通过传统的酵母双杂交系统，以PtDAL1为诱饵，筛选样本来源于不同年龄段的油松cDNA文库。将获得的阳性克隆，10个一组，挑选到1个96孔板的PCR板孔中，获得10*96个阳性克隆的96孔板。以其中阳性克隆mix为模板，进行PCR扩增，并将所有的PCR产物进行纯化。使用纯化后的PCR产物，进行打断后构建二代测序文库，通过NGS测序，获得6G的阳性克隆数据。通过分析二代测序数据，获得阳性克隆基因信息（去冗余后获得135个互作子，包含21个TFs，2个TRs及酶类、热激蛋白、RNA结合等蛋白，部分见表1）。挑选重要的候选基因进行一对一验证（图2）。与拟南芥中同源基因AGL6的蛋白互作网络进行比对分析。对DAL1互作蛋白（DIPs）的基因表达谱、启动子中的顺势作用元件功能进行分析，并对DIPs进行GO注释（图3）。综合生信分析结果，构建针叶树老化途径的调控模型（图4）。酵母文库产品线由7个实验室组成，分别有RNA抽提室，RNA质检室、酵母建库室、筛库室等。天津酵母文库是什么

酵母双杂交、pulldown和BiFC实验均显示，MdTRB1可以通过其C末端与JAZ1蛋白互作。在苹果叶片和愈伤组织中过表达MdJAZ1，花青素和原花青素的累积受到明显抑制。在苹果叶片和愈伤组织***表达MdJAZ1/MdJAZ1，结果显示过表达MdJAZ1抑制了MdTRB1对花青素和原花青素累积的促进作用。Pull down 实验和荧光素酶互补成像实验结果表明，在 MdJAZ1 存在下，MdTRB1 与 MdMYB9 的结合减弱（图 a-c）；外源施加 JA 可以部分恢复 MdTRB1 与 MdMYB9 的结合。对于 MdTRB1 在 JA 介导的花青素和原花青素积累中的作用机制，本研究建立了一个新的模型：MdTRB1 通过与 MdMYB9 互作，增强了 MdMYB9 对下游基因的转录***活性，进而正向调节了 JA 介导的花青素和原花青素累积。在 JA 缺乏的条件下，MdJAZ1 与 MdTRB1 互作，干扰了 MdTRB1 与 MdMYB9 之间的结合；在 JA 存在的条件下，MdJAZ1 被降解，MdTRB1 被释放出来以参与后续过程。吉林什么是酵母文库文章中酵母文库实验由欧易生物完成。

酵母文库实验本研究鉴定了一个可以与MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。实验表明，MdTRB1可以正向调节花青素和原花青素的累积。MdTRB1与MdMYB9结合可以增强后者对下游基因的转录***活性。而MdTRB1与MdJAZ1的结合，可以干扰其与MdMYB9的互作，进而负向调控MdTRB1介导的对花青素和原花青素积累的促进作用。本研究表明，JAZ1-TRB1-MYB9复合物可以动态调控JA介导的花青素和原花青素的积累。本研究为进一步研究JA对花青素和原花青素生物合成的调节提供了新见解。

酵母文库实验:MAPK级联***是植物防御病原体入侵信号传导过程中的关键事件，MAPKs靶向并磷酸化调节下游基因转录的转录因子，**终响应病原菌的侵入。WRKYs转录因子是MAPK级联的重要目标，在植物对各种病原体的抗性中起着关键作用。苹果如何响应炭疽菌入侵，将信号传导到细胞内，以及哪个转录因子负责协调促进GLS耐受均尚不清楚。本研究在苹果炭疽叶枯病易感品种“嘎拉”中发现了一个由苹果炭疽菌******诱导的转录因子MdWRKY17。在6个易感苹果种质中，MdWRKY17表达水平***高于6个耐受苹果种质，同时对应的水杨酸含量降低，证实了MdWRKY17介导的水杨酸降解在GLS耐受中的关键作用。酵母文库筛选方案可提供核体系和膜体系筛库工作。

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文章中酵母文库实验由欧易生物完成。2021 年 3 月，扬州大学陈忱教授为通讯作者，在 The Plant Journal 杂志（IF: 6.141）在线发表了题为“The rice LEC1-like transcription factor OsNF-YB9 interacts with SPK, an endosperm specific sucrose synthase protein kinase, and functions in seed development”的研究论文，报道了 OsNF-YB9 在调控水稻种子发育中的作用机制。NF-Y转录因子家族成员LEC1在拟南芥胚胎发生和种子发育中发挥了重要作用。水稻中的OsNF-YB9和OsNF-YB7是拟南芥LEC1的同源基因。这些LEC1同源基因在水稻中的作用尚未经报道。天津酵母文库是什么

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