分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。
分光光度计的结构:
各种型号的分光光度计基本结构都相同,由如下五种部分组成:
1)光源(钨灯、卤钨灯,氢弧灯,氘灯、氙灯或激光光源);
2)单色器(滤光片、棱镜、光栅、全息栅);
3)样品吸收池;
4)检测系统(光电池、光电管、光电倍增管);
5)信号指示系统(检流计、微安表、数字电压表、示波器、微处理机显像管)。
光源-单色器-样品吸收池-检测系统-信号指示系统。
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蛋白质在280nm波长处有较大吸光值。山东超微量超微量分光光度计探针检测
超微量分光光度计不仅涵盖了可见光分光光度计的功能而且也可以进行紫外分光光度计的应用:
(二)UV-VIS常规可见-紫外检测:
全波长超微量分光光度计可以像普通的紫外-可见分光光度计一样行使功能。如BIO-DL MicroDrop可以显示从185到910nm的光波下样品的吸光值。**多可以同时指定检测40个波长下的吸光值并把数据显示在报告中。
(三)蛋白质的直接定量(UV法):
这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。蛋白质直接定量方法,适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。紫外直接定量法相对于比色法来说,速度快,操作简单;但是容易受到平行物质的干扰,如DNA的干扰;另外敏感度低,要求蛋白的浓度较高。
云南性能稳定超微量分光光度计Micro Drop的基座模式可检测0.5-2μl的样本。
Micro Drop超微量分光光度计产品应用:
1.紫外检测:常规紫外光波长下检测样品吸光值;
2.核酸检测:可检测dsDNA、ssDNA、RNA等不同类型核酸的浓度及其在260nm、280nm处的吸光值;
3.探针检测:检测荧光标记探针的吸光值,可用于去除未能标记探针的样品;
4.蛋白检测:检测普通纯化后蛋白的浓度和280nm处的吸光值,BCA、 Bradford、Lowry、Pierce 660nm 蛋白定量分析;
5.菌液/悬浮细胞浓度检测:可检测菌液OD600值及监测悬浮细胞生长情况;
6.动力学检测:用于酶活力和生长曲线等动力学实验的测定;
7.全波长扫描:185-910nm全波长扫描,显示吸收曲线。
物质的吸收光谱:
如果在光源和棱镜之间放上某种物质的溶液,此时在屏上所显示的光谱已不再是光源的光谱,它出现了几条暗线,即光源发射光谱中某些波长的光因溶液吸收而消失,这种被溶液吸收后的光谱称为该溶液的吸收光谱。
不同物质的吸收光谱是不同的.因此根据吸收光谱,可以鉴别溶液中所含的物质。
当光线通过某种物质的溶液时透过的光的强度减弱,因为有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光被组成此溶液的物质所吸收只有一部分光可透过溶液。
入射光= 反射光 + 分散光 + 吸收光 + 透过光。
如果我们用蒸馏水(或组成此溶液的溶剂)作为"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的损失则:入射光 = 吸收光 十 透过光。
当一束单色光(指路由一种颜色的光)通过一均匀的溶液时,一部分被吸收,一部分透过。
Micro Drop可以检测45-48mm的10mm光程的比色皿。当使用微量,半微量或者超微量的比色皿时,我们建议使用周边不透明的比色皿,不透明的比色皿保证了光穿过样本后全部到达检测器。而透明的比色皿会让那些没有透过样本的光也到达检测器,这样会导致样品(特别是低浓度样品)的检测不准确。
当检测的波长为紫外区域时(<340nm),要使用石英比色皿,这样才能透过紫外光。虽然有一些制造商提供紫外透过的一次性塑料比色皿,但是即使质量比较好的塑料比色皿也不能让低于220nm以下波长的紫外光透过,而大部分玻璃和塑料比色皿是完全紫外非透过性的。
一般单光束的分光光度计都会推荐相配的比色皿,而许多比色皿生产厂家都有严格的质控来保证比色皿的性能而不用在换比色皿时需要校准,这些比色皿都可以用在本产品上。
分光光度计是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器,常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。江西全光谱波长超微量分光光度计探针检测
荧光分光光度计和紫外可见分光光度计是实验室常用的光学仪器。山东超微量超微量分光光度计探针检测
在政策促进下,未来3—5年内,我国将在医药健康短缺地区建设一批高水平临床医治中心、高层次的人才
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