酵母文库实验:本研究报道了 OsNF-YB9 和 OsNF-YB7 在水稻中呈现亚功能化。OsNF-YB7 主要在胚中表达，而 OsNF-YB9 主要在发育中的胚乳中表达。在拟南芥 lec1-1 中异源表达 OsNF-YB9 或 OsNF-YB7 可以弥补 lec1-1 缺陷。OsNF-YB9 功能缺失导致种子发育异常，种子变长、变窄、变薄，垩白率较高。此外，osnf-yb9 中淀粉合成相关基因的表达紊乱。OsNF-YB9 可以与主要在水稻胚乳中表达的蔗糖合酶蛋白激酶 SPK 相互作用。spk 敲除突变体种子与 osnf-yb9 突变体种子都表现出垩白增加的表型。OsNF-YB9 在水稻和拟南芥中的异位表达导致了种子变小。综上表明，OsNF-YB9 在水稻种子发育中起到关键调控作用。博士期间长期从事酵母单/双杂交文库构建及筛选的工作。四川宣传酵母文库报价

本研究利用水稻转录因子文库筛选，绘制了水稻转录因子和菌根共生相关基因之间的调控网络。该网络受到保守的磷感应途径统一控制，以磷酸盐饥饿响应因子（PHR）为中心。PHRs 是菌根共生所必需的，通过 P1BS 顺式作用元件调控菌根共生相关基因表达。高磷条件下，SPX蛋白抑制 OsPHR2 介导的对菌根共生相关基因表达的调控，进而抑制菌根共生。过表达 OsPHR2 可以部分拮抗磷介导的对菌根共生的抑制作用。本研究发现，植物直接营养吸收和通过菌根共生的间接营养吸收，都受到相同的磷信号网络统一调控。本研究将有助于高效用磷植株的培育。广东生物技术酵母文库欧易生物是国内较早提供酵母杂交技术服务的生物公司，较早掌握Gateway和Smart两种建库方法。

酵母双杂交筛选实验：为进一步了解LEA3蛋白在干旱胁迫下调控植物生长和增强抗旱性的分子机制，本研究以干旱胁迫条件下的棉花根茎叶为材料，构建了棉花干旱胁迫酵母文库。并以GhLEA3为诱饵，采用酵母双杂交筛选实验，从棉花酵母文库中筛选获得了GhLEA3互作蛋白，并对互作蛋白进行了GO和KEGG分析，发现其中的互作蛋白GhVDAC1主要参与钙信号通路和cGMP-PKG信号通路，互作蛋白Gh***A参与多种生物途径，如糖原生成和代谢途径。此外，GhVDAC1和Gh***A受干旱胁迫诱导表达***，且在GhLEA3敲除的棉株中表达量低于野生型棉株

酵母双杂交、pulldown和BiFC实验均显示，MdTRB1可以通过其C末端与JAZ1蛋白互作。在苹果叶片和愈伤组织中过表达MdJAZ1，花青素和原花青素的累积受到明显抑制。在苹果叶片和愈伤组织***表达MdJAZ1/MdJAZ1，结果显示过表达MdJAZ1抑制了MdTRB1对花青素和原花青素累积的促进作用。Pull down 实验和荧光素酶互补成像实验结果表明，在 MdJAZ1 存在下，MdTRB1 与 MdMYB9 的结合减弱（图 a-c）；外源施加 JA 可以部分恢复 MdTRB1 与 MdMYB9 的结合。对于 MdTRB1 在 JA 介导的花青素和原花青素积累中的作用机制，本研究建立了一个新的模型：MdTRB1 通过与 MdMYB9 互作，增强了 MdMYB9 对下游基因的转录***活性，进而正向调节了 JA 介导的花青素和原花青素累积。在 JA 缺乏的条件下，MdJAZ1 与 MdTRB1 互作，干扰了 MdTRB1 与 MdMYB9 之间的结合；在 JA 存在的条件下，MdJAZ1 被降解，MdTRB1 被释放出来以参与后续过程。酵母结构及功能介绍酵母的应用 。

酵母文库实验：本研究发现了一个硝酸盐响应的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2，它参与调节硝酸盐介导的苹果植株生长。利用酵母双杂交、蛋白质 pull-down、BiFC 实验证实，MdBT2 可以与一个 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作，这种互作是 MdRGL3a 蛋白经由 26S 蛋白酶体途径的泛素化及降解所必需的。此外，异源表达 MdBT2 部分回复了 MdRGL3a 过表达所导致的拟南芥生长抑制。综上表明，MdBT2 可以通过降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的丰度促进硝酸盐介导的植物生长。实验室培养显示，培养 45 天，苹果幼苗的高度和生物量随硝酸盐浓度的增加而增加（图 A-C）。smart酵母建库和gateway酵母建库,满足各类客户的需求。福建建库酵母文库报价

什么是酵母文库的构建? 只需构建自己需要研究蛋白的BD载体，就能和本司**储备的酵母文库进行筛库实验。四川宣传酵母文库报价

利用酵母文库进行双杂交筛选，结果显示 MdBT2 可以与 MdRGL3a 结合。MdRGL3a 编码 GA 信号阻遏物 DELLA 蛋白，主要分布于细胞核中。MdRGL3a 对于 GA 处理非常敏感，可以引起其发生降解，PAC 处理可以提高其稳定性。进一步的酵母一对一杂交验证实验表明，两者的结合依赖于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 结构域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif（图 A-B）。并通过 GST pull-down、BiFC 实验也证实了 MdBT2与 MdRGL3a 的结合（图 C-D）。细胞外降解实验显示，与对照相比，MdRGL3a 与过表达 MdBT2 的愈伤组织的总蛋白共同孵育，会导致 MdRGL3a 的降解加快；而与抑制 MdBT2 表达的愈伤组织的总蛋白共同孵育，会导致 MdRGL3a 的降解减缓（图 A）。并且蛋白酶体抑制剂 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解（图 B）。改变 MdRGL3a 表达量并不影响 MdBT2 的降解。以上结果表明，MdRGL3a 可能通过 26S 蛋白酶体途径发生降解，而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。四川宣传酵母文库报价

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