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汕头原代肝细胞培养方法

来源: 发布时间:2023-12-06

原代肝细胞的来源供体来源很多。鉴于人原代肝细胞存在数量稀缺和伦理道德等问题,研究人员尝试从动物肝脏中分离原代肝细胞,用来体外培养并进行研究。使用较多的是啮齿动物,还有一些哺乳动物和鱼类。目前常用的供体品系有树鼩、大小鼠、猪、新西兰兔、比格犬、猫、牛、羊、鸡、鸭、鹅、鱼等。 原代肝细胞除了供体品系不同以外,也会根据细胞来源的供体数,分为单供体和多供体。供体数的选择主要取决于实验的研究目的。 原代肝细胞的应用场景也很多。随着技术水平的不断提高,原代培养的动物和人肝细胞已广泛应用于药物研究:①探讨药物在肝中的代谢途径和药物药代动力学的研究;②预测和解释药物与药物之间的相互作用;③研究药物的细胞毒性等。立沃生物的原代肝细胞的分离技术门槛很高,需要特定的实验室条件和技术,严格的实验室管理和质量控制。汕头原代肝细胞培养方法

原代肝细胞是一种来源于肝脏组织的细胞,具有很高的生物学活性和稳定性,是进行肝脏相关研究的重要材料。我们公司的原代肝细胞产品采用较新的培养技术,能够保持细胞的原始性,具有很高的可再生性和稳定性,可以广泛应用于肝脏疾病的研究和药物筛选。我们的原代肝细胞产品采用关键技术的培养方法,能够保证细胞的生长和分化,同时不会影响细胞的稳定性和功能。我们的产品具有以下特点:1.高质量:我们的原代肝细胞产品来源于健康的人体肝脏组织,具有很高的生物学活性和稳定性,可以保证研究结果的准确性和可靠性。2.易于培养:我们的原代肝细胞产品采用较新的培养技术,能够保持细胞的原始性,同时不需要复杂的培养条件,可以方便地进行培养和扩增。3.广泛应用:我们的原代肝细胞产品可以广泛应用于肝脏疾病的研究和药物筛选,例如肝病、肝纤维化、肝炎等疾病的相关研究,以及药物代谢和毒性研究等领域。4.高效:我们的原代肝细胞产品具有很高的可再生性和稳定性,可以进行多次传代和扩增,能够较大提高研究效率和成本效益。总之,我们的原代肝细胞产品是一种高质量、易于培养、广泛应用、高效的研究材料,能够为肝脏相关研究和药物筛选提供有力的支持。广东鱼原代肝细胞图片肝原代细胞执行着许多重要的功能,如毒物的分解、尿素的合成、制造血浆中的的大多数血浆蛋白质等。

贴壁培养的原代肝细胞是酶诱导研究的重要模型。这种模型可以通过倍数变化方法来评估药物是否为酶的诱导剂。具体来说,研究人员可以使用已知的阳性和阴性对照药物来校准体外系统,然后将研究药物与细胞共孵育,测定孵育后CYP酶的mRNA表达水平倍数变化,以评估药物是否为酶的诱导剂。这种方法可以帮助研究人员更好地了解药物相互作用的机制,从而更好地指导临床用药。 酶诱导是一种药物相互作用的现象,指某些化合物能够提高肝脏药物代谢酶的活性,从而导致合用的药物代谢速率加快,使得原药的血药浓度下降,进而使其疗效降低或丧失。这种现象在临床上非常常见,因为许多药物都需要通过肝脏代谢酶来进行代谢,而酶诱导会影响这些代谢酶的活性,从而影响药物的代谢。 酶诱导的机制是通过影响肝脏细胞内的CYP酶的表达和活性来实现的。CYP酶是肝脏细胞内重要的药物代谢酶之一,它能够代谢许多药物和毒物,从而使它们被代谢出体外。当某些化合物进入体内后,它们会与CYP酶结合并使它们的特异性表达,从而使得CYP酶能够更快地代谢药物和毒物,使其被代谢出体外。 原代肝细胞依旧是目前理想的体外模型,是药物代谢研究的重要组成部分。

原代肝细胞可以用于乙肝病毒的对照试验。为探究不同类型肝细胞对乙型肝炎病毒(HBV)的影响,以及不同药物和生物学处理对HBV的影响,可以选择了人原代肝细胞(PHH)树鼩原代肝细胞(PTH)、hNTCP稳定表达猪肝细胞(PPH-hNTCP)和hNTCP稳定表达liver cancer细胞系(Huh7D-hNTCP)作为研究对象。 采用HBV模型,将不同类型肝细胞融合HBV,并进行药物处理和生物学处理。药物处理包括小分子化合物和中药提取物等,生物学处理包括过表达、敲除siRNA和shRNA等。通过对处理后的细胞进行评价,可以了解不同药物和生物学处理对HBV的影响。 这种研究方法的意义在于探究不同类型肝细胞对HBV的影响,为研究HBV的机制提供重要的实验数据。同时,本研究还可以为开发新型抗HBV药物提供参考,为临床克服乙型肝炎提供新的思路和方法。原代肝细胞衍生的Organoid既能提供需要的拥肝毒模型,也能体现肝细胞在应对病原体时的生理反应。

原代肝细胞的融合度是影响其生长和增值能力的重要因素之一。当融合度达到70%以上时,细胞开始进入高度同步状态,细胞之间的相互作用也得到了有效的发挥,从而促进了细胞的生长和增殖。但是,如果融合度低于70%,细胞之间的相互作用就会受到限制,导致细胞的增值能力受到限制,无法达到100%。 此外,细胞之间的距离也是影响细胞生长和增值能力的重要因素之一。当细胞之间的距离刚好是黄金分割点时,细胞开始进入高度同步状态,细胞之间的相互作用也得到了有效的发挥,从而促进了细胞的生长和增殖。但是,如果细胞之间的距离超过了黄金分割点,细胞就无法进入高度同步状态,从而导致细胞的增值能力受到限制。 细胞的培养密度也是影响细胞生长和增值能力的重要因素之一。低密度培养虽然可以保持细胞的功能,但是细胞的增值能力会很快丢失。而高密度培养可以维持细胞的功能一段时间,但是也会导致细胞之间的相互作用受到限制,从而影响细胞的生长和增殖。因此,在进行原代肝细胞的培养时,需要根据实际情况选择适当的培养密度,以保证细胞的生长和增值能力得到正常的发挥。立沃生物的原代肝细胞可提供不同状态的细胞,如贴壁细胞、悬浮细胞等,满足客户基于使用场景的个性化需求。浙江新西兰兔原代肝细胞图片

目前,分离原代肝细胞的方法有直接剪切法、组织块消化法和两步胶原酶灌流法等。汕头原代肝细胞培养方法

贴壁培养是一种常用的细胞培养方法,可以使原代肝细胞在培养皿表面附着生长,形成单层细胞群落。原代肝细胞的贴壁培养需要注意以下几点: 1. 分离和准备细胞:从新鲜的动物肝脏中分离出原代肝细胞后,需要进行细胞计数和质量检测,确保细胞数量和质量符合要求。 2. 培养基的选择:原代肝细胞的培养基需要选择适合其生长和代谢的培养基,常用的培养基包括DMEM、RPMI-1640等。 3. 培养皿的涂层:为了使原代肝细胞能够附着生长,需要在培养皿表面涂层一定浓度的胶原蛋白、明胶或者其他细胞黏附因子。 4. 细胞接种和培养:将准备好的原代肝细胞接种到涂层好的培养皿中,加入适量的培养基,放入恒温培养箱中进行培养。需要注意的是,原代肝细胞的培养时间较短,一般在3-5天左右,因此需要及时更换培养基和进行细胞观察。 原代肝细胞的贴壁培养可以通过在培养皿上加一定的的吸附涂层来达到让原代肝细胞快速贴壁的效果。汕头原代肝细胞培养方法

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