欧易酵母文库助力苹果花青素合成调控机制研究。近日，山东农业大学郝玉金、由春香教授为共同通讯作者，在ThePlantJournal(IF:6.141)期刊发表了题为“JasmonateinducesanthocyaninandproanthocyanidinbiosynthesisinapplebymediatingtheJAZ1-TRB1-MYB9complex”的研究论文，报道了茉莉酸通过介导JAZ1-TRB1-MYB9复合物诱导苹果中花青素和原花青素的生物合成。山东农业大学安建平博士为***作者，文章中酵母文库实验由欧易生物协助完成。酵母文库筛选研究多年建库与筛选经验验证。甘肃应用酵母文库

酵母文库实验：本研究发现了一个硝酸盐响应的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2，它参与调节硝酸盐介导的苹果植株生长。利用酵母双杂交、蛋白质 pull-down、BiFC 实验证实，MdBT2 可以与一个 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作，这种互作是 MdRGL3a 蛋白经由 26S 蛋白酶体途径的泛素化及降解所必需的。此外，异源表达 MdBT2 部分回复了 MdRGL3a 过表达所导致的拟南芥生长抑制。综上表明，MdBT2 可以通过降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的丰度促进硝酸盐介导的植物生长。实验室培养显示，培养 45 天，苹果幼苗的高度和生物量随硝酸盐浓度的增加而增加（图 A-C）。河南品质酵母文库报价酵母文库 技术服务欧易生物分子互作一站式服务。

酵母杂交试验:随着分子生物学研究进入以蛋白质组学为标志的后基因组时代，蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质-DNA相互作用已成为互作组学研究的热门主题。人类基因粗略约编码2万种蛋白，只算一对一的相互作用种类也有12万到100万种。而加上动态变化，每个物种、个体、细胞中都存在着一张张不同的互作网络图，这一张张图谱中，蕴藏着各种生命的奥秘。有两种通用的相互作用组图谱绘制方式：第一种酵母杂交试验，通过偶联基因表达体现细胞内发生直接相互作用的蛋白对。第二种是通过抗体/标签分离纯化复合体，然后用质谱鉴定复合体内部组分，识别直接相互作用或间接相互作用的蛋白质。两种高通量方法彼此互补，相互验证。

酵母双杂交实验表明，PtMADS11 与 PtDAL1 之间存在直接的相互作用（图 C），并通过 BiFC、GST pull-down 得以证实（图 D-E）。为进一步研究在年龄信号调控中的作用机制，分别构建了过表达PtDAL1和PtMADS11的拟南芥。与对照相比，过表达PtDAL1***提前了拟南芥的营养-生殖时相转换（图A），证实PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了关键作用。过表达PtMADS11植株在短日照下表现出早开花和花序结构过早终止，表明PtMADS11在开花调节和花序内分生组织命运起到调控作用。在拟南芥中利用年龄调控通路不同节点关键基因突变体进行功能互补实验，结果显示过表达PtDAL1可以恢复由于过表达miR156导致的开花延迟，但ft缺失会导致PtDAL1失活，PtDAL1过表达也不能恢复soc1-1-2突变体的表型，表明PtDAL1依赖或处于FT/SOC1的上游。而过表达PtMADS11可以恢复由过表达miR156或ft缺失导致的开花延迟，表明PtMADS11对开花的调控不依赖于miR156或FT。酵母文库和测序建库是什么？。

单杂交筛选为了挖掘影响ALA诱导苹果黄酮醇积累的关键性调控因子，作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 为诱饵，通过酵母单杂交筛选了ALA处理后的苹果愈伤组织cDNA文库。结果显示筛选出的蛋白质主要参与光合作用调控、碳糖代谢、氧化/渗透胁迫响应、***信号转导、木质素生物合成、果实成熟发育等过程，以及一些功能未知的蛋白质。其中， MdSCL8转录因子，由于其在草莓中的同源基因已被报导与黄酮的合成有关，引起了研究者的注意。进一步通过Y1H assay验证确认了MdSCL8可以与MdFLS1启动子互作（图2A）。通过双荧光素酶实验和GUS检测，发现MdSCL8可以负向调控MdFLS1启动子活性（图2B-D）。专业化的筛库流程，多重质检保证质量。初筛+复筛提高目标阳性克隆质粒精确度。甘肃应用酵母文库

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酵母单杂交筛选：（4）在筛选到的转录因子中，***GL1促进HIV-2转录。***GL1在免疫细胞中***表达，并与HIV的其他转录***因子，即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用，本研究中显示HEK293T细胞中，***GL1过表达后，与LTR连接的萤火素酶表达上升近2倍，说明***GL1是一个转录***因子。值得一提的是，文章的背景介绍内容中，对应用其他技术（如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等）对HIV转录调控方向的已有成果分析，发现这些方法为HIV-1的复制和潜伏期提供了见解，但并没有直接评估转录因子的结合和功能。文章中也对酵母单杂交技术与其他互作组技术（如Chip-seq、motif预测）进行了比较分析，发现eY1H技术对已识别因子的验证率为30-60%，同等或优于其他技术。甘肃应用酵母文库

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