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动物用PCR猪病诊断

来源: 发布时间:2024-07-01

大多数宠物医院运用的诊断方法为:PCR和试纸条。其区别是:试纸条原理是基于抗体抗原的免疫学方法,通过颜色或荧光标记来判读,和PCR检测是基于不同方法学的检测方式。PCR通过检测样本中有无病毒DNA(RNA)来确诊,灵敏度高、特异性强、支持检测项目多,是人医医学界公认的诊断金标准,两者区别可以理解为滴血认亲(免疫学方法)与亲子鉴定(分子诊断)的区别。目前专业的的宠物疾病机构就是使用PCR检测。巧亦捷核酸检测一体机采用国际**的薄膜微流控技术,实现了从核酸提取、PCR扩增、荧光检测全流程自动化芯片内完成,可以实现专业实验室级别的核酸检测,且检测时间短,全程无需专业技术人员参与,可实现基于病症的多项目联检,更适合宠物医院、兽医站、养殖场等现场快检应用场景。微流控PCR技术是一种通过将PCR反应微型化来实现PCR反应的高通量、低成本和快速的方法。动物用PCR猪病诊断

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巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于:在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针(探针本身具有荧光标记),该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合,与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有:TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等,其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构:长度与普通PCR引物类似,大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团,5’的荧光基团称为报告基团(Report),3’的荧光基团称为淬灭基团(Quencher)。TaqMan探针的性能:在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团,由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近,因此报告基团能够通过FRET(FluorescenceResonanceEnergyTransfer)将接受的能量转移到淬灭基团,使后者以发射荧光或热量的方式释放能量,而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。苏州核酸PCR仪器生产企业巧亦捷利用了先进的薄膜微流控技术和qPCR核酸检测技术。

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传统PCR检测系统常见的痛点:“一是“繁”,即操作繁琐,需要手动进行核损提取、纯化;二是“专”,即需要专业操作人员和**的操作台,耗费人力、物力;三是“污”,即因PCR系统灵敏性和特异性高,人员操作,容易污染,导致结果不准。四是“半”,即市面上几乎所有的PCR仪都是半自动。”于是瞄准这一痛点,巧亦捷快速核酸检测一体机正式面世。相较于传统PCR检测系统,我们拥有三大特色:一是全自动:自动完成繁琐的核酸提取+PCR扩增,全自动核酸提取,手工操作时间少于1分钟,至少节省一个专业操作人员。二是全封闭:避免人为干扰,消除人和实验室的污染,降低对实验室环境的高要求。三是可检测:猫疱疹病毒、猫杯状病毒、猫冠状病毒、猫瘟热病毒、犬瘟热病毒、犬细小病毒等多种病原体。

PCR(PolymeraseChainReaction)是一种复制核酸片段并提高DNA产量的技术,即所谓的聚合酶链式反应,这种技术可以在数小时内大量复制特定的基因片段。由于其高敏感性和高特异性的特点,PCR技术被应用在宠物疾病分子的诊断上,将从疑似患病宠物(血液、眼鼻分泌物、粪便,尿液或腹水)中采样的极微量病原(细菌、病毒或寄生虫)特定核酸片段样本,透过PCR的方式大量被复制,再以核酸电泳的方式判读结果,从而获得早期、快速、稳定和准确的诊断结果.许多宠物医生表示自己在工作中已经离不开PCR仪的帮助了。

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样本处理、核酸提取、PCR扩增和数据处理是PCR的四个步骤。其中核酸提取可以帮助研究人员准确地快速地分离细胞或分子材料中的有效核酸,并获得足够的样本为后续实验提供依据。无论是病毒、细菌还是体细胞,遗传物质都不是裸露在细胞外,都是在细胞内。需要有一个核酸提取试剂将遗传物质释放到外界,保证PCR反应效率。将核酸释放出来后,提取与纯化过程中同样需要将样本中的一些PCR抑制物去除掉,获得纯度比较高的核酸,比较大限度的保证PCR反应中抑制物的浓度降低,提高核酸检测的准确性。因此核酸提取与纯化这一步,也是保证PCR反应结果的关键一步。巧亦捷核酸检测一体机采用磁珠法提取,效率高且可确保结果更准确。巧亦捷核算检测一体机从样本处理开始,所有检测项目可在30-60分钟完成,自动生成报告,检测效率极大提高。江苏分子检测PCR试剂

巧亦捷全自动核酸一体机无需专业检测人员,仪器上样简便,软件操作易于掌握。动物用PCR猪病诊断

PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。动物用PCR猪病诊断

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