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江西酵母文库

来源: 发布时间:2022-07-06

酵母单杂交筛选:(4)在筛选到的转录因子中,***GL1促进HIV-2转录。***GL1在免疫细胞中***表达,并与HIV的其他转录***因子,即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用,本研究中显示HEK293T细胞中,***GL1过表达后,与LTR连接的萤火素酶表达上升近2倍,说明***GL1是一个转录***因子。值得一提的是,文章的背景介绍内容中,对应用其他技术(如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等)对HIV转录调控方向的已有成果分析,发现这些方法为HIV-1的复制和潜伏期提供了见解,但并没有直接评估转录因子的结合和功能。文章中也对酵母单杂交技术与其他互作组技术(如Chip-seq、motif预测)进行了比较分析,发现eY1H技术对已识别因子的验证率为30-60%,同等或优于其他技术。合作文章上百篇,平均影响因子高达7.124 欧易生物酵母文库。江西酵母文库

蛋白被泛素化后(即蛋白上结合了泛素),意味着将要被运往蛋白酶体降解,一般用于降解细胞内老弱病残蛋白,再回收利用。同时也被用于排除异己,抵御外敌。该过程需要一系列酶介导:泛素***酶(E1)、泛素偶联酶(E2)和泛素E3连接酶(E3)。其中E3是起特异性识别作用的,即决定谁该被降解,不能把好同志降解掉。所以E3基因很多,植物中主要有四种类型:HECT、RING、U-box和CRLs。其中CRLs是植物中含量**丰富的E3连接酶。本研究中,通过酵母双杂交筛选到的标题蛋白MdBT2,整好是CRLs亚家族之一。因此作者推测MdBT2可能在与ApNMV1a结合后,起到了促进其泛素化和降解的作用。江西酵母文库专业酵母文库构建和筛选公司多年经验。

通过酵母双杂交进行筛选,结果显示 SWC6 可以在蓝光下与 CRY1 相互作用(图 A-C)。同样,酵母双杂交实验显示 CRY2 也可以在蓝光下与 SWC6 相互作用(图 D)。并通过 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验(图 E-L)证实 CRY1、CRY2 与 SWC6 的结合是蓝光依赖性的。SWC6 是真核生物中已报道的 SWR1 复合物亚基,负责催化 H2A.Z 在染色质上的替换。已报道 SWR1 复合物中 SWC6 可以与 ARP6 亚基结合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验(图 A-H)显示,CRY1、CRY2 可以蓝光依赖性与 ARP6 结合。

利用酵母双杂交技术进行筛选,结果显示SP8可以与水稻OsMYC3蛋白相互作用,并且二者互作关系通过酵母一对一互作、BiFC、Co-IP、LCI实验得以验证(图A-C)。利用截短的SP8进行酵母一对一互作和Co-IP检测表明,与OsMYC3的结合依赖于SP8的NTP结构域(图D-E);同样,OsMYC3的TAD结构域也是二者互作所必不可少的(图F)。酵母双杂交、BiFC实验表明,OsMYC3可以与OsJAZ相互作用。经茉莉酸处理,野生对照株根的长度明显被抑制、一系列JA生物合成和信号传导相关基因表达量上升,但Osmyc3突变体中抑制程度减轻、JA相关基因表达量上升减少。进口试剂高服务质量市场份额大酵母文库。

酵母双杂交、GSTpull-down实验显示,SWC6可以直接与HY5、HYH相互作用(图A-C)。pull-down实验显示ARP6同样可以与HY5、HYH相互作用(图D)。split-LUC、Co-IP实验证实HY5可以与SWC6、ARP6结合(图E-J)。下胚轴表型分析显示,蓝光下arp6hy5hyh三突变体下胚轴长度明显大于arp6突变体、hy5hyh双突变体,表明ARP6和HY5有可能通过不同途径调控下胚轴的发育。Semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验显示,蓝光下,在 CRY1 存在下,SWC6 与 ARP6 的结合***增强。表明蓝光***的 CRY1 可能通过蓝光依赖的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增强 SWC6 与 ARP6 的结合。酵母文库已知蛋白互作灵活定制建库。江西酵母文库

酵母杂交技术是很巧妙且很好用的蛋白/蛋白,蛋白/DNA等分子互作检测的技术。江西酵母文库

文章中酵母双杂交文库由欧易生物制备。2021年5月,北京林业大学钮世辉副教授为通讯作者,在PlantPhysiology杂志(IF:6.902)在线发表了题为“MADS-boxtranscriptionfactorsMADS11andDAL1interacttomediatethevegetative-to-reproductivetransitioninpine”的研究论文,深入探讨了油松中营养生长-生殖生长时相转变调控的分子机制。北京林业大学马晶晶博士为***作者,文章中酵母双杂交文库由欧易生物制备。本研究通过 7 个树龄的油松样品转录组测序,鉴定到一个与年龄信号***相关的基因??椋媚?榘?33 个转录因子,包括 SOC1-like、DAL1 等。江西酵母文库

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