PCR(PolymeraseChainReaction)是一种复制核酸片段并提高DNA产量的技术,即所谓的聚合酶链式反应,这种技术可以在数小时内大量复制特定的基因片段。由于其高敏感性和高特异性的特点,PCR技术被应用在宠物疾病分子的诊断上,将从疑似患病宠物(血液、眼鼻分泌物、粪便,尿液或腹水)中采样的极微量病原(细菌、病毒或寄生虫)特定核酸片段样本,透过PCR的方式大量被复制,再以核酸电泳的方式判读结果,从而获得早期、快速、稳定和准确的诊断结果.微流控PCR技术是一种通过将PCR反应微型化来实现PCR反应的高通量、低成本和快速的方法。江苏动物检疫PCR检测方法
巧亦捷全自动薄膜微流控核酸检测仪器拥有多种重技术,保障结果准确:其采用Taqman荧光探针和经典PCR扩增技术,能够将生物标志物精确定量,同时输出Ct值和扩增曲线,结果判读简洁明了;质控更全1面,结果更可靠,设备体积小巧,便于搬运和携带,可在多种场景下随心使用,且薄膜微流控芯片为封闭系统操作,可很大程度避免人为和环境的污染,降低对检测环境的要求,以及对检测人员的要求。更适合宠物医院、兽医站、养殖场等多种使用场景。动物PCR扩增巧亦捷全自动核酸检测一体已实现覆盖猫、犬肠道类、呼吸道类、血液类、人畜共患类等多种病原体的诊断。
PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。
当犬猫的一些疾病处于潜伏期时,该阶段动物体内的病原体含量过低。而目前市场上的一些检测工具主要检测宠物体内是否产生对抗某种病原的抗体,虽然快速,但在初期传染时,宠物免疫系统尚未产生抗体,所以检测出现伪阴性,进而延误诊疗。巧亦捷薄膜微流控快速核酸一体机则可以很好的解决这一问题,即便处于疾病潜伏期,巧亦捷核酸一体机也可以得到准确的检测结果,做到早期诊断,实现及时诊疗,减少患病动物痛苦,获得更好的疗效。预后评估,监控诊疗效果。传染性疾病在宠物中比较常见,由多种病原体如寄生虫,细菌,病毒等引起,且多具有传染性,死亡率也较高。
使用平常的抗原试纸做动物诊断常会出现误诊的情况,如用抗原试纸条对刚买的小狗带到做检测,犬瘟试纸条检测是阴性,但回家养几天后小狗开始出现打喷嚏、咳嗽等症状,此时再去做检查,犬瘟检测则变成阳性,这种情况在宠物临床上并不少见。很有可能这只小狗在第、一次检查的时候已经传染并且向外排毒了,但是由于抗原滴度低排毒量比较小,试纸条检测不出来,错失了及早诊疗的机会。另一方面,抗体检测试纸并不能及时准确知道机体是否传染这个病原,就比如现在常见的猫咪弓形虫检测,只有猫咪接触病原一段时间后,才能产生足量的抗体,抗体试纸才出现阳性结果。当这些情况发生,结果都是令人很难过的。因为这不仅*意味着后期要花更多的Money用于诊疗,还会出现诊疗困难,毛孩子们受罪,甚至会出现我们都不愿意接受的死亡。所以我们更建议使用PCR技术进行临床诊断。巧亦捷核酸检测一体机可以为宠物PCR检测提供严谨的准确结果,为检测人员提供信心保证。江苏PCR扩增
传统的免疫学检测(如:荧光和胶体金)存在灵敏性和特异性的局限性。江苏动物检疫PCR检测方法
巧亦捷推出的全自动薄膜微流控快速核酸检测一体机采用PCR荧光探针技术、通过大量临床病例验证,准确率高达99%,可以针对犬猫等宠物、畜禽动物、水产养殖动物等常见的传染病进行快速、准确的核酸检测,具有检测速度快、灵敏度高、特异性强的特点,可以在动物患病早期未表现出明显症状时及时进行准确判断,有效杜绝漏检、误诊的风险,帮助兽医师们对动物疾病诊断实现早发现、早诊断、早诊疗、早康复,以减轻它们的痛苦,尽早恢复健康。江苏动物检疫PCR检测方法
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