斑马鱼(zebrafish)是一种用于生物学研究的模式生物。它们在多种方面都被用于研究,包含发育、遗传、生理和行为等。其间一个常用的研究办法是运用多孔板试验,它可以用来测验斑马鱼幼鱼的行为和认知才能。多孔板试验是一种基于水迷宫的试验,通常由一个容器、一个多孔板和一些食物组成。试验的过程中,斑马鱼幼鱼被放置在容器中,并被要求经过多孔板来取得食物奖赏。试验的目的是测验斑马鱼幼鱼的学习和记忆才能,以及其对环境的认知才能。斑马鱼实验在中药抗ancer研究中发挥重要作用,帮助筛选新的医疗靶点和潜在医疗药物。山西斑马鱼实验文献
当各种内源性和外源性DNA损害因子诱发细胞DNA链断裂时,其超螺旋结构受到破坏,在细胞裂解液作用下,细胞膜、核膜等膜结构受到破坏,细胞内的蛋白质、RNA以及其他成分均扩散到细胞裂解液中,而核DNA因为分子量太大只能留在原位。在中性条件下,DNA可进入凝胶发生搬迁,而在碱性电解质的作用下,DNA发生解螺旋,损害的DNA断链及片段被释放出来。因为这些DNA的分子量小且碱变性为单链,所以在电泳过程中带负电荷的DNA会离开核DNA向正极搬迁构成“彗星”状图像,而未受损害的DNA部分保持球形。DNA受损越严重,发生的断链和断片越多,长度也越小,在相同的电泳条件下搬迁的DNA量就愈多,搬迁的距离就愈长。通过测定DNA搬迁部分的光密度或搬迁长度就可以测定单个细胞DNA损害程度,然后确认受试物的作用剂量与DNA损害效应的联系。彗星试验检测低浓度基因毒物具有高灵敏性,研究的细胞不需处于有丝分裂期。一起,这种技术只需要少数细胞。四川斑马鱼实验公司你不知道的水中小白鼠:斑马鱼,正在默默为科学试验奉献!
斑马鱼的皮肤结构和功用与人类高度类似,含有基底层、棘层、颗粒层、通明层和表皮角质细胞层。因而,业内普遍认为以斑马鱼胚胎为试验基础的结果,在一般情况下适用于人体,可对化妆品功效宣称进行检测评价,例如抗氧化、抗糖基化、抗老、淡斑亮肤等等。依据已存案成功的案例显示,若不包含前期准备的时间,只是上样检测到出具结果,斑马鱼检测的周期要比其他检测方式周期更短且本钱更低。另外,依据欧盟动物?;し?,出生5天以内的斑马鱼胚胎和幼鱼不属于动物,能够代替哺乳动物测试,契合3R(代替、减少、优化)原则。因而,斑马鱼检测在动物福利层面也契合了年代潮流。
Openfieldtest(旷场试验)为了探究运动和自发活动,我们描绘了鱼的行为当它们在Plexiglasopen-fieldapparatus(装置、设备、仪器)中自在探究时(直径20厘米;高10厘米)(图1a)。鱼别离转移到鱼缸中10分钟;8分钟内的轨道由顶部视图摄像机记录下来进行分析。在试验过程中,测量了受试者在中心和边缘区域花费的时刻、移动的总间隔(cm)和平均速度(cm/s)。2、Noveltanktest(新型水槽测验)本发明公开了一种通明的1.5升梯形水槽检测装置(15.2×27.9×22.5×7.2cm;高×上底×下底×宽)(图1c)。鱼在早上(9:00)或晚上(21:00)被放在这个水槽里10分钟。8分钟记录他们的行为轨道。为了进行轨道分析,新型水槽实际上被分为三个水平段(上、中、下)。斑马鱼胚胎发育透明,便于观察和研究,是斑马鱼实验的一大优势。
在药物代谢动力学研究方面,斑马鱼幼鱼展现出独特优势。其肝脏代谢酶(如CYP3A65)与人类CYP3A4同源性达76%,且肠道屏障功能尚未完全建立,使得药物吸收、分布、代谢过程可视化。瑞士诺华公司通过LC-MS/MS技术检测斑马鱼幼鱼体内药物浓度,发现某新型kang生素的生物利用度较传统模型预测值高18%,该差异源于斑马鱼肠道中特异性转运蛋白的表达差异。这一发现促使药物剂型设计优化,使候选药物在II期临床试验中的疗效提升30%。斑马鱼在中药毒性研究中的应用日益宽泛。中国中医科学院团队通过斑马鱼胚胎热休克蛋白(Hsp70)启动子驱动荧光报告基因,构建了中药肝毒性的实时监测系统。实验显示,含马兜铃酸的中药复方可使斑马鱼胚胎肝脏区域荧光强度在24小时内增加5倍,而传统生化检测需72小时才能达到相同灵敏度。该技术已应用于中药材质量控制,成功识别出多批次含微量肾毒性成分的饮片,为中药国际化提供了科学依据。斑马鱼幼鱼孔板实验需严格控制温度、光照及水质,确保实验数据准确可靠。陕西斑马鱼实验用途
斑马鱼实验遵循 3R 原则,优化实验设计减少动物使用数量。山西斑马鱼实验文献
斑马鱼在衰老研究中的应用亦取得重大突破。新加坡国立大学团队通过连续多代斑马鱼繁殖实验,发现子代胚胎的DNA甲基化水平与亲代年龄呈正相关,且这种表观遗传记忆可通过饮食干预部分逆转。通过构建端粒酶突变斑马鱼品系,发现端粒缩短导致干细胞功能衰退,进而引发多organ衰老表型。更关键的是,通过补充NAD+前体(NMN),可使突变体斑马鱼的寿命延长20%,并改善其运动能力和认知功能。这些发现为开发抑衰老药物提供了跨物种验证模型。山西斑马鱼实验文献