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来源: 发布时间:2024-08-12

HCD利用人胎儿胰腺组织中的靶向Zhong Liu发生开发了永生化人β细胞系,其中使用慢病毒载体整合了两个转基因,SV40大T抗原(SV40-LT)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)两种转基因均在β细胞特异性大鼠胰岛素启动子(RIP)的控制下表达。***代细胞,名为EndoC-βH1,以组成型方式表达SV40LT和hTERT,而在第二代EndoC-βH2和EndoC-βH3中,这些转基因可在loxP介导的CRE重组后被切除,位点位于慢病毒骨架的3'LTR。EndoC-βH5细胞是通过使用表达可切除的SV40LT和hTERT的慢病毒载体对人胎儿胰腺进行靶向Zhong Liu发生而获得的。糖尿病细胞模型真实模拟胰岛B细胞分泌,且分泌性强。大型药企糖尿病细胞模型官方代理

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HumanCellDesign在人源胰岛β细胞模型的研发中不断突破,致力于提供更高效、更可靠的细胞工具。通过多年的研究和实验,HCD的科学家们成功地开发出了一系列高质量的细胞模型,这些模型在糖尿病研究中表现出优异的功能性和稳定性。这些细胞不仅能够模拟天然胰岛β细胞的胰岛素分泌功能,还能够在实验室环境中稳定生长和繁殖,为研究人员提供了宝贵的研究资源。HumanCellDesign的人源胰岛β细胞模型如EndoC-BH5、EndoC-BH3等,在糖尿病研究领域具有重要应用价值。这些细胞模型不仅能够在高葡萄糖环境下表现出良好的胰岛素分泌反应,还能够响应各种胰岛素刺激剂,模拟人体胰岛细胞的生理状态。这些细胞模型已经在全球多个实验室和研究机构中被使用,为糖尿病基础研究和新药开发提供了有力支持。人胎儿胰腺组织糖尿病细胞模型提供配套培养基如何购买糖尿病细胞模型?

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Humancelldesign(HCD)开发了一种用于在人类胎儿组织中使用靶向Zhong Liu产生功能的人类β细胞系。在胰岛素启动子的控制下,用表达SV40LT的慢病毒载体转导人类胎儿胰腺芽。然后将转导的芽移植到SCID小鼠体内,使其发育成成熟的胰腺组织。分化后,新形成的表达sv40lt的β细胞增殖并形成胰岛素瘤。然后用人端粒酶逆转录酶(hTERT)转导β细胞,移植到其他SCID小鼠体内,在体外扩增生成细胞系。其中一种细胞系,EndoC-βH1,表达了许多β细胞特异性标记,而没有任何其他胰腺细胞类型标记的实质性表达。在葡萄糖或其他胰岛素分泌剂的刺激下,细胞分泌胰岛素,细胞移植逆转了化学诱导的小鼠糖尿病。

EndoC-βH5GLTx、EndoC-βH5HLA-A2、EndoC-βH5等细胞可在体外在葡萄糖剂量刺激下产生正常的胰岛素分泌反应,对GLP-1R/GLP-1等胰岛素刺激因子产生正常响应,可以响应细胞因子刺激,表达HLA-A2等T细胞受体,因此可用于糖尿病炎症相关等多种药物开发实验。EndoC-BH5细胞可批量稳定生产,因此可以进行基于siRNA的高通量筛选研究中,用于鉴定出潜在的2型糖尿病药物靶点。Human cell design 构建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰岛B细胞模型。通过多轮次优化改良,获得的功能胰腺B细胞,无限接近天然人源胰岛B细胞,其胰岛素分泌功能与天然细胞类似,基于PDX1/NKX6.1关键基因验证的细胞均一性达到90%以上(左图),在2.8 mM and 11 mM葡萄糖剂量下表现出10倍的胰岛素分泌反应(右图),对GLP-1R激动剂, Exendin4刺激产生明细那反馈, 且可实现批量化生成,实现稳定供应。糖尿病细胞模型EndoC-BH5 细胞表现出动态胰岛素分泌以及对肠促胰岛素的强烈且剂量依赖性反应。

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EndoC-βH1细胞移植到小鼠体内可以逆转化学诱导的糖尿病,EndoC-βH1细胞每百万细胞含有0.48μg胰岛素,至少80代稳定表达许多特异性β细胞标记物,没有任何其他胰腺细胞类型标记物的大量表达。EndoC-βH1有潜力成为深入研究人类β细胞和药物筛选的独特工具,同时也是测试糖尿病替代细胞疗法的有用临床前模型。糖尿病细胞模型,EndoC-βH1、EndoC-βH3、EndoC-βH5等细胞dai biao了大规模药物发现的独特工具,为糖尿病细胞替代疗法提供了临床前模型,当细胞类型特异性启动子可用时,该技术可推广到产生其他人类细胞系。GLP1R 和 GIPR 介导的信号增强葡萄糖刺激 EndoC-BH5 细胞的胰岛素分泌。人源细胞模型开发糖尿病细胞模型传代

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EndoC-βH5细胞是一种新型人类胰腺β细胞解决方案,可用于开发人类糖尿病模型以及药物筛选和验证平台,产生流程为:DNA构建,慢病毒载体产生,人胎儿胰腺外植体与pTRIPDU3loxP-pY-TK-RIP405-SV40-LT和pTRIPDU3loxPpY-TK-RIP405-hTERT慢病毒载体共转导,移植到SCID小鼠的肾囊下,导致八个月后形成胰岛素瘤,从而获得EndoC-βH5。EndoC-βH1和增殖的EndoC-βH5细胞分别在Opti-β1和Ulti-b1培养基中的βCoat涂层塑料板上培养。使用胰蛋白酶(0.05%)每7天繁殖一次细胞。流式细胞术分析表明所有EndoC-βH5细胞均呈胰岛素阳性,并且在绝大多数细胞中检测到PDX1和NK6.1表达(分别为92.3%和90%)。EndoC-βH5细胞在涂层塑料上形成小的贴壁簇。大型药企糖尿病细胞模型官方代理

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