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来源: 发布时间:2023-03-29

酵母文库:细菌鞭毛蛋白是一种重要的细菌毒力因子,可刺激动植物细胞中的分子免疫信号转导。脊椎动物识别鞭毛蛋白和建立有效免疫反应的详细机制已经被揭示;然而,无脊椎动物是否能够识别鞭毛蛋白仍未可知。2022年1月24日,山东大学王显伟团队在PLOSPATHOGENS(IF:6.823)上发表了题为“Shoc2regnizesbacterialflagellinandmediatesantibacterialErk/Statsignalinginaninvertebrate”的研究论文,揭示了MjShoc2可以与鞭毛蛋白FlaA互作,引发一系列炎症反应,促使对虾抵抗细菌***,为无脊椎动物对鞭毛蛋白的感知机制提供了见解。该项目中所用的对虾酵母文库由欧易生物构建。欧易生物结合多年的文库构建经验。江苏实力酵母文库做什么

通过酵母双杂筛选实验,进一步研究AaWRKY9蛋白功能,结果筛选到了与AaWRKY9互作的AaJAZ9蛋白,并通过Y2H、BiFC、CoIP等进行了验证确认。JAZs是JA介导的植物相应中的负向调控因子,在毛状体和老叶中高表达,在芽尖和嫩叶中表达量低。为确认AaJAZ9是否抑制了AaWRKY9在促进青蒿素积累过程中的转录***功能,通过双荧光素酶报告基因检测实验发现,当AaWRKY9与AaJAZ9共表达时,其转录活性被抑制,而使用MeJA处理后,这种抑制作用被抵消,且AaWRKY9转录活性增强,反向验证实验结果一致。说明JA可以通过降解JAZ9,提高AaWRKY9转录活性,促进青蒿素生物合成。北京发展酵母文库报价酵母文库筛选研究多年建库与筛选经验验证。

酵母双杂交实验表明,PtMADS11 与 PtDAL1 之间存在直接的相互作用(图 C),并通过 BiFC、GST pull-down 得以证实(图 D-E)。为进一步研究在年龄信号调控中的作用机制,分别构建了过表达PtDAL1和PtMADS11的拟南芥。与对照相比,过表达PtDAL1***提前了拟南芥的营养-生殖时相转换(图A),证实PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了关键作用。过表达PtMADS11植株在短日照下表现出早开花和花序结构过早终止,表明PtMADS11在开花调节和花序内分生组织命运起到调控作用。在拟南芥中利用年龄调控通路不同节点关键基因突变体进行功能互补实验,结果显示过表达PtDAL1可以恢复由于过表达miR156导致的开花延迟,但ft缺失会导致PtDAL1失活,PtDAL1过表达也不能恢复soc1-1-2突变体的表型,表明PtDAL1依赖或处于FT/SOC1的上游。而过表达PtMADS11可以恢复由过表达miR156或ft缺失导致的开花延迟,表明PtMADS11对开花的调控不依赖于miR156或FT。

酵母双杂交筛选实验:为进一步了解LEA3蛋白在干旱胁迫下调控植物生长和增强抗旱性的分子机制,本研究以干旱胁迫条件下的棉花根茎叶为材料,构建了棉花干旱胁迫酵母文库。并以GhLEA3为诱饵,采用酵母双杂交筛选实验,从棉花酵母文库中筛选获得了GhLEA3互作蛋白,并对互作蛋白进行了GO和KEGG分析,发现其中的互作蛋白GhVDAC1主要参与钙信号通路和cGMP-PKG信号通路,互作蛋白Gh***A参与多种生物途径,如糖原生成和代谢途径。此外,GhVDAC1和Gh***A受干旱胁迫诱导表达***,且在GhLEA3敲除的棉株中表达量低于野生型棉株欧易生物持续为众多植物学方向的研究学者提供持久可靠的科研助力。

酵母单杂交结果显示,磷酸盐饥饿响应因子OsPHR1/2/3可以***51个目标启动子中的25个,包括OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A等。OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A自身又可以调控许多菌根共生相关基因的表达(图A)。对丛枝菌根共生响应基因启动子序列预测分析显示,有78个转录因子被富集,87%的菌根共生响应基因受到OsPHR1/2/3的调控,其中42%受到OsPHR1/2/3的直接调控。因此推测OsPHR1/2/3可能是菌根共生调控网络中的一个关键调控枢纽(图A-B)。EMSA和荧光素酶报告实验证实,OsPHR12可以直接结合并***OsRAM1、OsWRI5A、OsPT11、OsAMT3启动子序列(图C-F),并且这种结合依赖于启动子中的P1BS元件(图G)。酵母结构及功能介绍酵母的应用。黑龙江什么是酵母文库报价

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利用酵母文库进行双杂交筛选,结果显示 MdBT2 可以与 MdRGL3a 结合。MdRGL3a 编码 GA 信号阻遏物 DELLA 蛋白,主要分布于细胞核中。MdRGL3a 对于 GA 处理非常敏感,可以引起其发生降解,PAC 处理可以提高其稳定性。进一步的酵母一对一杂交验证实验表明,两者的结合依赖于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 结构域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif(图 A-B)。并通过 GST pull-down、BiFC 实验也证实了 MdBT2与 MdRGL3a 的结合(图 C-D)。细胞外降解实验显示,与对照相比,MdRGL3a 与过表达 MdBT2 的愈伤组织的总蛋白共同孵育,会导致 MdRGL3a 的降解加快;而与抑制 MdBT2 表达的愈伤组织的总蛋白共同孵育,会导致 MdRGL3a 的降解减缓(图 A)。并且蛋白酶体抑制剂 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解(图 B)。改变 MdRGL3a 表达量并不影响 MdBT2 的降解。以上结果表明,MdRGL3a 可能通过 26S 蛋白酶体途径发生降解,而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。江苏实力酵母文库做什么

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