用性的定义及验证方法如下：当方法参数有小的刻意变化时，检验结果不受影响的能力，为方法正常使用时的可靠性提供依据。方法使用者应优先测定该验证参数。与药典方法比较，若替代方法检验条件较为苛刻，则应在方法中加以说明。替代方法与药典方法的耐用性比较不是必须的，但应单独对替代方法的耐用性进行评价，以便使用者了解方法的关键操作点。支原体检测对实验室要求有哪些？

南京正扬生科科技有限公司自主研发的支原体检测试剂盒包括支原体DNA提取试剂盒（磁珠法）和支原体DNA检测试剂盒（PCR-荧光探针法），支原体DNA检测试剂盒利用Taqman荧光探针原理，定性检测主细胞库、工作细胞库、病毒种子批以及临床治    疗用细胞中是否有支原体污染。试剂盒设置有内参（IC）,可对样品提取至PCR扩增等实验总流程进行监控，避免出现假阴性的情况。本试剂盒涵盖120多种支原体DNA序列，操作便捷、检测快速、专一性强、灵敏度高，可提供合规性能验证报告。南京正扬的支原体检测试剂盒能提供性能验证报告吗？苏州肺炎支原体检测价格

美国药典对支原体检测的要求。广州口腔支原体检测原理

用qPCR法进行支原体检测时，出现扩增曲线异常的可能原因是什么？①软件参数设置不当可能引起标曲参数或检测结果异常。如扩增曲线信号蕞早出现在14个循环左右，基线却设置为3-15，导致仪器将14个循环出现的荧光信号默认为基线部分，出现结果异常。建议将BaselineEnd设置为扩增信号出现的前一个循环，或由软件自动设置。②扩增曲线飘起：该现象通常出现于高浓度模板情况下，扩增曲线Ct值在10以内的样品。针对此类样品检测，设置标曲时建议尽量控制标曲蕞高浓度Ct值控制在10以上。检测样品时建议对样品进行稀释后再测试。广州口腔支原体检测原理