欧易酵母文库助力小麦根研究,本研究克隆了小麦的 ERFs 转录因子家族 1 个成员 TaSRL1，它可以调控生长素生物合成、转运和信号转到相关基因的表达，并与生长素转运基因 TaPIN2 启动子序列结合促进其表达，进而抑制根的生长。此外，TaSRL1 可以与 JAZ 蛋白 TaTIFY9 相互作用，破坏 TaSRL1 对 TaPIN2 表达的促进作用。因此 TaSRL1 可整合根生长过程中生长素和 JA 信号，负调控根的伸长。TaSRL1-4A 标记对小麦育种过程中根系、株形和产量的改良具有重要研究意义。酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸。上海酵母文库质量

酵母双杂交文库：疟疾是人类**古老的疾病之一，每年4月25日是世界防治疟疾日，疟疾目前仍是公众健康所面临的**严重威胁之一?；谇噍锼氐牧洗矸ǎˋCTs）是WHO推荐的比较好处理方案。因发现具有抗疟作用的青蒿素，挽救了数百万人的生命，屠呦呦教授获得了2015年诺贝尔生理或医学奖，从青蒿中分离出的青蒿素被推荐作为抗疟疾的优先药物。之前研究表明，茉莉酸（JA）介导促成的青蒿素积累依赖于光，转录因子HY5也通过参与光信号调控促进青蒿素合成。然而，光与JA相互作用机制及其对青蒿素生物合成调控的潜在机理仍未得到解决。湖南酵母文库领域专业化的筛库流程，多重质检保证质量。初筛+复筛提高目标阳性克隆质粒精确度。

酵母单杂交筛选：（4）在筛选到的转录因子中，***GL1促进HIV-2转录。***GL1在免疫细胞中***表达，并与HIV的其他转录***因子，即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用，本研究中显示HEK293T细胞中，***GL1过表达后，与LTR连接的萤火素酶表达上升近2倍，说明***GL1是一个转录***因子。值得一提的是，文章的背景介绍内容中，对应用其他技术（如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等）对HIV转录调控方向的已有成果分析，发现这些方法为HIV-1的复制和潜伏期提供了见解，但并没有直接评估转录因子的结合和功能。文章中也对酵母单杂交技术与其他互作组技术（如Chip-seq、motif预测）进行了比较分析，发现eY1H技术对已识别因子的验证率为30-60%，同等或优于其他技术。

酵母文库实验:本研究报道了 OsNF-YB9 和 OsNF-YB7 在水稻中呈现亚功能化。OsNF-YB7 主要在胚中表达，而 OsNF-YB9 主要在发育中的胚乳中表达。在拟南芥 lec1-1 中异源表达 OsNF-YB9 或 OsNF-YB7 可以弥补 lec1-1 缺陷。OsNF-YB9 功能缺失导致种子发育异常，种子变长、变窄、变薄，垩白率较高。此外，osnf-yb9 中淀粉合成相关基因的表达紊乱。OsNF-YB9 可以与主要在水稻胚乳中表达的蔗糖合酶蛋白激酶 SPK 相互作用。spk 敲除突变体种子与 osnf-yb9 突变体种子都表现出垩白增加的表型。OsNF-YB9 在水稻和拟南芥中的异位表达导致了种子变小。综上表明，OsNF-YB9 在水稻种子发育中起到关键调控作用。酵母文库已知蛋白互作灵活定制建库。

利用酵母文库进行双杂交筛选，结果显示 MdBT2 可以与 MdRGL3a 结合。MdRGL3a 编码 GA 信号阻遏物 DELLA 蛋白，主要分布于细胞核中。MdRGL3a 对于 GA 处理非常敏感，可以引起其发生降解，PAC 处理可以提高其稳定性。进一步的酵母一对一杂交验证实验表明，两者的结合依赖于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 结构域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif（图 A-B）。并通过 GST pull-down、BiFC 实验也证实了 MdBT2与 MdRGL3a 的结合（图 C-D）。细胞外降解实验显示，与对照相比，MdRGL3a 与过表达 MdBT2 的愈伤组织的总蛋白共同孵育，会导致 MdRGL3a 的降解加快；而与抑制 MdBT2 表达的愈伤组织的总蛋白共同孵育，会导致 MdRGL3a 的降解减缓（图 A）。并且蛋白酶体抑制剂 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解（图 B）。改变 MdRGL3a 表达量并不影响 MdBT2 的降解。以上结果表明，MdRGL3a 可能通过 26S 蛋白酶体途径发生降解，而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。初筛+复筛提高目标阳性克隆质粒精确度。一对一筛库验证服务，客户无需再次验证。湖南酵母文库领域

液态酵母单双杂高通量筛库方法及其应用。上海酵母文库质量

酵母双杂交实验表明，PtMADS11 与 PtDAL1 之间存在直接的相互作用（图 C），并通过 BiFC、GST pull-down 得以证实（图 D-E）。为进一步研究在年龄信号调控中的作用机制，分别构建了过表达PtDAL1和PtMADS11的拟南芥。与对照相比，过表达PtDAL1***提前了拟南芥的营养-生殖时相转换（图A），证实PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了关键作用。过表达PtMADS11植株在短日照下表现出早开花和花序结构过早终止，表明PtMADS11在开花调节和花序内分生组织命运起到调控作用。在拟南芥中利用年龄调控通路不同节点关键基因突变体进行功能互补实验，结果显示过表达PtDAL1可以恢复由于过表达miR156导致的开花延迟，但ft缺失会导致PtDAL1失活，PtDAL1过表达也不能恢复soc1-1-2突变体的表型，表明PtDAL1依赖或处于FT/SOC1的上游。而过表达PtMADS11可以恢复由过表达miR156或ft缺失导致的开花延迟，表明PtMADS11对开花的调控不依赖于miR156或FT。上海酵母文库质量

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