ProbeOne-StepqRT-PCRKit是一种一步法反转录实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的预混液,主要用于RNA的特异性超高灵敏度定量检测。以下是它的一些主要特点:1.一步法操作:该试剂盒整合了反转录和PCR步骤,简化了操作流程,减少了操作时间,并限度地减少了人为误差和污染风险。2.高灵敏度检测:能够检测低至10个拷贝的目标序列,适合于低丰度RNA的检测。3.多重检测能力:可以在单个反应孔中进行多重检测,不同基因对应不同探针,不同探针对应不同荧光标记,进行多重荧光定量PCR检测。4.高特异性:通过使用TaqMan探针,该试剂盒提供了高特异性的检测,可以区分有单个核苷酸差异的miRNA。5.热启动酶:使用的BeyoFast?TaqDNAPolymerase是一种与抗体结合的热启动酶,有效避免非特异性扩增,提高PCR反应的特异性、灵敏度和定量检测的准确性。6.兼容多种荧光定量PCR仪:提供了LowROX和HighROX,兼容于无需ROX和需要LowROX或HighROX作为校正染料的荧光定量PCR仪。对于重组胶原蛋?的植物表达系统的构建,农杆菌是使?广的转染载体。典 型的?法是使?电穿孔。辽宁九价HPV病毒样颗粒表达服务技术服务研发
在大肠杆菌中表达VLP(病毒样颗粒)时,确保蛋白质的纯度和活性是至关重要的。以下是一些关键步骤和技术:1.选择正确的表达载体:使用能够高效表达目标蛋白的质粒载体,并确保含有适当的启动子和标签(如His标签、GST标签等)以便于后续的纯化和检测。2.优化培养条件:调整培养条件,如温度、pH、诱导剂浓度和培养时间,以化蛋白的可溶性表达和活性。3.细胞裂解:使用温和的裂解方法,如超声波或酶裂解,以保持蛋白的活性并减少非特异性的蛋白质降解。4.亲和层析:利用融合标签(如His标签)进行一步或多步亲和层析,以高效地从细胞裂解物中纯化目标蛋白。5.离子交换层析:通过离子交换层析进一步去除亲和层析中未去除的杂质,提高蛋白的纯度。6.分子排阻层析(SEC):使用SEC来确保产品是均一的蛋白质,去除多聚体和大分子杂质。7.活性检测:通过生物化学或生物物理方法(如ELISA、WB、酶活性测定、圆二色谱CD等)来评估蛋白的活性和构象。8.避免蛋白聚集:在表达和纯化过程中,通过添加稳定剂(如甘油、蔗糖)和使用低温操作来防止蛋白聚集。辽宁九价HPV病毒样颗粒表达服务技术服务研发它不仅适用于常规的琼脂糖凝胶电泳,还可用于基因克隆、PCR产物分析和质粒提取等实验。
50×TBE液体是一种高浓度的缓冲液,主要成分包括Tris(三羟甲基氨基甲烷)、硼酸和EDTA(乙二胺四乙酸)。它广应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于分离和分析DNA片段。TBE缓冲液因其稳定的pH值和良好的导电性,能够为DNA电泳提供理想的条件。50×TBE液体的优势高效分离:TBE缓冲液具有较高的离子强度,适合分离小分子量的DNA片段。它能够在电泳过程中提供稳定的电流,确保DNA片段的清晰分离。兼容性强:50×TBE液体适用于多种类型的琼脂糖凝胶电泳,无论是低浓度还是高浓度的凝胶,都能提供良好的分离效果。此外,它还兼容多种核酸染料,如EB、GoldView等。经济实用:50×TBE液体以高浓度形式提供,使用时只需稀释至工作浓度(1×TBE),减少了储存空间和使用成本。稳定性高:液体形式的TBE在保存和使用过程中更加方便,只需按照说明稀释即可使用,无需额外配制。使用方法使用50×TBE液体时,需按照以下步骤操作:根据实验需求,取适量50×TBE液体。按照1:49的比例加入去离子水,稀释至1×TBE工作液。使用稀释后的1×TBE液体制备琼脂糖凝胶或作为电泳槽的缓冲液。电泳结束后,可通过紫外透射仪或凝胶成像系统观察结果。
除了CRISPR-Cas9技术,还有其他几种基因编辑技术可以用于金黄色葡萄球菌的研究:1.单碱基编辑技术:这是一种新型的基因编辑技术,可以在不切割DNA双链的情况下实现基因的定点突变。季泉江教授课题组与中国科学院北京基因组所韩大力研究员课题组合作,在金黄色葡萄球菌中建立了单碱基编辑技术,通过融合失活的Cas9蛋白(Cas9D10A)和胞嘧啶脱氨酶(APOBEC1),实现了高效单碱基编辑,有助于研究耐药机制和开发新型手段。2.同源重组(HR)修复技术:在某些细菌中,可以通过同源重组机制对CRISPR-Cas9系统产生的双链DNA断裂进行修复,实现基因的精确编辑。例如,在谷氨酸棒杆菌中,利用CRISPR/Cas9技术结合同源重组修复模板,实现了高效的基因缺失和点突变。3.非同源末端连接(NHEJ)相关蛋白共表达:通过共表达Cas9蛋白和NHEJ相关蛋白,如连接酶LigD,可以在链霉菌中实现有效的基因组编辑,这种方法不依赖于同源重组,可以应用于那些同源重组效率较低的细菌。4.CRISPR干扰技术(CRISPRi):利用失活的Cas9蛋白(dCas9)阻断基因的转录,从而抑制特定基因的表达。这种技术可以用于研究基因功能和调控基因表达,已经在多种细菌中得到应用。DL10000 DNA Marker的条带清晰、亮度均匀,即使在高浓度的琼脂糖凝胶中也能保持良好的分离效果。
DL15000 DNA Marker:大片段DNA分析的理想工具DL15000 DNA Marker 是一种即用型的DNA分子量标准,广应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于分析和估算DNA片段的大小。它由7条线状双链DNA片段组成,覆盖从250 bp到15000 bp的范围,能够为大片段DNA的分析提供精确的参考。产品特点组成:DL15000 DNA Marker 包含7条DNA片段,分别为250 bp、1000 bp、2500 bp、5000 bp、7500 bp、10000 bp和15000 bp。即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接上样,无需额外处理。清晰的条带:电泳图像清晰,背景干净,条带亮度均匀。稳定性高:在-20℃下可长期保存,室温下也能稳定保存6个月。使用方法上样量:建议每次取5 μL直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中。如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件:推荐使用1%的琼脂糖凝胶,电压5 V/cm左右,电泳时间35-40分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察。注意事项保存条件:建议低温保存,避免反复冻融。琼脂糖质量:电泳时应尽量选用高质量的琼脂糖,以获得比较好分离效果。电泳缓冲液:及时更换电泳缓冲液并使用新制备的凝胶,以免影响电泳结果。Blood Direct PCR Master Mix 2×的优势在于其能够直接作用于血液样本,无需进行繁琐的DNA提取和纯化步骤。辽宁人源胶原蛋白开发技术服务临床前研究
利?重组DNA技术对?体胶原蛋?编码区基因进?改造;其 次,将胶原蛋?分?的mRNA逆转录成相应的cDNA。辽宁九价HPV病毒样颗粒表达服务技术服务研发
GTBE电泳缓冲液(10×):高效、便捷的DNA电泳缓冲液在分子生物学实验中,电泳是分析DNA片段大小和纯度的常用技术,而缓冲液的选择对电泳效果至关重要。GTBE电泳缓冲液(10×)作为一种高效、便捷的浓缩型缓冲液,为DNA电泳提供了理想的条件,尤其适用于分离小片段DNA。GTBE电泳缓冲液(10×)的主要成分包括甘氨酸、Tris、硼酸和EDTA。这种配方能够提供稳定的pH环境和良好的导电性,确保DNA在电泳过程中均匀迁移。与传统的TAE或TBE缓冲液相比,GTBE缓冲液在分离小片段DNA(小于2000 bp)时表现出更高的分辨率和清晰度。优势与特点高效分离:GTBE缓冲液特别适合分离小片段DNA,能够提供更清晰的电泳条带,尤其在高分辨率电泳中表现出色。浓缩设计:10×的高浓度设计使得GTBE缓冲液在使用时可以根据实验需求灵活稀释,减少浪费,降低实验成本。兼容性强:GTBE缓冲液适用于多种类型的琼脂糖凝胶电泳,兼容常见的核酸染料(如EB或GoldView),满足不同实验需求。稳定性高:该缓冲液在室温下保存,有效期可达12个月,使用方便,无需特殊保存条件。使用方法使用GTBE电泳缓冲液(10×)时,需按照以下步骤操作:稀释缓冲液:根据实验需求,将10×GTBE缓冲液稀释至1×工作液。