PBS缓冲液是实验室中常用的缓冲液之一,不管是免疫组化实验还是细胞培养实验,都经常会用到PBS缓冲液。以下是我整理的一些PBS缓冲液的配置方法。PBS缓冲液的配制:方法一:含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:1.称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20,加水;2.PBS:PhosphateBufferedSaline;3.PBS1L配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g;4.磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.42g;5.氯化钠(NaCl):8g;6.氯化钾(KCl)0.2g;7.加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,***定容到1L;由于 HBSS 反应性低,常用于大气条件下。上海无酚红平衡盐溶液常用知识
(四)PBS液可配成含0.85%NaCl,pH7.2的PBS(简称pH7.2PBS)。1.PBS贮存液(10×)配法NaCl8.5gKCl0.2gNa2HP04·12H202.85g(或Na2HP04·2H201.13g)KH2P040.27g溶于100ml双蒸水中。2.PBS应用液配法取贮存液50ml加双蒸水450m1即成,经103kPa(121.3℃)15分钟灭菌,置室温或4℃保存备用。除上述三种常用的平衡盐溶液外,尚有其他几种次常用的平衡盐溶液,如低钙镁的Dul-becc。液和无钙镁的D-Hanks液(或CMF-Hanks)等。可用于配制消化液和洗涤细胞(可防止抑制酶活性和致细胞凝聚等)。其成分见表1-5,配制方法可参照上述几种平衡盐溶液的方法进行。
平衡盐溶液是溶液中电解质含量与血浆内含量相仿的盐溶液称为平衡盐溶液。等渗盐水含Na+和Cl-为154mmol/L,而血液内Na+和Cl-含量分别为142mmol/L和103mmol/L,两者相比,等渗盐水的Cl-含量比血液的Cl-含量高50mmol/L,在重度缺水或休克状态下,肾脏血液减少,会影响正常的排氯功能,从静脉内输给大量等渗盐水,有导致血Cl-过高,引起高氯性酸中毒的危险。因此,用等渗盐水***缺水有不足之处,而使用平衡盐溶液可避免输入过多的Cl-,***缺水更符合生理,且能有助于纠正酸中毒。常用的平衡盐溶液有乳酸钠和复方氯化钠溶液(1/6M乳酸钠溶液1/3加复方氯化钠溶液2/3);与碳酸氢钠和等渗盐水溶液(1.25%碳酸氢钠溶液1/3和等渗盐水2/3)两种。磷酸缓冲液,它的缓冲能力怎么理解?
目前**常用的BSS是Hanks液、Earle液和PBS等。(一)BSS的配制要求1.要防止钙的沉淀BSS配制时应将其中的CaCl2单独配制,并将平衡盐溶液配成浓缩液,使其在稀释前不让Ca2+与P042-和C032-接触,以免产生不溶解的CaP04和CaCO3。避开产生CaC03的办法是将NaHC03单独配制,用法时现加。2.要有良好的缓冲作用Hanks液和Earle液都需一定量的C02平衡。因此应将瓶盖(橡皮塞)盖紧,以防瓶中CO2逃逸,致使溶液pH增高。pH调整液单独灭菌时,亦应将瓶盖塞紧,临时不用的可冻存,否则NaHC03受热分解为NaOH和C02,失去其调整pH之功能。(二)Hanks平衡盐溶液(Hanksbalancedsaltsolutions,HBSS)为了便于保存和削减有关成分的化学反应,此液可配成20倍浓缩液(20×),10倍浓缩液(10×)和5倍浓缩液(5×)的储存液(母液)。现以l0×为例,将其配制办法介绍如下:×母液配制法甲液:取450ml三蒸水依次溶解下列试剂NaCl80gKCl4gMgS04·7H202gCaCl2(含2H20者)待彻低溶解后,补足三蒸水至500m1。乙液:取450m1三蒸水依次溶解下列试剂Na2HP04(含12H2O者)KH2P04l0g50ml待彻低溶解后,补足三蒸水至500ml。、等量用三蒸水稀释10倍,即成用法液。用前高压灭菌。例如配制1000m1Hanks用法液。 平衡盐溶液HBSS 由微生物学家 John Hanks 在1940年配制,富含碳酸氢根离子。内蒙古HBSS平衡盐溶液答疑解惑
平衡盐溶液适用于各种细胞培养应用。上海无酚红平衡盐溶液常用知识
平衡盐又称为平衡盐溶液或平衡液。?12平衡盐是一种特殊的溶液,主要用于调节体液电解质和酸碱平衡,特别是在医疗领域中,它被***用于补充血容量、防止低血容量休克以及防止弥漫性血管内凝血(DIC)等扩容***。这种溶液之所以被称为平衡盐,是因为它的电解质成分,如氯离子、钠离子、钾离子等,与血浆非常接近,这使得它在***各种缺水时更符合人体生理。与输注生理盐水相比,使用平衡盐溶液可以避免输入过多的氯离子,从而减少对人体的不良影响。此外,平衡盐还可以指健康平衡盐,这是一种将碘、钾、镁、硒、锌等人体必需的微量元素调和在一起的食盐,综合了加碘盐、低钠盐、加锌盐、加硒盐等特性,旨在提供一种更健康的食盐选择。综上所述,平衡盐不仅在医疗领域有着重要的应用,而且在日常生活中,作为一种健康的食盐选择,也受到了广泛的关注和使用。 上海无酚红平衡盐溶液常用知识