原代肝细胞是药物早期研究的金标准细胞模型。药物通过肝脏代谢后,大多数药物的毒性被消除,但同时也有一些无毒或低毒的物质通过生物转化后转变成有毒甚至毒性更大的物质,因此肝脏便必然成为研究药物毒性的重要target organ。原代肝细胞即为一个较好的筛选模型,尤其是在检测结构相关化合物时,原代肝细胞的角色更为重要。 人原代肝细胞是重要的体外模型。人原代肝细胞在较大程度上保留了细胞在体内organ里的功能,各种物质代谢功能和酶活性与体内的肝细胞极其相似,是较为接近临床的一种标准体外短期培养模型。人原代肝细胞通常从肝或肝组织中获得,一般在肝切除手术中或者肝移植后排斥的肝组织中获取,随后即时进行研究或者冻存待用。 原代肝细胞是肝脏疾病的研究以及相应药物的开发的重要载体。比如一些对于乙肝病毒的研究需要对肝细胞进行体外培养;一些严重肝脏疾病的细胞移植研究也要涉及到对原代肝细胞进行大量扩增。因此,原代肝细胞的体外培养和研究是一直以来科学家们关注的热点。立沃生物原代肝细胞有着严格的体外培养规范和质量监测机制,努力让客户收到的每一管细胞都放心的。江苏鹅原代肝细胞培养基
不同物种的原代肝细胞在贴壁时间上存在差异。以小鼠为例,其原代肝细胞可能在培养基中需1个小时开始贴壁,而其他物种则需要4-6小时左右。这是由于不同物种的细胞形态、生理特性和培养条件等因素的影响。 在进行原代肝细胞培养时,贴壁时间是一个重要的指标。一般来说,原代肝细胞在培养基中贴壁后,细胞的代谢活性和功能会得到提高,因此贴壁时间越短,细胞的生物学活性就越高。但是,如果贴壁时间过短,细胞可能会出现脱落或死亡等情况,因此需要根据具体情况进行调整。 另外,原代肝细胞的贴壁能力也与细胞的新鲜程度有关。新鲜分离的原代肝细胞一般需要4-6小时才能贴壁,而经过冷冻保存的细胞则需要更长的时间。因此,在进行原代肝细胞培养时,需要根据细胞的新鲜程度和贴壁时间进行合理的调整。 需要注意的是,几乎所有物种的原代肝细胞都可以贴壁,但不同物种的细胞在培养条件和培养基配方等方面存在差异。因此,在进行原代肝细胞培养时,需要根据具体物种和实验要求进行合理的选择和调整,以确保细胞的生物学活性和代谢功能得到有效的发挥。江苏鹅原代肝细胞培养基贴壁原代肝细胞主要用于肝脏再生研究、肝脏3D打印、肝脏疾病研究、HBV、HCV病毒研究等。
原代肝细胞的来源供体来源很多。鉴于人原代肝细胞存在数量稀缺和伦理道德等问题,研究人员尝试从动物肝脏中分离原代肝细胞,用来体外培养并进行研究。使用较多的是啮齿动物,还有一些哺乳动物和鱼类。目前常用的供体品系有树鼩、大小鼠、猪、新西兰兔、比格犬、猫、牛、羊、鸡、鸭、鹅、鱼等。 原代肝细胞除了供体品系不同以外,也会根据细胞来源的供体数,分为单供体和多供体。供体数的选择主要取决于实验的研究目的。 原代肝细胞的应用场景也很多。随着技术水平的不断提高,原代培养的动物和人肝细胞已广泛应用于药物研究:①探讨药物在肝中的代谢途径和药物药代动力学的研究;②预测和解释药物与药物之间的相互作用;③研究药物的细胞毒性等。
原代肝细胞有三种常用的分离方法,每种方法都有对应的原理。原代肝细胞是从动物体内分离出来的未经过传代的肝细胞,具有很高的生物学活性和生理功能,是研究肝脏生理和病理的重要材料。目前,分离原代肝细胞的方法有直接剪切法、组织块消化法和两步胶原酶灌流法等。其中,两步胶原酶灌流法是一种比较常用的方法,因为它对肝细胞的损伤作用较小,可以提高肝细胞的产量和活力。 在两步胶原酶灌流法中,首先需要使用螯合剂来螯合肝脏中的铁离子,以避免胶原酶的活性受到抑制。然后,将肝脏灌注胶原酶,使其分解胶原纤维,从而释放出肝细胞。这种方法可以分离出数量多且活力好的肝细胞,适用于各种动物的肝脏,包括小鼠、大鼠、猪等。 直接剪切法是将肝脏切成小块,将手术取得的肝组织切成小块,直接置于简单培养液中即可。这种方法简单易行,但对肝细胞的损伤较大,产量和活力较低。 组织块消化法是将肝脏切成小块,然后用胰酶等消化酶消化,分离出肝细胞。这种方法产量较高,但对肝细胞的损伤也较大。 分离原代肝细胞是肝脏生理和病理研究的重要前提。不同的分离方法各有优缺点,需要根据实际情况选择合适的方法。立沃生物的原代肝细胞是从肝组织上分离下来立即冻存的细胞,属于P0代,拥有肝脏原先的酶水平和理化性质。
细胞外基质(ECM)成分可以让原代肝细胞在培养皿中贴壁效果更好。例如胶原蛋白、基质胶或人纤维链接蛋白,这些成分可以模拟细胞在人体内所处的微环境,从而提升细胞的状态和生长能力。 胶原蛋白是一种重要的细胞外基质成分,它可以提供细胞所需的支撑和结构。在原代肝细胞培养中,加入胶原蛋白可以让原代肝细胞更好地附着在培养皿上,从而促进原代肝细胞的生长和分化。 基质胶是一种含有多种细胞外基质成分的复合物,它可以提供更加复杂和多样化的细胞外环境。在原代肝细胞培养中,加入基质胶可以模拟细胞在人体内所处的复杂环境,从而提高细胞的适应性和生长能力。此外,基质胶还可以促进细胞间的相互作用和信号传递,从而增强原代肝细胞的功能和稳定性。 人纤维链接蛋白是一种重组的细胞外基质成分,它可以提供细胞所需的支撑和结构。 加入细胞外基质成分可以可以模拟细胞在人体内所处的微环境,让原代肝细胞在培养皿中更好地生长和分化,从而提高细胞的状态和稳定性。原代肝细胞是一种重要的体外研究模型,可以为肝脏疾病的研究和攻克提供有力的支持。鹅原代肝细胞贴壁
原代肝细胞拥有肝脏的特性和功能,可用于研究肝脏疾病的细胞信号传导和细胞增殖,是有效的体外实验模型。江苏鹅原代肝细胞培养基
在进行原代肝细胞培养时,是否需要添加血清?在进行原代肝细胞培养时,通常需要添加血清。血清是一种含有多种营养物质和生长因子的液体,可以提供细胞生长所需的营养和生长因子,促进细胞的生长和增殖。血清中含有多种蛋白质、氨基酸、维生素、矿物质等营养物质,可以为细胞提供能量和营养,促进细胞的生长和增殖。此外,血清中还含有多种生长因子,如胰岛素、表皮生长因子等,可以促进肝细胞的分化和增殖。然而,血清中也含有一些杂质和微生物,可能会对细胞的生长和功能产生不利影响。因此,在使用血清时,需要选择高质量的血清,并对血清进行严格的质量控制和检测,以确保血清的质量和安全性。此外,在进行原代肝细胞培养时,也可以使用无血清培养基或低血清培养基。无血清培养基或低血清培养基中不含有或含有较少的血清成分,可以减少血清对细胞的影响,提高细胞的纯度和稳定性。但是,无血清培养基或低血清培养基的成本较高,需要根据实验目的和经济条件来选择。总之,在进行原代肝细胞培养时,通常需要添加血清。在选择血清时,需要选择高质量的血清,并对血清进行严格的质量控制和检测。此外,也可以选择无血清培养基或低血清培养基,以减少血清对细胞的影响。江苏鹅原代肝细胞培养基