经过多年的科研，PCR技术应用于动物疫病的检测和诊断中，具有特异性高和便于操作等特点，得到了宽泛的临床应用。该技术能够在比较短的时间内使基因进行快速的扩增，从而使微量的基因检测在临床中得到应用实践。在PCR技术实际应用的过程中，其优点主要包括以下几方面。首先，操作性较强，技术能够简单的应用于实际的工作中。其次，高效的扩增结果，能够实现成果的转化。***，特异性较高，技术性较强。现阶段，该技术能够在很短的时间内实现快速扩张的形势使微量基因得到快速的检测。巧亦捷全自动核酸一体机无需专业检测人员，仪器上样简便，软件操作易于掌握。动物疾病PCR扩增

巧亦捷（ingeNova）是翊新诊断技术（苏州）有限公司旗下专注于动物体外诊断检测的产品品牌，以翊新诊断全资子公司——苏州翊创生物科技有限公司为主体。巧亦捷系列产品覆盖了猫呼吸道疫病检测、猫消化道疫病检测、犬消化道疫病检测、寄生虫等宠物核酸检测，非洲猪瘟、蓝耳等猪病核酸检测，牛逼支、牛腹泻等牛羊类食品动物的核酸检测，人畜共患病核酸检测，以及鱼虾等水生动物的核酸检测。全自动薄膜微流控核酸检测一体机是巧亦捷系列产品的主打检测平台，巧亦捷基于此平台技术致力于为客户提供快速、精确的动物疫病诊断整体解决方案。翊新诊断技术（苏州）有限公司由微流控技术领域国际**周朋博士创立。公司依托先进的薄膜微流控技术开发一体化、智能化的快速、便捷的POCT体外分子诊断解决方案。针对动物疫病的早期诊断，公司以市场需求为出发点，开发出了低成本、无污染、能够实现真正意义上“全自动，全封闭，样本进，结果出”的薄膜微流控芯片技术和可以用于动物疫病现场快速诊断的分子检测系统，从而为动物疫病的现场诊断提供更加便利的检测手段。目前已开发非洲猪瘟检测、宠物呼吸道多联检测、宠物消化道多联检测等多种试剂及检测方案。江苏便携式PCR分析仪巧亦捷采用的薄膜微流控技术与核酸检测技术相结合，特别适用于基因表达和病原体检测等领域。

巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于：在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针（探针本身具有荧光标记），该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合，与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有：TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等，其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构：长度与普通PCR引物类似，大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团，5’的荧光基团称为报告基团（Report），3’的荧光基团称为淬灭基团（Quencher）。TaqMan探针的性能：在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团，由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近，因此报告基团能够通过FRET（FluorescenceResonanceEnergyTransfer）将接受的能量转移到淬灭基团，使后者以发射荧光或热量的方式释放能量，而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。

现如今，大多数宠物医院还是使用胶体金方法对宠物疾病病原体进行检测，而此种检测方法准确性低，灵敏度不高，通常出现检测结果不准确而导致宠物误诊。如果是误诊，宠物则无法得到很好的诊疗，甚至会死亡。巧亦捷在宠物病原体核酸检测试剂系列中应用了PCR-荧光探针法，在PCR反应体系中加入特异的荧光探针，在实验条件下对宠物病原体特异性基因片段进行扩增，根据荧光强度的变化进行检测，并针对各种样品进行了反应体系的优化，灵敏度可达1000个拷贝，具防污染功能，特别适合在宠物医院使用。本产品操作简便，简单培训即可掌握操作方法。巧亦捷全自动核酸检测一体已实现覆盖猫、犬肠道类、呼吸道类、血液类、人畜共患类等多种病原体的诊断。

样本处理、核酸提取、PCR扩增和数据处理是PCR的四个步骤。其中核酸提取可以帮助研究人员准确地快速地分离细胞或分子材料中的有效核酸，并获得足够的样本为后续实验提供依据。无论是病毒、细菌还是体细胞，遗传物质都不是裸露在细胞外，都是在细胞内。需要有一个核酸提取试剂将遗传物质释放到外界，保证PCR反应效率。将核酸释放出来后，提取与纯化过程中同样需要将样本中的一些PCR抑制物去除掉，获得纯度比较高的核酸，比较大限度的保证PCR反应中抑制物的浓度降低，提高核酸检测的准确性。因此核酸提取与纯化这一步，也是保证PCR反应结果的关键一步。巧亦捷核酸检测一体机采用磁珠法提取，效率高且可确保结果更准确。传染病是由某些具有致病性的微生物，如细菌、病毒等引起的，能够在某种动物或多种动物之间传播的一些疾病。动物疾病PCR扩增

巧亦捷核酸检测解决方案包括全自动便携式核酸检测一体机、免核酸提取检测试剂盒。动物疾病PCR扩增

PCR的工作原理：在TaqDNA聚合酶（热稳定DNA聚合酶）的作用下，由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应，三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内，以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物，第一步，模板DNA变性，以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物，目的基因作为模板，在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性，使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步，模板DNA与引物退火（复性），模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃，引物与模板DNA单链互补配对。第三步，引物的延伸，DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下，70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环，2-4分钟即可完成一个循环，2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍，从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制，因此PCR反应具有高度特异性。动物疾病PCR扩增