Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/μl):高效除PCR污染的关键酶在分子生物学研究中,PCR技术的应用极为广,但PCR产物的交叉污染问题一直是影响实验准确性和可靠性的关键因素之一。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作为一种高效的酶工具,凭借其独特的性能和广的应用,已成为解决这一问题的理想选择。一、产品特点高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能够特异性地催化DNA中尿嘧啶(dU)碱基与脱氧核糖之间的N-糖苷键水解,释放游离尿嘧啶。这种酶对单链和双链DNA均有效,但对RNA或长度不超过6个碱基的DNA寡核苷酸无活性。防止PCR产物污染UDG的主要应用之一是防止PCR产物的交叉污染。通过在PCR反应中使用dUTP替代dTTP,生成含有dU的PCR产物,UDG可以特异性地切割这些含有dU的DNA,从而防止其在后续反应中作为模板被扩增。反应条件兼容性UDG在pH8.0左右表现出活性,且不需要二价阳离子,可在较宽的pH范围内工作。它对高离子强度(>200mM)敏感,因此在使用时需注意反应体系的离子浓度。T4 DNA 聚合酶相对不耐热,在 70℃加热 10 分钟可使 T4 DNA 聚合酶失活,因此在实验操作过程中需要注意温度。Recombinant Human DPPIV/CD26(His Tag)
50× ROX Reference Dye:实时定量PCR中的关键校正试剂50× ROX Reference Dye 是一种用于实时定量PCR(qPCR)的荧光校正染料,广泛应用于ABI、Stratagene等品牌的实时荧光定量PCR仪。其主要作用是校正由于加样误差、孔间差异或仪器光学系统不一致导致的荧光信号偏差,从而提高qPCR实验的准确性和重复性。产品特点高浓度设计:50× ROX Reference Dye 的浓度为25 μM,使用时需根据仪器型号和反应体系进行稀释。适用机型广:适用于多种ABI和Stratagene品牌的qPCR仪器,如ABI 5700、7900HT Fast、StepOne、StepOne Plus等。保存条件:常温运输,-20℃避光保存,避免反复冻融,有效期可达2年。应用场景校正孔间误差:在qPCR实验中,由于加样量、孔位置、试管壁厚度或管盖透光性差异,可能导致荧光信号的偏差。ROX染料通过提供稳定的荧光背景,校正这些差异,提高数据的可靠性。标准化荧光信号:ROX染料可对报告染料(如SYBR Green I或TaqMan探针)的荧光强度进行标准化处理,为多重定量PCR提供稳定的基线。总之,50× ROX Reference Dye 是实时定量PCR实验中不可或缺的校正试剂,能够提高实验数据的准确性和重复性,是分子生物学研究和临床检测中的重要工具。
Pfu DNA聚合酶是一种从嗜热古细菌 Pyrococcus furiosus 中提取的高保真DNA聚合酶,因其准确性和热稳定性而被广应用于分子生物学研究。Pfu DNA聚合酶具有5'-3' DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性,这种独特的校正功能使其能够在DNA合成过程中纠正错误掺入的碱基,从而提高扩增的保真性。与Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的错误率更低,其保真性是Taq酶的10倍以上。这种高保真性使其成为需要准确扩增的实验(如基因克隆、突变研究和测序准备)的理想选择。此外,Pfu DNA聚合酶具有出色的热稳定性,能够在95°C的高温下保持活性,适合PCR反应的高温变性步骤。其扩增产物为平末端,适用于平末端克隆,但需注意,Pfu酶扩增的DNA片段不适合常规的T载体克隆。Pfu DNA聚合酶的应用领域广,包括高保真PCR、基因克隆、点突变、全基因合成以及高质量测序样本的准备。它还常与其他酶(如Taq酶)联合使用,以结合高保真性和快速扩增的优点。总之,Pfu DNA聚合酶凭借其高保真性、热稳定性和广的应用场景,已成为分子生物学实验中不可或缺的工具,为科学研究提供了强有力的支持。
SYBR Green qPCR Mix (2×):助力定量PCR实验实时荧光定量PCR(qPCR)作为一种高效、灵敏的分子生物学技术,广泛应用于基因表达分析、病原体检测、基因分型等领域。SYBR Green qPCR Mix (2×) 是一种专为qPCR设计的预混液,凭借其的性能和特点,成为分子生物学研究中的重要工具。产品特点SYBR Green qPCR Mix (2×) 是一种2倍浓缩的预混液,包含qPCR反应所需的所有关键组分,如Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、缓冲液、SYBR Green I染料等。这种预混液的设计简化了实验操作流程,用户只需加入模板和引物即可进行反应。其成分SYBR Green I染料能够特异性结合双链DNA,并在PCR扩增过程中发出荧光信号,荧光强度与DNA扩增产物的量成正比。这种实时监测机制使得qPCR能够精确地定量分析目标基因的初始拷贝数。产品性能SYBR Green qPCR Mix (2×) 具有高灵敏度和特异性,能够检测低拷贝数的DNA模板,适用于多种复杂的样本类型。其优化的反应体系和热启动Taq DNA聚合酶确保了快速、高效的扩增效率,同时减少了非特异性产物的生成。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍浓度设计进一步简化了实验操作。
Multiplex Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus):多重检测的高效防污染解决方案Multiplex Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus) 是一种为多重实时荧光定量PCR(qPCR)设计的2×预混液,适用于基于TaqMan等探针法的多重检测。该试剂盒结合了优化的反应缓冲液、热启动Taq DNA聚合酶、dUTP/UDG防污染系统,能够在单个反应孔中同时检测多个靶基因。产品特点多重检测能力:可在单个反应孔中实现多达四重的荧光定量PCR反应。防污染设计:含有UDG酶和dUTP,可有效降解含尿嘧啶的PCR产物,防止气溶胶污染。高灵敏度与特异性:采用抗体修饰的热启动Taq DNA聚合酶,结合优化的反应缓冲液,提高检测灵敏度和特异性。快速反应:支持快速qPCR程序,可在短时间内完成检测。通用性强:适用于多种qPCR仪器,包括ABI、Bio-Rad、Roche等。应用场景多重基因检测:适用于同时检测多个基因的表达水平或病原体的多重检测。基因分型与SNP分析:可用于高特异性的基因分型和单核苷酸多态性(SNP)检测。低丰度基因检测:适用于低丰度基因的高灵敏度检测。Multiplex Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus) 是一种高效、特异且防污染的qPCR试剂,特别适用于多重检测和低丰度基因的高灵敏度检测。Taq PCR Master Mix (2×) (With Dye) 以其高效、便捷和直观的特点,成为了分子生物学实验室中不可或缺的工具。Recombinant Cynomolgus CD43 Protein,His Tag
实验人员无需额外添加染料或进行复杂的后处理,即可直接在PCR仪上观察扩增曲线,从而实现准确的定量分析。Recombinant Human DPPIV/CD26(His Tag)
Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium) 是一种来源于嗜冷海洋细菌的热敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG)。该酶能够特异性地催化水解含有尿嘧啶的DNA链中的尿嘧啶碱基,释放游离尿嘧啶,并在DNA中产生无碱基位点(AP位点),从而防止PCR产物的气溶胶污染。产品特点与传统UDG酶相比,热敏UDG酶在室温下即可高效发挥作用,且对温度极为敏感,可在50℃下10分钟内完全失活。这种特性使其在PCR和RT-PCR反应中表现出色,尤其适用于需要快速灭活的场景。此外,该酶对单链和双链DNA均具有活性,但对RNA或不含尿嘧啶的DNA无作用。其高纯度和低残留特性使其在高投入量下也不会对检测体系产生抑制。应用场景去除PCR产物污染:通过降解含尿嘧啶的PCR产物,防止气溶胶污染导致的假阳性。RT-qPCR防污染:在RT-qPCR反应中,热敏UDG酶可在逆转录前去除残留的PCR产物。单链或双链DNA处理:用于去除DNA中的尿嘧啶碱基。在使用过程中,建议将酶液存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后立即放回-20℃保存。此外,热敏UDG酶在RT-qPCR反应中表现出良好的兼容性,即使在高投入量下也不会对反应产生抑制。Recombinant Human DPPIV/CD26(His Tag)