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江苏分子检测PCR荧光探针法

来源: 发布时间:2024-05-28

PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。传染性疾病在宠物中比较常见,由多种病原体如寄生虫,细菌,病毒等引起,且多具有传染性,死亡率也较高。江苏分子检测PCR荧光探针法

目前市面上有很多PCR仪器,一时间让兽医师无从选择,但大多数都是PCR扩增仪,即需要人工进行核酸提取和纯化。他们都有以下痛点:1、核酸提取和纯化的操作麻烦并且需要专业的技术人员和场地,有些还需要配置高速离心机,人工核酸提取需要30~40分钟并容易导致污染。2、人工反复开盖加入或倒出试剂,容易导致人为和气溶胶污染,导致结果不准确。因此针对宠物医院来说,需要一台集核酸提取、纯化和扩增为一体的全自动核酸检测仪。能更好的控制人工成本及试剂成本。巧亦捷PCR扩增巧亦捷采用的薄膜微流控技术与核酸检测技术相结合,特别适用于基因表达和病原体检测等领域。

在宠物医疗中,目前病毒检测主要包括胶体金检测(试纸)和PCR检测。两者的区别:胶体金是针对病毒蛋白质的检测,PCR检测是针对病毒核酸的检测。病毒蛋白质和病毒核酸对于病毒来说都是独特的,因此它们都可以确定病毒的身份。但目前医学上无法进行病毒蛋白质的扩增,因此当样本中病毒量少的情况下,就有可能无法找到病毒;而PCR病毒核酸检测的关键就在于可以将核酸进行不断地复制和扩增,所以PCR检测的灵敏度就更高,更容易在样本病毒量相对少的情况下更早地确认病毒。假设一个样本病毒量在10万以上,胶体金技术和PCR技术可以同时检测确诊阳性;但如果样本病毒量低于10万,则只能依靠PCR技术。

传统PCR检测系统常见的痛点:“一是“繁”,即操作繁琐,需要手动进行核损提取、纯化;二是“专”,即需要专业操作人员和**的操作台,耗费人力、物力;三是“污”,即因PCR系统灵敏性和特异性高,人员操作,容易污染,导致结果不准。四是“半”,即市面上几乎所有的PCR仪都是半自动。”于是瞄准这一痛点,巧亦捷快速核酸检测一体机正式面世。相较于传统PCR检测系统,我们拥有三大特色:一是全自动:自动完成繁琐的核酸提取+PCR扩增,全自动核酸提取,手工操作时间少于1分钟,至少节省一个专业操作人员。二是全封闭:避免人为干扰,消除人和实验室的污染,降低对实验室环境的高要求。三是可检测:猫疱疹病毒、猫杯状病毒、猫冠状病毒、猫瘟热病毒、犬瘟热病毒、犬细小病毒等多种病原体。巧亦捷是翊新诊断全力打造的、服务于动物体外诊断的产品品牌。

PCR(PolymeraseChainReaction)是一种复制核酸片段并提高DNA产量的技术,即所谓的聚合酶链式反应,这种技术可以在数小时内大量复制特定的基因片段。由于其高敏感性和高特异性的特点,PCR技术被应用在宠物疾病分子的诊断上,将从疑似患病宠物(血液、眼鼻分泌物、粪便,尿液或腹水)中采样的极微量病原(细菌、病毒或寄生虫)特定核酸片段样本,透过PCR的方式大量被复制,再以核酸电泳的方式判读结果,从而获得早期、快速、稳定和准确的诊断结果.在准确的前提下,高效显得尤为重要。江苏分子检测PCR荧光探针法

巧亦捷核酸检测一体机操作非常简单,只需要放入样本就可以了,不需要手工进行核酸提取,也避免了样本污染。江苏分子检测PCR荧光探针法

巧亦捷全自动薄膜微流控核酸检测仪器拥有多种重技术,保障结果准确:其采用Taqman荧光探针和经典PCR扩增技术,能够将生物标志物精确定量,同时输出Ct值和扩增曲线,结果判读简洁明了;质控更全1面,结果更可靠,设备体积小巧,便于搬运和携带,可在多种场景下随心使用,且薄膜微流控芯片为封闭系统操作,可很大程度避免人为和环境的污染,降低对检测环境的要求,以及对检测人员的要求。更适合宠物医院、兽医站、养殖场等多种使用场景。江苏分子检测PCR荧光探针法

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