外泌体的提取主要包括以下几种方式。一是免疫磁珠法，这种方法可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操作简单、不需要昂贵的仪器设备，但是非中性pH和非生理性盐浓度会影响外泌体生物活性，不便进行下一步的实验。二是PS亲和法，该方法将PS（磷脂酰丝氨酸）与磁珠结合，利用亲和原理捕获外泌体囊泡外的PS。该方法与免疫磁珠法相似，获得的外泌体形态完整，纯度较高。由于不使用变性剂，不影响外泌体的生物活性，外泌体可用于细胞共培养和体内注射。2016.9《ScientificReports》杂志发表了该方法较新数据，表明PS法可提取相当高纯度的外泌体。外泌体分离是外泌体研究中的重要步骤。西安细胞外泌体费用

外泌体的表征分析：动态光散射：使用Anton-PaarLightsizer500粒子分析仪测定外泌体制剂中的粒度分布。动态光散射测量由于溶液中粒子的布朗运动引起的散射光强度的动态波动，（685nm的激光，检测角度为15、90、175度）；较小的粒子比较大的粒子移动得更快。确定颗粒大小时，通常使用三种分布类型：(1)数量分布，报告不同大小“箱”中的颗粒数量；(2)体积分布报告不同尺寸类别的颗粒总体积；(3)强度分布，报告不同大小颗粒散射的光。也可以使用高分辨率纳米粒径分析仪NanocoulterⅠ来分析样品中每种大小的囊泡的实际数量、浓度及粒子动态、Zeta电位等。为了进行分析，将先前储存在-20°C的75μl等分试样的外泌体制剂用925μlPBS稀释（得到1ml）并转移到一次性比色皿中用于DLS测量。重庆外泌体哪家好外泌体可作为一种新型的疙瘩治着策略，例如外泌体特异性LncRNA干扰RNA技术。

分离外泌体的方法之静水过滤透析：它主要有助于将整个EV从高度稀释的溶液中分离出来，而无需超速离心过程。280Musante等人展示了用于从尿液样本中分离EV的HFD方案。在HFD的初始步骤中，用2000×g离心样品以去除细胞，细菌和碎片作为沉淀。然后，将上清液保存在透析膜（1000kPa）中，1000kPa或更小的颗粒相应地以静水压差通过膜。较后，通过离心将外泌体囊泡沉降40,000×g。在HFD分离过程中，外泌体级分在早期阶段恢复，与多步离心相比，这被认为是一个优势。与超速离心相比，HFD也被认为是一种有效的方法。

为了正确使用外泌体作为DDS，我们必须考虑外泌体的成分和它们的形成途径。然后，还应描述外泌体亲和力和细胞摄取的特征。外泌体载体表现出不同的目的和功能，这要归功于外泌体作为基本的转运体本身就具有出色的特性。这可以用于细胞靶向，也可以作为药物的额外增强。迄今为止，ExoCarta在外泌体中发现了大约10,000种蛋白质、3500种mRNA和超过1100种不同的脂质。对于系统审查，出现了许多很棒的数据库，例如Vesiclepedia和ExoCarta，其中描述了外泌体分离程序和来源以及已识别的载体。外泌体可以传递生物分子，例如蛋白质、DNA、mRNA等，影响接收器细胞的表现型和生理活性。

外泌体分离方法之过滤法：超滤膜也可用于外泌体的分离。根据微泡的大小，使用超滤膜过滤的方法可以将外泌体与蛋白质和其他大分子分离。外泌体也可以通过多孔结构捕获它们来分离。常见的过滤膜孔径为0.8m、0.45m或0.22m，可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌体。比如微柱多孔硅纤毛结构一般用于分离40-100nm外泌体。在初始步骤中，去除较大的囊泡。在接下来的步骤中，外泌体会群集中在过滤膜上。隔离步骤相对较短，但该方法需要用PBS缓冲液对硅结构进行预孵育。除标准过滤技术外，切向流过滤在有效分离外泌体方面也有着尝试应用，通过切向流过滤技术去除游离肽和其他小化合物从而分离具有确定大小的外泌体。此外，在体外研究和脂肪组织中，也会采用超滤与SEC的结合的方式来分离外泌体。通过(a)对片上过滤器施加压力或(b)产生电场，迫使外泌体穿过多孔膜，结合错流和电泳分选来完成筛分。部分外泌体分离方法可能存在对外泌体结构和元素的影响。西安细胞外泌体费用

未来可开发更加高效和精确的外泌体分离和检测技术。西安细胞外泌体费用

差速离心法分离外泌体的实验原理：与等密度和梯度离心相反，差速离心从离心管内颗粒的均匀初始分布开始。在开始一轮离心过程中，位于管底部附近的一部分目标小颗粒不可避免地与较大颗粒共同沉淀。这种共沉淀导致较小颗粒的产量降低。然而，选择大颗粒，起初位于管半月板附近，在开始一轮离心过程中可能没有足够的时间到达管底，从而污染较后一个离心步骤产生的小颗粒颗粒。显然，交叉污染的程度取决于不同粒子群的相对沉降速度和离心条件。在被分离的粒子的沉降速度之间存在显着（数量级）差异的情况下，可以有效地优化差速离心协议以获得目标粒子群的高产量和足够纯度。此外，当不同颗粒部分之间的沉降速率只存在微小差异时，优化过程不太成功。在这些情况下，取决于离心条件。西安细胞外泌体费用

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